chanrô cail s hã pig
2.1 CẤC CỐNG TRÌNH NGHIÊN cứu TRÊN THỂ GIỚI 1Qui trình chiết tách collagen từ da heo [6]
Ngâm Cạo lơng Rửa Loại béo Trích ly Kết tủa Ly tâm Kết tủa lại Ly tâm
❖ Thuyết minh qui trình cơng nghê :
Da heo sau khi thu nhận sẽ qua quá trình xử lý ngâm với dung dịch Na2SƠ4, sau đó tiến hành
cạo lơng rồi cho qua q trình rửa với nước theo tỉ lệ H20 : da = 6 : l(w/w). Tiến hành rửa lần 1 trong vịng
30 phút, sau đó rửa tiếp lần 2 và 3, mỗi lần được thực hiện trong vòng 20 phút, nhiệt độ 30°c. Quá trình rửa giúp loại bớt các tạp chất như phần thịt dư, máu, mỡ thừa, nhầy nhớt,... để chuẩn bị cho các quá trình tiếp theo.
Sau khi tiến hành rửa với nước, da heo sẽ được loại béo bằng dung dịch isopropyl kết hợp với bổ sung chất hoạt động bề mặt không ion. Tiến hành bổ sung chất hoạt động bề mặt 2 lần vào dung dịch chứa da heo và ngâm trong vòng 6h, trường hợp loại béo bằng dung dịch isopropyl ta tiến hành trong vòng lOh.
Da heo sau khi được loại chất béo sẽ được trích ly bằng dung dịch NaOH 3% (w/v) và monomethylamine 1,9%(v/v) để tách chiết collagen, quá trình được tiến hành ở nhiệt độ 20°c trong vịng 1 tuần để đảm bảo collagen có chất lượng tốt.
Để kết tủa collagen vừa được trích ly ta dùng dung dịch acid HC1 5M. Đến đây collagen thô đã được kết tủa, pH lúc này bằng 4,6 - 4,7. Để thu được collagen sạch ta tiến hành ly tâm lấy phần tủa hòa tan lại trong dung dịch dịch acid acetic 0.1M, quá trình được thực hiện ở 4°c trong vịng 72h, tiến hành ly tâm lần nữa ta thu được collagen thành phẩm.
❖ Những kết quá phân tích collagen trẽn da heo :
Kết quả cho thấy collagen được thu nhận từ da heo có cấu trúc chủ yếu gồm hai chuỗi al và a2. ứng với mỗi chuỗi có 8 peptide khác nhau và những peptide này được phân tích giữa sự kết hợp trao đổi ion và sắc ký lọc gel để xác định thành phần các acid amin có trong mỗi chuỗi. Kết quả cũng cho thấy chuỗi collagen được đặc trưng bởi vị trí và trọng lượng phân tử của các acid amin.
Bằng các phương pháp xác định cho thấy collagen từ da heo có nhiệt độ biến tính ở 37°c, nhiột độ bicn tính của collagcn có licn quan đcn các thành phần acid amin, đặc biệt là
các thành phần proline, hydroxyproline, glycine. Nhiệt độ biến tính này cịn phụ thuộc vào điều kiện nhiệt độ môi trường sông động vật.