2.1 Nội dung
- Từ quy trình sản xuất dầu gấc chọn ra các CCPs theo HACCP.
- Nghiên cứu thực tế nhà máy sản xuất dầu gấc, phân tích để đưa ra CCPs thích hợp.
- Đưa ra quy trình quản lý an toàn thực phẩm theo TCVN ISO 22000 cho công ty sản xuất dầu gấc.
2.2 Phương pháp nghiên cứu
2.2.1 Phương pháp khảo sát hiện trạng
Dựa trên những yêu cầu trong các đ ềi u kho n cả ủa hệ thống quản lý ATTP TCVN ISO 22000:2007, tiến hành khảo sát tổng thể ơ ở ậ c s v t chất của công ty.
2.2.2 Phương pháp lấy mẫu
Mục đích của quá trình lấy mẫu ở luận văn này là kiểm tra dư lượng kháng sinh, hooc môn tăng tr ng, thuưở ốc bảo vệ thực vật, kim loại nặng trong quả gấc và xác định lượng vi sinh vật trong các mẫu đã chế biến để s dử ụng ngay. Do vậy trong quá trình lấy mẫu cần tránh làm nhiễm bẩn mẫu, cần được ghi chi ti t các thông tin ế liên quan đến mẫu và được bảo quản vận chuyển đến phịng thí nghiệm theo đúng yêu cầu.
Phương pháp lấy mẫu các loại rau củ quả để phân tích các chỉ tiêu hóa lý tuân theo tiêu chuẩn TCVN 5139:2008, Nông sản thực phẩm – Phương pháp lấy mẫu để xác định dư lượng thuốc trừ ị d ch hại.
Phương pháp lấy mẫu dầu thực vật theo tiêu chuẩn TCVN 2625:2007, Dầu thực vật – Lấy mẫu.
Phương pháp lấy mẫu các sản phẩm ăn liền để phân tích vi sinh tuân theo qui định số 5327/2003/Q -BYT v qui nh lấy mẫĐ ề đị u th c ph m và b nh ph m khi x y ự ẩ ệ ẩ ả ra ngộ độc thực phẩm.
42
2.2.3 Phương pháp hóa lý
Xác định dư lượng thuốc bảo v th c v t (BVTV) trong qu ệ ự ậ ả
a) Nguyên lý :
Dư lượng hoá chấ ảt b o v th c v t (HCBVTV) g c clo h u c và phospho ệ ự ậ ố ữ ơ hữu cơ được chiết tách khỏi m u b ng axeton. Sau ó làm s ch b ng cách cho qua ẫ ằ đ ạ ằ cột florisil (đã giảm hoạt tính) với hệ dung môi rửa giải (15 % ête ethylic trong ête dầu hoả). Bán định lượng hoá chất bảo vệ thực vật bằng sắc ký khí với Detector N.P.D hoặc F.P.D.
b) Dụng cụ và hoá chất:
* Dụng cụ, thiết bị:
- Máy nghiền mẫu; Máy lắc; Máy cất chân khơng quay trịn hoặc cất cách thuỷ
- Bơm chân khơng - Bình cầu 150 ml, 500ml
- Bình tam giác 300 ml, 500 ml nút mài - Bình định mức 10 ml, 50 ml, 100 ml - Bình sắc ký: rộng 5 cm, cao 25 cm, dài 25 cm - Bình hút ẩm đường kính 250 cm - Cột sắc ký có khố 400 x 20 mm - Ống đong 10 ml, 50 ml, 100 ml - Phễu
- Bình phun sắc ký hiện màu - Bơm tiêm micro hay micropipet - Đèn tử ngoại UV
- Máy sắc ký khí
* Chuẩn bị thuốc thử, dung d ch chuẩn, dung môi ị
- Chuẩn bị ệ h dung môi khai triển:
n - Hexan - axeton 2:1. Cho 40 ml n - Hexan và 20 ml axetơn trộn đều và rót vào bình triển khai sắc ký, đậy nắp bình lại.
43
- Chuẩn bị dung dịch thuốc hiện:
Cân 0,5g bạc nitrat cho vào bình định mức 100 ml. Thêm 5 ml nước cất hoà tan hoàn toàn lượng bạc nitrat. Thêm 5 ml amoni hyđroxyt đậm c và b sung đặ ổ axetôn đến vạch mức, lắc đều. Bảo quản trong tủ ạ l nh được 10 ngày.
- Chuẩn bị dung dịch chuẩn:
- Chuẩn B (dùng cho phương pháp sắc ký khí): Dung dịch HCBVTV (chuẩn B): Dùng pipét hút 1ml dung dịch chuẩn A(5.4) cho vào bình định mức 100ml, thêm axêtôn đến vạch mức.
- Dung dịch chuẩn bảo quản ở đ ề i u kiện lạnh.
c) Phương pháp tiến hành:
* Chuẩn bị ẫ m u:
Cân 50 g mẫ đu ã được nghiền nhỏ đều cho vào một bình tam giác nút nhám 500 ml thêm vào đó 200 ml axetơn lắc trên máy lắc hoặc bằng tay trong vòng 30 phút. Lọc mẫu qua bình có phễu hút chân khơng. Sau đó tráng lại mẫu và phễu bằng 30 ml axetơn. Rót tồn bộ dịch lọc sang bình gạn thể tích 1lít, thêm vào đó 30 ml dung dịch muối natri clorua bão hoà và 300 ml nước cất. Chiết xuất hỗn hợp trên với n - Hexan hai lần mỗi lần 50 ml. Để lắng gạn rút lấy phần dung môi hữu cơ n-Hexan vào một bình nón qua phễu thu tinh có ch a Na2S04 khan để loại nước. ỷ ứ
Cất quay chân không dung dịch mẫu n-Hexan v a thu được ho c cách thuỷ ừ ặ ở nhi t độ nh h n 60 ệ ỏ ơ oC tới khi dung dịch còn khoảng 10 ml.
* Làm sạch mẫu:
- Chuẩn bị ộ c t: Cân khoảng 20 g florisil cho vào tủ ấ s y, sấy ở 650 oC trong 4 giờ sau đó sấy qua đêm ở 130 oC. Để nguội và thêm khoảng 0,4 ml nước. Như vậy ta được loại florisil giảm hoạt tính 2 %.
- Lót dưới đáy cột sắc ký có khố mộ ớt l p bơng thu tinh và khóa vịi l i. ỷ ạ Rót đầy cột dung môi rửa giải 15 % ete etylic trong ete dầu hoả rồi đổ dần vào các
cột sắc ký florisil đã giảm hoạt tính sao cho florisil nhồi đều vào cột. Trên mặt phủ
một lớp Na2SO4 khan. Mở khoá để dung dịch r a giử ải chảy ra, tráng lại c t bộ ằng một lượng dung dịch rửa giải nữa sao cho cột không bị khô (kể từ lớp Na2SO4
44
khan). Rót dịch chiết mẫu vào cột và sau đó rửa bằng 200 ml dung môi rửa giải 15% ete etylic trong ete dầu hoả. Dung dịch rửa giải được thu vào bình trịn, đem cất chân khơng quay trịn tới cặn khơ. Hồ cặn (mẫu phân tích) vào 1 ml n - Hexan. * Tiến hành thí nghiệm:
- Cột sắc khí ký: Sử ụ d ng cột mao quản SPB-1, kích thước 30m x 0,25 mm x 0,25 mm (hoặc các cột tương đương).
- Khí : Heli tinh khiết 99,999 % - Detector: FPD hoặc NPD. - Khí mang Hyđrơ: Tinh khiết G.C - Khơng khí nén: Tinh khiết G.C
- Nhiệt độ c t: Theo trương trình 50 ộ oC/min – 20 oC/min – 120 oC – 5 oC/min – 280 oC
- Nhiệt độ detector: 300 oC
- Lưu lượng khí mang: 0,7 ml/min
- Phương pháp bơm mẫu: Splitless (1 min) - Nhiệt độ buồng bơm mẫu: 250 oC. - Lượng mẫu bơm: 2 ml.
- Lượng mẫu chuẩn bơm: 2 ml chuẩn B. Tính kết quả:
Hàm lượng HCBVTV từng loại được tính theo cơng thức: Xi = Si x Ci x V / Sm x m
Trong đó:
Xi - Hàm lượng HCBVTV chất "i" có trong 1 kg mẫu (mg/kg)
Si - Diện tích của pic tương ứng mẫu chuẩn chất “i” Sm - Diện tích của pic tương ứng mẫu phân tích có chất “i”
Ci - Hàm lượng chất “i” có trong 1 ml dung dịch chuẩn ( mg/ml) V - Thể tích dịch chiết mẫu cuối cùng (ml).
45
2.2.4 Phương pháp vi sinh vật học
- Phương pháp xác định t ng sổ ố VSV hiếu khí: ISO 4833:2003 - Phương pháp xác định Coliforms: ISO 4831:2006
- Phương pháp xác định Ecoli: ISO 7251:2005
- Phương pháp xác định t ng sổ ố men, mốc: ISO 21527:2008 (m) - Phương pháp xác định St.aureus: ISO 6888-3:2003
- Phương pháp xác định Cl.perfrirgers: ISO 7937:2004 - Phương pháp xác định PS.aeruginosa: ISO 16266:2008 (m) - Phương pháp xác định Feacal steptococci: ISO 7899-2:2000 - Phương pháp xác định Cl.Botulinum: AOAC 977.26
2.2.5 Phương pháp xây dựng hệ thống tài liệu theo TCVN ISO 22000:2007 cho công ty dầu g c [16], [17], [22] ấ cho công ty dầu g c [16], [17], [22] ấ
- Nghiên cứu bộ tiêu chuẩn ISO TCVN ISO 22000:2007.
- Tổng hợp các qui trình, qui phạm, biểu mẫu theo bộ tiêu chuẩn này, từ đ ó xây dựng các tài liệu cần thiết khi áp dụng TCVN ISO 22000:2007 cho công ty dầu gấc.
2.3 Dụng cụ
Các trang thiết bị để ti n hành phân tích c a Trung tâm K thu t Tiêu chu n ế ủ ỹ ậ ẩ Đo lường Ch t lượng 1 – T ng c c Tiêu chu n o lường Ch t lượng. ấ ổ ụ ẩ Đ ấ
46