3.1 Phương tiện thí nghiệm 3.1.1 Địa điểm và thời gian 3.1.1 Địa điểm và thời gian
Địa điểm: Thí nghiệm được tiến hành tại các phịng thí nghiệm Bộ mơn Công nghệ Thực phẩm, Khoa Nông Nghiệp và Sinh học Ứng dụng, Trường Đại học Cần Thơ. Thời gian: Đề tài được tiến hành từ ngày 03/01/2011 đến ngày 22/4/2011
3.1.2 Nguyên liệu
Cám, trấu được mua ở chợ Xuân Khánh. Giống Asp. oryzae được cung cấp bởi Viện
Nghiên cứu và Phát triển Công nghệ Sinh học, Trường Đại học Cần Thơ.
3.1.3 Thiết bị và dụng cụ
Thiết bị
Cân phân tích (± 10- 4 gram,OHAUS, Japan)
Máy đo pH (713 pH meter, Metrohm Ltd, CH-9101 Herisau, Switzerland) Tủ tiệt trùng Dalton (Japan)
Tủ ủ 30oC (SANYO Electric Co., Ltd, Japan) Tủ ủ 37oC (SANYO Electric Co., Ltd, Japan) Máy ly tâm (Hermle Labortechnik, Germany) Bể điều nhiệt (Julabo, Germany)
Máy quang phổ tử ngoại khả kiến (Spectrophotometer, U - 2800 UV - VIS, Hitachi, Japan)
Máy xác định độ ẩm (A&D company, Japan)
Dụng cụ
Cốc thủy tinh, khay inox, óng ly tâm nhựa, bình tam giác, ống nghiệm, eppendorf, cuvette
Một số thiết bị và dụng cụ khác trong phịng thí nghiệm.
3.1.4 Hóa chất và mơi trường
Hóa chất
Đường glucose, fructose, lactose
Muối khoáng: KCl , CaCl2 , MgSO4.7H2O. Muối nitơ vơ cơ: NaNO3, NH4H2PO4 , NH4NO3.
Hóa chất phân tích: Acid maleic, NaOH, K-Na-tartrate.4H2O, Na2CO3, NaHCO3, Na2SO4, CuSO4.5H2O, (NH4)6Mo7O24.4H2O, H2SO4 đậm đặc, Na2HAsO4.7H2O, Dung dịch đệm sodium acetate pH 5,0 (Guangzhon Jinhuada Chemical Factory, China) Hóa chất chỉnh pH: dung dịch NaOH 0.1N, dung dịch HCl 0.1N
Hóa chất khử trùng: Cồn 96º và cồn 70o.
Môi trường
Sabouraud 4% dextrose agar (SA) pH 5,6 ± 0,2. Thành phần của mơi trường gồm có: peptone from meat, D (+) glucose 40, agar- agar 15.
3.2 Phương pháp nghiên cứu 3.2.1 Phương pháp thí nghiệm 3.2.1 Phương pháp thí nghiệm
Dựa trên kết quả nghiên cứu được thực hiện bởi Chiêm Thị Bích Vân (2007) - Khả năng tổng hợp amylase có hoạt tính cao của nấm mốc Asp. oryzae ở nhiệt độ 30oC, thời gian nuôi 50 giờ, độ ẩm 55%, pH 5,0 và kết quả nghiên cứu của Trần Tuyển Quang Phúc (2008) - Khả năng tổng hợp enzyme amylase của nấm mốc Asp.oryzae có tăng thêm khi bổ sung thêm một số muối cảm ứng, đề tài này khảo sát thêm một số nguồn nguồn carbon, nitơ vơ cơ, khống và tỷ lệ thích hợp để tăng hoạt tính enzyme amylase của Asp.oryzae.
Thí nghiệm được bố trí ngẫu nhiên với 3 lần lặp lại. Số liệu được thu thập và xử lý thống kê bằng Microsoft Excel và Statgraphic 3.1
3.2.2 Phương pháp phân tích
Xác định đường khử bằng phương pháp Nelson-Somogyi từ đó xác định hoạt tính enzyme amylase
3.3. Nội dung và bố trí thí nghiệm
3.3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng của nguồn carbon (đường) bổ sung riêng lẻ