1.3.1. Tỡnh hỡnh nghiờn cứu bệnh cầu trựng ở nƣớc ngoài
Bệnh cầu trựng phổ biến khắp cỏc nƣớc trờn thế giới, gõy tổn hại lớn cho ngành chăn nuụi. Chớnh vỡ vậy cú rất nhiều nhà nghiờn cứu đó nghiờn cứu về tỏc hại của bệnh này, đồng thời đƣa ra biện phỏp phũng và trị bệnh cho gia sỳc.
Hasche M. R. và cs (1959) [66] khi nghiờn cứu bệnh cầu trựng ở 355
bũ tại Wisconsin, thấy 26% nhiễm cầu trựng loài E. ellipsoidalis, 20% nhiễm
cầu trựng loài E. cylindrica, 6% nhiễm cầu trựng loài E. brasilliensis, 42% nhiễm cầu trựng loài E. bukidnonensis và 3% nhiễm cầu trựng loài E. canadensis.
Hasbullah A. và cs (1990) [65] đó nghiờn cứu và phõn tớch mẫu phõn của 2019 bũ ở Nhật Bản trong thời gian 12 thỏng. Kết quả cho thấy: 19,3% mẫu phõn nhiễm cầu trựng và loài E. bovis cú tần suất xuất hiện nhiều nhất.
Ajayi J. A. (2004) [52] đó thu thập và phõn tớch mẫu phõn của 2.500 con bũ (1518 bũ cỏi và 982 bũ đực) ở bang Plateau của Nigeria trong vũng 2 năm (từ thỏng 1 năm 1992 đến thỏng 12 năm 1993) để nghiờn cứu về tỡnh hỡnh nhiễm, tỷ lệ nhiễm, thành phần loài cầu trựng theo mựa vụ, tớnh biệt, nhúm tuổi, giống và điều kiện nuụi dƣỡng chăm súc. Ảnh hƣởng của nhiệt độ đến sự tồn tại và hỡnh thành bào tử. Kết quả thu đƣợc nhƣ sau:
nhất là loài E. zuernii: 1043 mẫu (41,72%), thấp nhất là loài E. brasisliensis: 240 mẫu (9,6%).
Về lứa tuổi, kết quả nghiờn cứu cho thấy, bũ từ 10 - 14 thỏng tuổi nhiễm cầu trựng với tỷ lệ cao nhất (79,3%); bũ từ 0 - 4 thỏng tuổi là 43,75%; 5 - 9 thỏng tuổi là 65,9%; 15 - 19 thỏng tuổi chiếm tỷ lệ 72,33%; 20 - 24 thỏng tuổi là 61,11%; từ 25 thỏng tuổi trở lờn là 43,2%.
Về mựa vụ, kết quả cho thấy, mựa mƣa bũ cú tỷ lệ nhiễm cao hơn mựa
khụ (68,35% so với 59,31%); Oocyst xuất hiện ở trong phõn sớm nhất khi bờ
đƣợc 14 ngày tuổi.
Kết quả nghiờn cứu cũng cho thấy, hỡnh thức chăn thả cũng ảnh hƣởng đến tỷ lệ nhiễm cầu trựng của bũ: trong 809 mẫu phõn của bũ đƣợc chăn thả theo hỡnh thức tự do cú 572 mẫu nhiễm cầu trựng (70,7%); nhƣng chỉ cú 388 mẫu nhiễm (62,48%) trong tổng số 621 mẫu phõn của bũ nuụi nhốt trong chuồng.
Về ảnh hƣởng của nhiệt độ đến sự tồn tại và triển của Oocyst cầu trựng
bờ, nghộ: trong khoảng nhiệt độ từ 5 - 100C Oocyst hầu nhƣ khụng phỏt triển đƣợc thành bào tử, tuy nhiờn chỳng cũng chƣa bị chết. Ở nhiệt độ 200
C và
nhiệt độ phũng thớ nghiệm thỡ Oocyst cú phỏt triển thành Oocyst cú sức gõy
bệnh nhƣng thời gian cần tới 7 - 9 ngày. Trong khoảng nhiệt độ từ 25 - 300
C cú từ 15 - 94% Oocyst phỏt triển thành Oocyst cú sức gõy bệnh. Vớ dụ, Oocyst
của loài E. pellita mất 3 ngày để phỏt triển thành Oocyst cú sức gõy bệnh ở biờn độ nhiệt này.
Mohamed M. Ghanem và cs (2008) [78] đó tiến hành thử nghiệm 3 loại thuốc trị cầu trựng trờn nghộ: nghộ trong thớ nghiệm đƣợc chia thành 3 nhúm (mỗi nhúm gồm 9 con), từ 1,5 - 4 thỏng tuổi, khối lƣợng bỡnh quõn 70 kg/con; nhúm thứ nhất dựng thuốc Toltrazuil với liều 20 mg/kgTT, nhúm thứ 2 dựng thuốc Sulphadimine với liều 125 mg/kgTT, nhúm thứ 3 dựng thuốc Amprolium liều dựng là 50 mg/kgTT. Sau khi dựng thuốc 13 và 35 ngày xột nghiệm lại phõn, đếm noón nang cầu trựng theo cỏc phƣơng phỏp thƣờng quy, kết quả cho thấy: Toltrazuril là thuốc cú tỏc dụng tốt nhất trong 3 loại thuốc trờn.
Nghiờn cứu về dịch tễ học bệnh cầu trựng ở bũ, Lassen B. (2009) [72] cho biết, trong 7 trang trại chăn nuụi bũ tiến hành nghiờn cứu vào thỏng 3 năm 2007 tại Lithuanian thỡ tỷ lệ cỏc mẫu phõn nhiễm Eimeria tại 7 trang trại này từ 27 - 73%, trung bỡnh 55%, tỷ lệ nhiễm thấp nhất là bờ dƣới 3 thỏng tuổi (23%), cao nhất là bờ từ 3 - 12 thỏng tuổi. Về cƣờng độ nhiễm: bờ dƣới 3 thỏng tuổi cú cƣờng độ nhiễm nặng cao nhất (10%), bờ trờn 12 thỏng tuổi cú cƣờng độ nhiễm nặng thấp nhất (0%). Tỏc giả cũng đó phỏt hiện đƣợc 11 loài
cầu trựng gõy bệnh, trong đú loài E. ellipsodalis cú trong 100% cỏc mẫu phõn
tớch, thấp nhất là loài E. pellita và E. bukidnonensis (14%).
Tiếp theo cỏc cụng trỡnh nghiờn cứu của cỏc tỏc giả trờn. Tauseef Ur Rehman và cs (2010) [85] khi nghiờn cứu về ảnh hƣởng của hệ thống chuồng nuụi, thức ăn và nƣớc uống của bờ nghộ tới tỷ lệ nhiễm cầu trựng ở bờ nghộ đó đƣa ra kết luận: bờ nghộ đƣợc nuụi theo hệ thống chuồng kớn, trờn nền đất cú tỷ lệ nhiễm cầu trựng cao hơn so với bờ nghộ đƣợc nuụi theo hỡnh thức ban ngày thả ra bói chăn, ban tối nhốt ở chuồng cú nền xi măng.
1.3.2. Tỡnh hỡnh nghiờn cứu bệnh cầu trựng bờ, nghộ trong nƣớc
Nƣớc ta cú điều kiện thời tiết khớ hậu thuận lợi cho Oocyst cầu trựng phỏt triển. Cầu trựng thƣờng nhiễm và gõy nhiều thiệt hại cho trõu, bũ ở nƣớc ta. Chớnh vỡ vậy, cú nhiều tỏc giả đó và đang nghiờn cứu bệnh cầu trựng.
Phạm Sỹ Lăng (2003) [20] cho biết: Ngoài một số bệnh truyền nhiễm, bệnh ký sinh trựng cũng gõy nhiều tỏc hại cho bũ sữa, trong đú cú bệnh cầu trựng.
Nguyễn Đức Tõn và cs (2004) khi khảo sỏt 708 bờ ở cỏc địa phƣơng
Nam Trung Bộ và Tõy Nguyờn thấy tỷ lệ nhiễm cầu trựng (Eimeria) là tƣơng
đối cao (56,78%). Đoàn Văn Phỳc và Lƣơng Tố Thu (1982) cho biết: bờ lai ở Ba Vỡ nhiễm 34,32% và Phự Đổng là 30,26%. Gần đõy, theo Phan Lục (1995), bũ cỏc tỉnh phớa Bắc nhiễm cầu trựng 14,2%. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Nguyễn Đức Tõn và cs (2005) [28] đó thu thập 433 mẫu phõn bờ từ 5 huyện, thành phố của 3 tỉnh: Đắc Lắc, Phỳ Yờn và Khỏnh Hoà, kiểm tra
Oocyst cầu trựng, kết quả đó xỏc định đƣợc 4 loài cầu trựng thuộc giống
Eimeria ký sinh ở bờ là: E. zuernii, E. bovis, E. ellipsoidalis và E. bukidnonensis. Từ kết quả nghiờn cứu trờn, cỏc tỏc giả đó kết luận: Oocyst cầu
trựng bờ cú thể tồn tại ở nhiệt độ 300C và độ ẩm 80% trong điều kiện phũng
thớ nghiệm tới 24 ngày; trong khi ở điều kiện tự nhiờn dƣới ỏnh sỏng mặt trời, chỳng chỉ tồn tại 2 ngày.
Lõm Thị Thu Hƣơng (2006) [10] đó xột nghiệm phõn của 620 bờ, cho thấy cú 272 mẫu nhiễm cầu trựng Eimeria (43,87%). Bờ dƣới 1 thỏng tuổi chƣa nhiễm cầu trựng, tỷ lệ nhiễm cầu trựng tăng dần đến mức cao nhất (60,89%) vào lỳc bờ 8 thỏng tuổi.
Khi phõn tớch tỷ lệ nhiễm cầu trựng theo trạng thỏi phõn, cỏc tỏc giả trờn cho biết: tỷ lệ nhiễm cầu trựng ở bờ bị tiờu chảy cao hơn bờ khụng tiờu chảy (54,16% so với 34,93%), kết quả bờ bị tiờu chảy nhiễm cầu trựng cao hơn so với nghiờn cứu của Lờ Minh Hà và cs (2000) [6] tại nụng trƣờng Phựng Thƣợng, Ninh Bỡnh (33,30%).
Về thành phần loài cầu trựng: qua việc định danh, cỏc tỏc giả này đó ghi nhận đƣợc sự cú mặt của 8 loài cầu trựng, đều là cỏc loài thƣờng gặp trờn bờ, nghộ. Trong cỏc mẫu phõn bị tiờu chảy, loài E. bovis hiện diện với tỷ lệ cao nhất (52,43%).
Phan Lục (2006) [25] đó dựng một số thuốc sau để điều trị bệnh cầu trựng bờ, nghộ:
- Sulfadimerazin 10 - 12 mg/kgTT, cho uống trong 4 ngày. Thụt nƣớc thuốc tớm 0,1% vào trực tràng.
- Rigecoccin: 10 mg/kgTT mỗi ngày. Cho uống 6 tuần liền. - Amprolium: 10 mg/kgTT mỗi ngày. Cho uống 4 ngày liền. - Sulfaquinoxalin: 15 mg/kgTT, cho uống 4 ngày liền.
Ngoài ra, cú thể dựng những thuốc sau: Monensis, Lasalocid, Nitrofurazone, Decoquinate, Toltrazuril và Dicrazulin.
Tiếp theo cụng trỡnh nghiờn cứu của cỏc tỏc giả trờn, Giang Hoàng Hà và cs (2008) [5] đó thu thập 146 mẫu phõn bũ sữa từ cỏc hộ chăn nuụi tại Hà Nội và vựng phụ cận, sử dụng phƣơng phỏp xột nghiệm ký sinh trựng thƣờng quy, kết quả cho thấy: tỡnh hỡnh nhiễm cầu trựng ở bũ sữa tại cỏc địa bàn điều tra cũng khỏ cao (78,77%). Trong đú, bờ cú tỷ lệ nhiễm cao (93,22%), cao hơn so với bũ (68,97%).
Ở cỏc vựng khỏc nhau thỡ tỷ lệ nhiễm bệnh cầu trựng trờn bũ cũng khỏc nhau. Tỡnh trạng nhiễm cầu trựng với tỷ lệ cao ở cỏc đàn bũ sữa đƣợc kiểm tra cho thấy, vấn đề vệ sinh cho bũ sữa chƣa đƣợc chỳ trọng, phõn khụng đƣợc thu gom, nền chuồng khụng đƣợc cọ rửa sạch trƣớc khi cho ăn. Ngƣời chăn nuụi chƣa cú ý thức trong việc giữ vệ sinh cho đàn bũ.
Chƣơng 2
NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIấN CỨU 2.1. ĐỐI TƢỢNG VÀ VẬT LIỆU NGHIấN CỨU
Đối tƣợng nghiờn cứu:
- Bờ, nghộ dƣới 1 năm tuổi nuụi tại cỏc nụng hộ và cỏc trại tập thể ở 3 huyện Yờn Thế, Tõn Yờn và Yờn Dũng thuộc tỉnh Bắc Giang.
- Bệnh cầu trựng bờ, nghộ.
Vật liệu nghiờn cứu:
- Mẫu phõn tƣơi của bờ, nghộ; mẫu đất bề mặt, mẫu nƣớc, mẫu cỏ ở bói
chăn thả và mẫu đất (cặn) nền chuồng và khu vực xung quanh chuồng nuụi bờ, nghộ.
- Mẫu mỏu (để xỏc định sự thay đổi một số chỉ số huyết học).
- Oocyst cầu trựng (để xỏc định sự phỏt triển và tồn tại của Oocyst ở ngoại cảnh).
- Phõn bờ, nghộ, lỏ xanh, tro bếp và vụi bột (để theo dừi khả năng sinh
nhiệt của cụng thức ủ và tỏc dụng diệt Oocyst cầu trựng trong phõn ủ nhiệt
sinh học).
- Mụi trƣờng đất với cỏc độ ẩm: 10%, 10 - 20%, 20 - 30%, 30 - 40%,
40%.
- Kớnh hiển vi quang học, dung dịch muối NaCl bóo hoà, buồng đếm Mc. Master, hoỏ chất và cỏc dụng cụ thớ nghiệm khỏc. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Thuốc trị cầu trựng:
+ Vinacoc. ACB (100 g cú: Sulfachorpyrasin sodium 30 g; Lactose 70 g), liều 30 mg/kgTT/ngày.
+ RTD-Coccistop (100 g cú: Sulfadimethoxin 28 g; Trimethoprim 6 g, tỏ dƣợc vừa đủ), liều 136 mg/kgTT/ngày.
+ NOVA-COC 5% (100 ml dung dịch cú: Toltrazuril 5 g, tỏ dƣợc vừa đủ), liều 25 mg/kgTT/ngày.
2.2. ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN NGHIấN CỨU
Địa điểm nghiờn cứu - Địa điểm thu thập mẫu:
+ Đề tài đƣợc thực hiện ở cỏc xó thuộc 3 huyện của tỉnh Bắc Giang (huyện Yờn Thế, Tõn Yờn và Yờn Dũng).
- Địa điểm xột nghiệm mẫu:
+ Phũng thớ nghiệm Khoa Chăn nuụi Thỳ y - Trƣờng Đại học Nụng Lõm Thỏi Nguyờn.
+ Bộ mụn Bệnh lý - truyền nhiễm, Khoa Thỳ y - Trƣờng Đại học Nụng nghiệp Hà Nội.
Thời gian nghiờn cứu: Từthỏng 8 năm 2010 đến thỏng 8 năm 2011.
2.3. NỘI DUNG NGHIấN CỨU
2.3.1. Nghiờn cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cầu trựng bờ, nghộ ở ba huyện thuộc tỉnh Bắc Giang
2.3.1.1. Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trựng ở bờ, nghộ
- Xỏc định loài cầu trựng ký sinh ở bờ, nghộ tại 3 huyện Yờn Thế, Tõn
Yờn và Yờn Dũng.
- Tỷ lệ và cƣờng độ nhiễm cầu trựng bờ, nghộ ở một số địa phƣơng.
2.3.1.2. Nghiờn cứu sự ụ nhiễm Oocyst cầu trựng bờ, nghộ ở ngoại cảnh
- Xỏc định sự ụ nhiễm Oocyst cầu trựng bờ, nghộ ở chuồng trại và khu
vực xung quanh chuồng trại.
- Xỏc định sự ụ nhiễm Oocyst cầu trựng ở bói chăn thả bờ, nghộ (ở đất bề mặt, ở vũng nƣớc trờn bói chăn thả).
2.3.2. Nghiờn cứu đặc điểm bệnh lý, lõm sàng của bệnh cầu trựng bờ, nghộ
- Vai trũ của cầu trựng trong hội chứng tiờu chảy ở bờ, nghộ.
- Tỷ lệ bờ nghộ cú những biểu hiện lõm sàng của bệnh cầu trựng.
- Sự thay đổi một số chỉ số huyết học của bờ, nghộ bị bệnh cầu trựng.
2.3.3. Nghiờn cứu biện phỏp phũng, trị cầu trựng cho bờ, nghộ
- Xỏc định cụng thức ủ phõn nhiệt sinh học cú khả năng sinh nhiệt tốt
để diệt Oocyst cầu trựng bờ, nghộ.
- Nghiờn cứu tỏc dụng của thuốc trị cầu trựng bờ, nghộ.
- Bƣớc đầu đề xuất quy trỡnh phũng, trị bệnh cầu trựng cho bờ, nghộ. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
2.4. BỐ TRÍ THÍ NGHIỆM VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIấN CỨU
2.4.1. Bố trớ điều tra và phƣơng phỏp xỏc định tỡnh hỡnh nhiễm cầu trựng ở bờ, nghộ ở bờ, nghộ
2.4.1.1. Bố trớ thu thập mẫu phõn
Bố trớ thu thập mẫu theo phƣơng phỏp lấy mẫu chựm nhiều bậc, thu thập và xột nghiệm phõn của 1516 bờ, nghộ dƣới 1 năm tuổi tại 3 huyện của tỉnh Bắc Giang.
Việc thu thập, xột nghiệm mẫu phõn bờ, nghộ ở 3 huyện đƣợc bố trớ cụ thể nhƣ sau:
Địa phƣơng (huyện, xó) Số bờ, nghộ xột nghiệm phõn (con) Yờn Thế Bố Hạ 121 An Thƣợng 127 Canh Nậu 131 Đồng Hƣu 125 Tõn Yờn Lam Cốt 124 Việt Ngọc 126 Ngọc Chõu 119 Phỳc Sơn 134 Yờn Dũng Lóo Hộ 125 Tõn Mỹ 116 Hƣơng Giỏn 129 Tõn An 139 Tớnh chung 1516
2.4.1.2. Phƣơng phỏp định loài và xỏc định tỡnh hỡnh nhiễm cầu trựng ở bờ, nghộ
* Phương phỏp định loại cầu trựng
- Định loài cầu trựng theo khoỏ định loài của Ajayi J. A. (2004) [52], Daugschies A., Njadrowski M. (2005) [55] và Levine N. (Ed) (1985) [75], dựa trờn 2 căn cứ:
- Thời gian Oocyst sản sinh bào tử ở ngoại cảnh:
Đƣa Oocyst cầu trựng đó thu nhận đƣợc vào dung dịch Bicromate kali
2,5%, lắc nhẹ thƣờng xuyờn và theo dừi sự phỏt triển của Oocyst cầu trựng.
Ghi lại thời gian Oocyst phỏt triển thành Oocyst cú sức gõy bệnh.
* Phương phỏp lấy mẫu, xột nghiệm và đỏnh giỏ cường độ nhiễm cầu trựng
- Phƣơng phỏp thu thập mẫu: Lấy mẫu theo phƣơng phỏp lấy mẫu chựm nhiều bậc.
Mẫu phõn: Thu thập ngẫu nhiờn ở bờ, nghộ nuụi ở nụng hộ, trại tập thể và gia đỡnh. Lấy mẫu phõn trực tiếp từ trực tràng con vật. Để riờng mỗi mẫu phõn vào một tỳi nilon nhỏ, mỗi tỳi đều cú nhón ghi: loại gia sỳc (bờ, nghộ), địa điểm, tuổi, trạng thỏi phõn, thời gian lấy mẫu và cỏc biểu hiện lõm sàng của bờ, nghộ (những thụng tin này cũng đƣợc ghi vào nhật ký đề tài). Trong quỏ trỡnh lấy mẫu, căn cứ vào yếu tố cần xỏc định cú liờn quan đến đặc điểm dịch tễ để lấy mẫu cho tƣơng đối đồng đều về cỏc yếu tố khỏc.
Cỏc mẫu đƣợc xột nghiệm ngay trong ngày (hoặc bảo quản ở nhiệt độ 2 - 4o
C và xột nghiệm trong thời gian khụng quỏ 3 ngày).
* Phương phỏp xỏc định tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trựng
- Phƣơng phỏp xỏc định tỷ lệ nhiễm cầu trựng: Tất cả cỏc mẫu phõn bờ,
nghộ đều đƣợc xột nghiệm bằng phƣơng phỏp Fulleborn với dung dịch muối
NaCl bóo hũa, tỡm Oocyst dƣới kớnh hiển vi (độ phúng đại x 100 và x 400).
- Phƣơng phỏp xỏc định cƣờng độ nhiễm cầu trựng: Cƣờng độ nhiễm cầu trựng đƣợc xỏc định bằng số lƣợng Oocyst/g phõn (đếm trờn buồng đếm
Mc.Master), nhƣ mụ tả của Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2008) [15].
- Phƣơng phỏp làm: Cõn 4 gam phõn vào cốc thủy tinh, thờm 56 ml
1 cốc khỏc và khuấy đều. Trong khi khuấy, lấy cụng tơ hỳt hỳt lấy dung dịch phõn nhỏ đầy cả hai buồng đếm Mc. Master (mỗi buồng đếm cú dung tớch 0,5 ml). Để yờn 5 phỳt rồi kiểm tra dƣới kớnh hiển vi (độ phúng đại 10 x 10).
Đếm toàn bộ số Oocyst trong những ụ của hai buồng đếm, rồi tớnh theo
cụng thức:
Số Oocyst/gam phõn =
Tổng số Oocyst ở 2 buồng đếm x 60 (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
4
(tổng số Oocyst ở 2 buồng đếm là số Oocyst cú trong 1 ml dung dịch phõn).
Căn cứ vào số Oocyst/gam phõn và biểu hiện lõm sàng của bờ, nghộ, quy
định mức cƣờng độ nhiễm nhƣ sau:
+ ≤ 500 Oocyst/g phõn: cƣờng độ nhiễm nhẹ (+).
+ 500 - 1000 Oocyst/g phõn: cƣờng độ nhiễm trung bỡnh (++).
+ 1000 - 5000 Oocyst/g phõn: cƣờng độ nhiễm nặng (+++).
+ 5000 Oocyst/g phõn: cƣờng độ nhiễm rất nặng (++++).
2.4.2. Phƣơng phỏp theo dừi và xỏc định tỷ lệ nhiễm cầu trựng theo tuổi bờ, nghộ bờ, nghộ
Quy định cỏc lứa tuổi bờ, nghộ
Tuổi bờ, nghộ đƣợc xỏc định bằng cỏch xem răng và hỏi chủ gia sỳc. Phõn tuổi bờ, nghộ thành 4 lứa tuổi:
2 thỏng tuổi.
2 - 4 thỏng tuổi.
4 - 8 thỏng tuổi. > 8 - 12 thỏng tuổi.
* Phương phỏp bố trớ theo dừi
Chỳng tụi theo dừi bờ, nghộ ở 4 lứa tuổi và lặp lại 3 lần tại 3 huyện Yờn Thế, Tõn Yờn và Yờn Dũng. Bờ, nghộ cỏc lứa tuổi tƣơng đối đồng đều về tớnh