- Các bước tiến hành:
3. Nghiên cứu công nghệ nhân sinh khối nấm Beauveria bassiana trên môi trường dịch thể
3.2 Xác ựịnh khả năng hình thành một số enzym ngoại bào của nấm
Beauveria bassiana
Như phần phương pháp chúng tơi ựã trình bày ở trên, chúng tôi lấy dịch của các môi trường tiết ra ựể thu lấy enzym và xác ựịnh hoạt lực của chúng. Tiến hành nhỏ dịch enzym vào các lỗ khoan của 5 loại môi trường: Glucoza, xenluloza, lipid, kitin 1, kitin 2. Sau ựây là bảng số liệu ựể ựánh giá hoạt lực của enzym trên các môi trường khác nhau.
Bảng 6: đường kắnh vòng phân giải (mm) cơ chất KITIN-T của
enzym các chủng BR trên môi trường N1 sau các ngày nuôi cấy Ngày nuôi cấy
Chủng nấm
3 ngày 5 ngày 7 ngày
BR2 9.00d 9.33d 9.33d BR4 9.67d 11.67c 12.67c BR5 12.67c 15.67a 13.83b LSD5% 1.1 CV 5.5 Các chữ a, b, cẦ chỉ sự sai khác một cách có ý nghĩa ở mức P≤ 0,05
Qua thắ nghiệm trên cơ chất kitin - T cho ta thấy, ựối với chủng BR thì khả năng sinh enzyme lớn nhất ở ngày thứ 5 nuôi cấy dịch thể, chủng BR5 lượng enzyme ựã bắt ựầu giảm ựi ở ngày thứ 7.
Bảng 7: đường kắnh vòng phân giải (mm) cơ chất KITIN-C của enzym các
chủng BR trên môi trường N1 sau các ngày nuôi cấy Ngày nuôi cấy Chủng nấm
3 ngày 5 ngày 7 ngày
BR2 7.66f 9.00e 9.67de
BR4 10.33d 12.67bc 13.83b
BR5 12.00c 15.16a 13.00bc
LSD5% 1.18
Các chữ a, b, cẦ chỉ sự sai khác một cách có ý nghĩa ở mức P≤ 0,05
Kết quả ở bảng 7 cũng tương ựồng với bảng 6, chủng BR5 sinh lượng enzyme lớn nhất ở ngày thứ 5 và giảm ựi ở ngày thứ 7.
Bảng 8: đường kắnh vòng phân giải (mm) cơ chất CMC của enzym các chủng BR trên môi trường N1 sau các ngày nuôi cấy
Ngày nuôi cấy Chủng nấm
3 ngày 5 ngày 7 ngày
BR2 5.33f 5.83f 6.67e
BR4 7.33e 8.33d 9.00c
BR5 8.33d 10.16b 12.00a
LSD5% 0.74
CV 5.3
đối với cơ chất cenllulose thì vịng phân giải tăng dần từ ngày thứ 3 và ựạt lớn nhất ở ngày thứ 7.
Bảng 9: đường kắnh vòng phân giải (mm) cơ chất GLU của enzym các
chủng BR trên môi trường N1 sau các ngày nuôi cấy Ngày nuôi cấy Chủng nấm
3 ngày 5 ngày 7 ngày
BR2 5.66e 6.66de 7.00d BR4 7.33bc 8.33ab 9.66a BR5 7.66bc 9.33ab 10.33a LSD5% 1.20 CV 8.7 Các chữ a, b, cẦ chỉ sự sai khác một cách có ý nghĩa ở mức P≤ 0,05
Trên cơ chất glucose ựường kắnh vòng phân giải enzyme cũng ựạt lớn nhất ở ngày thứ 7.
Bảng 10: đường kắnh vòng phân giải (mm) cơ chất TW của enzym các
chủng BR trên môi trường N1 sau các ngày nuôi cấy
Ngày nuôi cấy Chủng nấm
3 ngày 5 ngày 7 ngày
BR2 7.33cd 8.33bc 6.00d BR4 8.00bc 9.33b 12.66a BR5 12.00a 13.33a 13.00a LSD5% 1.5 CV 6.7 Các chữ a, b, cẦ chỉ sự sai khác một cách có ý nghĩa ở mức P≤ 0,05
Trên cơ chất lipid, chỉ sau 3 ngày ni cấy thì chủng BR5 ựã ựạt 12mm và kéo dài tới ngày thứ 7 ựạt 13mm. Chủng BR4 tăng dần từ ngày thứ 3 và ựạt cao nhất vào ngày thứ 7 là 12,66 mm.
Dưới ựây chúng tôi ựưa ra một số hình ảnh về sự khác nhau giữa các ựường kắnh phân giải enzym của nấm B.bassiana
Hinh : Vòng phân giải Chitine Ờ C của enzym chủng BR5 trên môi trường 3 loại môi trường dịch thể sau 9 ngày ni cấy
Hình : Vịng phân giải Lipid của enzym chủng BR5 trên 3 loại môi trường dịch thể sau 9 ngày ni cấy.
Hình : Vịng phân giải Chitine Ờ T của enzym chủng BR5 trên 3 loại môi trường dịch thể sau 9 ngày ni cấy.
Hình : Vịng phân giải Cellolose của enzym chủng BR5 trên 3 loại môi trường dịch thể sau 9 ngày ni cấy
Hình : Vịng phân giải Glocose của enzym chủng BR5 trên 3 loại môi trường dịch thể sau 9 ngày ni cấy
Hình : vịng phân giải enzym trên Chitine Ờ C của các chủng BR4, BR3, BR2, BR1 sau 7 ngày ni cấy
Hình : Vịng phân giải enzym trên Chitine Ờ T của các chủng BR4, BR3, BR2, BR1 sau 7 ngày nuôi cấy
Hình : Vịng phân giải enzym trên Cellolose của các chủng BR4, BR3, BR2, BR1 sau 7 ngày nuôi cấy
Hình : Vịng phân giải enzym trên Lipid của các chủng BR4, BR3, BR2, BR1 sau 7 ngày nuôi cấy