- Rệp sáp hại cà phê ựược ni tại phịng thử sinh học của Trung sinh học
2.Xác ựịnh môi trường và nhiệt ựộ tối ưu ựối với sự sinh trưởng và phát triển của B.bassiana trên môi trường rắn.
triển của B.bassiana trên môi trường rắn.
Sau khi xác ựịnh ựược chủng giống nấm B.bassiana thuần nhất có ựường kắnh khuẩn lạc và số lượng bào tử lớn nhất trong các chủng nấm ựã chọn. Chúng tôi tiến hành nghiên cứu về ảnh hưởng của nhiệt ựộ tới sự sinh trưởng và phát triển của nấm Beauveria bassiana và môi trường tối ưu ựến sự phát triển của nấm.
2.1 Xác ựịnh môi trường tối ưu ựến sự phát triển của nấm.
Tiến hành nuôi cấy chủng nấm ựã ựược chọn trên các môi trường sau: - Môi trường N1
- Môi trường Sabouraud - Môi trường Czapek-Dox I (Ở cùng ựiều kiện nhiệt ựộ và ựộ ẩm)
Cân thành phần của các mơi trường theo cơng thức, ựun nóng ựể hịa tan các thành phần của môi trường. Các môi trường Czapek-Dox, N1 ựược phân vào các bình tam giác, ựậy nút bông không thấm nước, khử trùng ở 1210C, 1 atm trong 30 phút. Cịn mơi trường Sabouraud ựược phân vào các bình tam giác và ựược khử trùng ở 1150C, 0.8 atm trong 30 phút. Sau khi khử trùng mơi trường ựược ựựng trong bình tam giác 500 ml ựể nguội 600C có thể ựổ ra ựĩa petri trong ựiều kiện vô trùng.
Nấm ựược cấy trên các môi trường trong ựĩa Petri và cấy 1 ựiểm ở chắnh giữa ựĩa. Theo dõi sự phát triển của nấm bằng mắt thường. Tiến hành theo dõi sự phát triển của khuẩn lạc thơng qua việc ựo ựường kắnh của vịng khuẩn lạc qua một số ngày, ựếm lượng bào tử sau một thời gian nuôi cấy và so sánh ở cả 3 môi trường nghiên cứu.
2.2 Xác ựịnh nhiệt ựộ tối ưu cho sự phát triển của nấm
Quá trình theo dõi sự phát trienr của nấm phụ thuộc vào nhiệt ựộ ựược tiến hành trên mơi trường chắnh ựó là: N1
Tiến hành nấu môi trường và cấy nấm tương tự như việc xác ựịnh môi trường tối ưu cho sự phát triển của nấm, ựặt các ựĩa petri ựã cấy ở các mức nhiệt ựộ 150C, 250C, 300C, 350C. Sau ựó theo dõi sự phát triển của nấm thông qua việc ựo ựường kắnh và ựếm số lượng bào tử nấm qua số ngày nuôi cấy
2.3 Chỉ tiêu theo dõi
- Sau khi khuẩn lạc hình thành, chúng tơi tiến hành ựếm bào tử nấm qua các thời gian nuôi cấy khác nhau.
- So sánh và xác ựịnh loại môi trường nào nấm sinh lượng bào tử nhiều nhất - So sánh và xác ựịnh nhiệt ựộ tối ưu cho sự phát triển của nấm nhất.
(Cách ựo ựường kắnh khuẩn lạc và ựếm số lượng bào tử tương tự cách ựếm số lượng bào tử trên môi trường N1 ựã nêu trên.)