2.1.2.2 .Thiết bị thí nghiệm
2.2. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.9. Xác định độc tính cấp của chế phẩm Thivoda
Nguyên tắc: xác định đƣợc LD50 - liều gây chết 50% động vật thí nghiệm [19] .
Thí nghiệm đƣợc tiến hành tại Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung ƣơng.
Động vật thí nghiệm:
- Chuột nhắt trắng chủng Swiss (18-20g) do Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ƣơng cung cấp.
- Điều kiện chăm sóc: Động vật thí nghiệm đƣợc ni trong điều kiện chuồng thoáng mát, đảm bảo vệ sinh, chế độ ăn uống theo nhu cầu của chuột.
Thử sơ bộ:
- Pha hỗn dịch thử có nồng độ khoảng 0,83 g mẫu thử/ml nƣớc cất
- Thăm dò ở mức liều khơng làm chết chuột thí nghiệm: dùng 5 con chuột, cho mỗi chuột uống 0,4 ml mẫu thử (tƣơng đƣơng mức liều 16,7 g mẫu thử/kg chuột) - Thăm dò mức liều làm chết 100% số chuột thí nghiệm: dùng 5 con chuột, cho mỗi chuột uống 1,2 ml mẫu thử chia làm 3 lần uống, mỗi lần uống 0,4 ml cách nhau 2 giờ (tƣơng đƣơng mức liều 50,0 g mẫu thử/kg chuột).
Thử nghiệm chính thức:
- Các mức liều thử nghiệm:
Mức liều 1: 16,7 g mẫu thử/ kg chuột Mức liều 2: 25 g mẫu thử/ kg chuột Mức liều 3: 33,3 g mẫu thử/ kg chuột Mức liều 4: 41,7 g mẫu thử/ kg chuột Mức liều 5: 50,0 g mẫu thử/ kg chuột
- Cách xử lý và chuẩn bị mẫu thử: pha hỗn dịch thử có nồng độ khoảng 0,83 g mẫu thử/ml nƣớc cất (hỗn dịch thử).
- Chuột đƣợc nhịn ăn 15 giờ trƣớc khi thí nghiệm, nƣớc uống theo nhu cầu. Kiểm tra cân nặng trƣớc khi thử nghiệm. Chuột đạt các yêu cầu về cân nặng đƣợc đƣa vào thử nghiệm.
- Cách dùng: Đƣa mẫu thử nghiệm theo đƣờng uống. Lấy thể tích mẫu thử theo qui định đƣa thẳng vào dạ dày chuột bằng kim cong đầu tù.
Chuột đƣợc chia thành 05 lô, mỗi lô 10 con. Mỗi lô cho uống mẫu chế phẩm với mức liều tăng dần tƣơng ứng: 16,7; 25,0; 33,3; 41,7; 50,0 g mẫu thử/kg chuột.
Lịch theo dõi: Theo dõi biểu hiện của chuột sau khi uống trong 24 giờ đầu và theo
dõi hoạt động của động vật thí nghiệm trong thời gian 7 ngày sau khi uống.