- Các bước tiến hành:
2.Xác ựịnh nhiệt ựộ tối ưu và môi trường nuôi cấy thắch hợp cho sự phát triển của nấm Bb
triển của nấm Bb
2.1 Xác ựịnh môi trường nuôi cấy thắch hợp.
ậÓ chản ệ−ĩc mềi tr−êng nuềi cÊy thÝch hĩp cho nÊm Beauveria bassiana chủng BR5 phát triển nhằm mục ựắch cho số lượng bào tử và ựường kắnh khuẩn lạc cao, nấm có hoạt tắnh diệt sâu tốt, như phần phương pháp ựã trình bày chúng tôi ựã nghiên cứu trên ba loại môi trường khác nhau, nuôi cấy và làm tiêu bản soi dưới kắnh hiển vi. So sánh và ựánh giá loại môi trường tối ưu.
Chúng tôi ựã so sánh sự phát triển về ựường kắnh khuẩn lạc của nấm
Beauveria bassiana trên các môi trường khác nhau qua một số ngày nuôi cấy
ựược thể hiện qua bảng dưới ựây:
Bảng 3: Sự phát triển của ựường kắnh khuẩn lạc nấm Beauveria bassiana trên các môi trường khác nhau
(ở đK: T0C =300C; RH = 68-80% )
đường kắnh khuẩn lạc (cm) sau các ngày nuôi cấy
STT Tên môi trường 3 5 7 14
1 N1 0.81 2.03 2.52 3.76
2 Czapeck Ờ Dox I 0.51 0.78 1.06 1.82
3 Sabouraud 0.75 1.14 1.47 2.49
So sánh sự phát triển của khuẩn lạc nấm Beauveria bassiana trên 3 loại
môi trường chúng tôi nhận thấy :
Trên môi trường Czapeck Ờ Dox I, khuẩn lạc phát triển chậm trong 3 Ờ 5 ngày ựầu, ựến ngày thứ 7 mới thấy xuất hiện bào tử màu trắng, xung quanh bào tử có hệ sơi bao quanh màu trắng ựục. đến ngày thứ 7 trở ựi khuẩn lạc xuất hiện màu ngà vàng xung quanh bào tử màu trắng ở chắnh giữa sau ựó tới hệ sợi màu trắng ở phắa ngoài cùng. Các ngày sau bào tử mọc ựều từ trong ra ngồi, nhìn mặt dưới của ựĩa thấy mặt dưới của môi trường không thấy bị nhăn nheo, ựiều này giải thắch là nấm Beauveria bassiana chưa ăn sâu vào trong môi trường.
đường kắnh khuẩn lạc nhỏ nhất, bào tử nấm phát triển chậm nhất.
Trên môi trường Sabouraud, khuẩn lạc phát triển ựều trong 3 Ờ 5 ngày ựầu, ựến ngày thứ 5 ựã bắt ựầu xuất hiện bào tử màu trắng ở chắnh giữa. Từ ngày thứ 7 trở ựi ựường kắnh khuẩn lạc phát triển nhanh, khuẩn lạc ăn vào mơi trường do ựó mà nứt bề mặt môi trường. Trên mơi trường Sabouraud thì ựường kắnh khuẩn lạc mọc với tốc ựộ nhanh hơn trên môi trường Czapek - Dox I tuy nhiên bào tử ắt hơn và chậm hơn.
Trên môi trường N1 khuẩn lạc mọc rất nhanh từ ngày thứ 3 trở ựi ựã xuất hiện bào tử màu trắng nhưng vẫn thưa và ắt. đến các ngày sau thì bào tử mọc nhiều hơn và mọc lan rộng khắp ựĩa. Khuẩn lạc cũng ăn sâu vào trong môi trường làm cho môi trường bị rạn nứt khi nhìn từ mặt sau của ựĩa. Khuẩn lạc mọc trắng dạng bông xốp, phát triển rất nhanh và mạnh so với 2 môi trường Sabouraud và Czapek - Dox I. Chứng tỏ so cả 3 loại mơi trường ựã cấy chủng nấm BR5 thì mơi trường N1 cho ựường kắnh khuẩn lạc lớn nhất và ựẹp nhất.
2.2 Xác ựịnh nhiệt ựộ tối ưu cho sự phát triển của nấm
Từ việc phân tắch ựánh giá loại môi trường tối ưu cho sự phát triển của nấm chúng tôi ựã chọn môi trường N1 ựể ựánh giá nhiệt ựộ tối ưu ựối với sự sinh trưởng và phát triển của nấm.
Như ựã nói ở phần phương pháp trên chúng tôi tiến hành nghiên cứu sự phát triển của nấm Beauveria bassiana trên môi tường N1 tại 4 ngưỡng nhiệt ựộ là: 150C, 250C, 300C, 350C.
Bảng 4: ảnh hưởng của nhiệt ựộ tới sự phát triển của nấm Beauveria bassiana
đường kắnh khuẩn lạc(cm) sau các ngày nuôi cấy STT Nhiệt ựộ 3 5 7 10 1 150C 0 0 0.3 0.85 2 250C 0.75 1.44 2.58 3.98 3 300C 0.72 0.98 2.47 3.05 4 350C 0 0 0 0
Qua bảng số liệu trên chúng tơi có nhận xét như sau:
Trong 4 ngưỡng nhiệt ựộ thì nấm phát triển tốt nhất tạo nhiệt ựộ 250C, tại nhiệt ựộ 350 nấm không thể phát triển ựược sau 5 ngày nuôi cấy. Tại nhiệt ựộ 150c, nấm phát triển rất chậm, ựường kắnh nấm quá nhỏ, mãi ựến ngày thứ 7 mới có thể ựo ựược ựường kắnh khuẩn lạc. Theo bảng số liệu trên thì ựường kắnh
khuẩn lạc ở 2 ngưỡng nhiệt ựộ 250C và 300C tương ựương nhau, lớn gấp 3,5 ựến 4,6 lần sau 10 ngày nuôi cấy.