Phƣơng pháp trắc quang

2.2 PHƢƠNG PHÁP KIỂM TRA HÀN THE, NITRAT VÀ NITRIT

2.2.3.6 phƣơng pháp trắc quang

Nitrit xác định bằng phƣơng pháp trắc quang dựa trên cơ sở hình thành hợp chất màu azo. Nitrit phản ứng với amin thơm bậc một trong môi trƣờng axit tạo thành muối diazo ở giai đoạn trung gian, muối này khi tác dụng với hợp chất amin hay hydroxyl tạo thành hợp chất azo tƣơng ứng, thích hợp cho phƣơng pháp trắc quang.

Có các phƣơng pháp sau:

o Phƣơng pháp lên màu với axit sunfanilic và α-naphtylamin.

o Phƣơng pháp lên màu với axit sunfanilic và phenol.

a. Phƣơng pháp lên màu với axit sunfanilic và α-naphtylamin

 Nguyên lý: Ở môi trƣờng axit, nitrit kết hợp với axit sunfanilic cho axit sunfanilic diazonium. Chất này kết hợp với α-naphtylamin thành axit α-naphtylamin azobenzen sunfonic màu đỏ. Phản ứng liên tiếp nhƣ sau:

b. Phƣơng pháp lên màu với axit sunfanilic và phenol:

 Nguyên lý: Ở môi trƣờng axit, - 2

NO đƣợc giải phóng từ nitrit đƣợc diazo hóa axit sunfanilic. Chất diazo hình thành kết hợp với phenol, ở mơi trƣờng có NH3, thành một phức chất có màu. So sánh với thang màu từ Co(NO3)2 + K2Cr2O7.

c. Phƣơng pháp hiện nhanh nitrit.

NaNO2 + HCOOCH3 NaCOOCH3 + HNO2

1.

2. HNO2 + HO3S NH2 HO3S N=NOH + H2O

axit sunfanilic axit sunfanilic diazonium

N=NOH

HO3S + NH2 HO3S N=N NH2

3.

-naphtylamin axit -naphtylamin azobenzen sunfonic

SVTH: Lê Hoàng Chỉnh 36

 Nguyên lý: Do yêu cầu chỉ cần xác định (phát hiện) định tính nitrit có trong sản phẩm là có hay khơng, nên có thể áp dụng phƣơng pháp thử nitrit trong nƣớc uống theo Codex medicamentarius gallicus. Phƣơng pháp này giống hệt phƣơng pháp xác định nitrit trong TCVN-2658-1978, cũng dùng thuốc thử Griess nhƣng bỏ qua giai đoạn so màu bằng thang màu mà chỉ cần quan sát sự xuất hiện màu hồng có hay khơng sau khi cho thuốc thử vào sản phẩm, với mục đích chỉ để phát hiện định tính sự có mặt của nitrit mà thôi.

o Nguyên lý của phương pháp:

Ở pH = 2 đến pH = 2,5 nitrit sẽ diazo hóa axit sunfanilic và sau đó kết hợp với α–naphtylamin cho hợp chất naphtyamino azobenzen sulfonic có màu đỏ khơng bền (bền

ở 15o

SVTH: Lê Hoàng Chỉnh 37

Chƣơng 3 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ