CHƯƠNG 2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.5. Các phương pháp thử nghiệm trên phơi, ấu trùng hàu Thái Bình Dương và cá
2.5.1. Phôi, ấu trùng hàu Thái Bình Dương
2.5.1.1. Chuẩn bị mẫu trầm tích và ấu trùng hàu Thái Bình Dương
Trầm tích tại cửa sơng Sồi Rạp được lấy theo Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 6663-19:2015 (ISO 5667-19:2004) về Chất lượng nước - Lấy mẫu - Phần 19: Hướng dẫn lấy mẫu trầm tích biển [82].
Phơi và ấu trùng hàu Thái Bình Dương (Crassostrea gigas) được nuôi ở Trung tâm Quốc gia Giống Hải sản Nam Bộ (BR-VT) trong môi trường nước biển nhân tạo, thành phần môi trường pha theo quy trình của BS ISO 17244 Chất lượng nước - Chỉ thị sinh học về độc tính tiềm ẩn trong môi trường nước - Xác định [83].
2.5.1.2. Bố trí thí nghiệm bổ sung và tách chiết DDT trong trầm tích
Mẫu trầm tích sạch được lấy tại cửa sơng Sồi Rạp có toạ độ 10°25'56,2"N và 106°46'48,1"E, sau khi mang về phịng thí nghiệm được rửa bằng nước biển nhân tạo nhằm loại bỏ bớt một số tạp chất trước khi sử dụng để bổ sung và tách chiết. Các bước bổ sung và tách chiết DDT trong trầm tích được chuẩn bị theo quy trình của Fathallah [84].
DDT được bổ sung vào trầm tích lần lượt với hàm lượng 0,01; 0,05; 0,1; 0,5; 1 và 5 (mg/kg) tương đương với thể tích DDT 100 ppm bổ sung 2; 10; 20; 50; 200; 1000 (µg/L). Quy trình thực nghiệm thể hiện trong Hình 2.4 dưới đây:
Hình 2. 4. Sơ đồ tổng hợp các bước bổ sung và rửa giải trầm tích2.5.1.3. Phương pháp thực nghiệm sinh học 2.5.1.3. Phương pháp thực nghiệm sinh học
Thử nghiệm sinh học trên phơi, ấu trùng hàu Thái Bình Dương được tiến hành
đánh giá EC50 nhằm phát hiện ngưỡng 50% cá thể chưa phân bào; và LC50 nhằm phát hiện ngưỡng nồng độ gây tử vong 50% cá thể hàu thử nghiệm.
Thí nghiệm sinh học trên hàu Thái Bình Dương ni ở Trung tâm Quốc gia Giống Hải sản Nam Bộ (BR-VT) được thực hiện theo quy trình của Levertt và Thain [85] tham khảo thêm một số quy trình trước đây trên một số lồi nhuyễn thể hai mảnh vỏ và nhím biển của Chung và cộng sự [86] và Lindsay và cộng sự [87]. Quy trình
Hình 2. 6. Sơ đồ thử nghiệm sinh học trên hàu Thái Bình Dương