- Các bước tiến hành:
4. Nghiên cứu ựặc ựiểm hình thái khả năng hình thành bào tử,thu sinh khối nấm B.bassiana trên môi trường sản xuất.
khối nấm B.bassiana trên môi trường sản xuất.
Qua những thắ nghiệm thực tế và so sánh kết quả thắ nghiệm ở trên chúng tôi chọn chủng nấm BR5 cho nghiên cứu ựặc ựiểm hình thái khả năng hình thành bào tử,thu sinh khối nấm Beauveria bassiana trên 4 môi trường sản xuất là : Gạo, Ngô, Gao + Ngô, Gạo + Bã mắa. Kết quả từng bước thu ựược qua các quá trình cụ thể :
* Giống cấp 2 sau khi ựược nuôi cấy ngay sau 2 ngày chúng ta có thể thấy sự chuyển màu của mơi trường giống này ựã có ngả màu trắng ngà, sau 7 ngày nuôi cấy giống ựã phát triển mạnh và chúng ta có thể quan sát rõ màu trắng bông xốp của nấm B.bassiana bao phủ quanh môi trường giống này. điều này tạo ựiều kiện thuận lợi cho việc nuôi cấy trên môi trường sản xuất.
* Sau khi ựược nuôi cấy trong túi nilong và ựem sấy ở nhiệt ựộ 380C trong 10h chế phẩm nấm B.bassiana trên môi trường sản xuất ựã khô và tơi ựều. Sau ựó ựể nguội ở nhiệt ựộ 250C chúng tôi tiến hành ựếm số lượng bào tử và ựể khách quan chúng tôi tiến hành trên 3 mẫu lấy ngẫu nhiên và quan sát hình thái bào tử nấm B.bassiana và thu ựược kết quả như sau :
Bảng 11: Số lượng bào tử nấm Beauveria bassiana trên các môi trường
sản xuất.
Môi trường sản xuất Số lượng bào tử nấm B. bassiana /1g chế phẩm thô T0C Gạo 3.15 x 108 Ngô 3.27 x 108 Gạo + Ngô 2.29 x 108 Gạo + Bã mắa 3.33 x 108 250C
Dựa vào Bảng 11 trên chúng ta có thể thấy ựược số lượng bào tử nấm Beauveria bassiana khơng có sự chênh lệch nhiều về số lượng bào tử hình thành giữa các mơi trường . điều này chứng tỏ các bào tử nấm phát triển ựều khắp mơi trường, có ựiều này là do trong q trình ni cấy chúng ta luôn ựảo trộn ựều thành phẩm theo ngày nhất ựịnh nếu không các bào tử sẽ không phát triển ựều. Mặt khác số lượng bào tử ựạt ựược chỉ tiêu và yêu cầu về số lượng nên các môi trường này thắch hợp ựể nuôi cấy thu sinh khối trên quy mơ sản xuất. Ngồi ra ta cịn thấy nấm Beauveria bassiana ni cấy trên môi trường sản xuất Gạo + Bã mắa cho lượng bào tử nhiều nhất, tiếp ựó ựến Ngơ, Gạo và cuối cùng là môi trường Gạo + Ngơ. Nhìn chung số lượng bào tử hình thành trên 4 mơi trường này khơng có sự chênh lệch rõ rệt.
Hình thái bào tử nấm dưới kắnh hiển vi cho thấy bào tử nấm có hình dạng ựặc trưng là hình cầu hoặc elip sáng trong trong quang trường, rất rễ quan sát và phân biệt.
* Qua quan sát bằng mắt thường trong ngày nuôi cấy trên môi trường sản xuất nấm B.bassiana chưa thể nhìn rõ qua 2 ngày ựầu tiên của quy trình sản xuất. đến ngày thứ 3 thì mơi trường bắt ựầu có màu trắng ngà và ựến ngay thứ 5 có nhiều sợi bào tử mọc kắn, bông xốp, trắng muốt nhìn thấy rõ. Ngày thứ 10 thì nấm ựã phát triển trên diện rộng và có mầu ựặc trưng của nấm.
Sau khi sấy và ựể nguội chế phẩm ựược ựóng vào túi nilon và có thể bảo quản ựược 4 tháng kể từ ngày ựóng gói chế phẩm. Nấm thành phẩm có màu trắng ựặc trưng của nấm B.bassiana và ựạt ựủ số lượng bào tử theo yêu cầu ựược ựóng gói rồi ựem ra sử dụng.