- Các bước tiến hành:
4.Nghiên cứu công nghệ nhân thu nhân sinh khối nấm trên môi trường sản xuất:
vòng phân giải.
Vòng phân giải = D - d (mm)
Trong ựó: D là ựường kắnh vịng phân giải d là ựường kắnh của lỗ khoan.
4. Nghiên cứu công nghệ nhân thu nhân sinh khối nấm trên môi trường sản xuất: xuất:
4.1 Phương pháp nuôi cấy,nhân giống và thu sinh khối nấm B. bassiana
trên môi trường sản xuất:
Chúng tôi tiến hành thu sinh khối nấm B. bassiana trên môi trường sản xuất sau khi ựã nghiên cứu qua nhiều môi trường nuôi cấy ựể thu sinh khối nấm trên quy mô lớn.
* Nuôi cấy giống cấp 2 ựể sản xuất chế phẩm
- Gạo tấm nấu sôi rồi ựem phơi ựể nguội, sấy ở nhiệt ựộ 700C xuống 400C (chú ý trong quá trình sấy phải ựảo ựều)
- Cân 120g gạo sấy cho vào bình tam giác, cho tiếp 50cc CaCO3 5% (5g/ 1L H2O) rồi hấp ở 1200C trong 30 phút. Lưu ý: bình tam giác phải có nút bơng, trước khi hấp phải lắc ựều gạo và hấp xong thì cũng phải lắc cho tơi gạo.
- Khử trùng buồng cấy trước khi cấy cẩn thận , sát trùng bằng cồn và tia cực tắm.
- Tiến hành cấy giống cấp 2: dùng que cấy thạch lấy cả phần nấm và thạch cho vào bình tam giác và dằm ựều.
* Nhân sinh khối nấm trên các môi trường sản xuất
- Lấy 200g gạo cho vào túi nilon rồi ựổ 75ml dd CaCO3 5%, lắc ựều nước và gạo với nhau.Làm nút cổ túi rồi ựậy lại bằng nút bông.
- Các mơi trường cịn lại: Ngơ, Gạo + Ngô, Gạo + Bã mắa cũng làm tương tự với tỉ lệ như ựã ghi ở phần vật liệu (II)
- đem hấp ở nhiệt ựộ 1210C trong 30 phút.
- Lấy ra lắc khi cịn nóng rồi ựể nguội ở nhiệt ựộ phịng. - Khử trùng buồng cấy que cấy, ựũa thuỷ tinh, ống ựong. - Hấp CaCO3 5% cho thêm Tween trước khi cấy
- Cấy nấm: ựổ một bình tam giác ( giống cấp 2) vào 500ml Ờ 800ml H2O rồi ựổ vào mỗi túi gạo khoảng 20ml dd CaCO3 5%. Lắc ựều và bảo quản nơi khô mát.
- để các túi gạo nơi khơ mát trong vịng 10 ngày.Lưu ý cứ 3 ngày lại tiến hành nhào bóp các túi nilon cho nấm ựược phát triển tốt và ựều.
- Ngày thứ 7 tháo nút bông và ựể hở miệng túi tạo ựiều kiện cho nấm hô hấp sinh trưởng. Ngày thứ 10 ựỏ mẫu nấm ra khay ựem sấy ở nhiệt ựộ 380C trong 10h.
* Thu sinh khối nấm Beauveria bassiana trên môi trường sản
xuất.
- Sau khi nấm ựã khơ chúng ta tiến hành ựóng gói sảm phẩm vào các túi nilon. Bảo quản trong ựiều kiện khơ ráo thống mát tránh ánh nắng tiếp.
- Thời hạn sử dụng là 4 tháng kể từ ngày ựóng gói thành phẩm
4.2. Chỉ tiêu theo dõi
- Theo dõi sự phát triển của nấm bằng mắt thường qua từng ngày nuôi cấy. - đêm số lượng bào tử của nấm ở mỗi thời ựiểm khác nhau.
4.3. Phương pháp xác ựịnh số lượng bào tử nấm Beauveria bassiana trên
môi trường nuôi cấy.
Tương tự như cách ựếm số lượng bào tử trên môi trương N1 ựã nêu trên. Chú ý: cần cân 1g chế phẩm.
II.3.3.Khảo nghiệm sản phẩm ựối với các ựối tượng dịch hại 1. Nhân nuôi rệp hại cà phê
Chúng tôi tiến hành nhân nuôi hai loại rệp sáp: một loại rệp hại quả, một loại rệp hại rễ ựều ựược ni trong phịng thử sinh học của Trung tâm sinh học- Viện Bảo vệ thực vật. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Rệp sáp ựược nhân nuôi trên quả bắ ngô. Theo dõi sự sinh trưởng và phát triển của rệp.