3.2.1 .Gây chuột nhắt ĐTĐ type 2
3.3. NGHIÊN CỨU CAO CHIẾT MẪU LÁ VỐI VÀ LÁ CHÈ ĐẮNG
Qua điều tra, mẫu lá vối và lá chè đắng là hai trong số tám mẫu thực vật có hoạt tính hạ đƣờng huyết. Với điều kiện về cơ sở vật chất, tham khảo những kết quả
công bố tại Việt Nam về hai đối tƣợng này là khá mới, chúng tôi lựa chọn hai mẫu này để nghiên cứu sâu hơn về: (1) Ảnh hƣởng lên hình thái tế bào và chức năng gan chuột của cao chiết nƣớc lá vối, lá chè đắng; (2) Tác dụng hạ đƣờng huyết của cao chiết phân đoạn; (3) Xác định thành phần hóa học và tinh sạch các hợp chất từ các cao chiết phân đoạn có hoạt tính hạ đƣờng huyết tốt nhất; (4) Nghiên cứu hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase của một số cao chiết phân đoạn và hợp chất tinh sạch đƣợc.
3.3.1. Ảnh hƣởng của cao nƣớc lá vối, lá chè đắng lên hình thái tế bào và chức năng gan chuột năng gan chuột
3.3.1.1. Các chỉ số GOT, GPT máu chuột
Bên cạnh nghiên cứu xác định hoạt tính hạ đƣờng huyết của các cao chiết phân đoạn chúng tôi đã theo dõi và xác định các chỉ số men gan, tạo tiêu bản đúc cắt gan chuột. Kết quả thể hiện trên Hình 3.10.
Hình 3.10. Giá trị các chỉ số GOT, GPT trong máu chuột
Chuột ĐTĐ type 2 không cho uống cao chiết lá vối, lá chè đắng có biểu hiện gan bị tổn thƣơng, chỉ số men gan khá cao, chỉ số GOT trung bình là 59±5,2U/l, GPT trung bình là 100±6,8U/l. Trong khi đó các con chuột ĐTĐ type 2 cho uống cao nƣớc lá vối và lá chè đắng các chỉ số men gan đã hạ thấp hơn so với nhóm chuột đối chứng, tuy vẫn cao hơn nhóm chuột bình thƣờng. Nhóm chuột ĐTĐ type 2 cho uống cao nƣớc lá vối có GOT, GPT trung bình tƣơng ứng là 31,6±4,3 và 42,4±5,1U/l, nhóm chuột ĐTĐ type 2 cho uống cao nƣớc lá chè đắng có GOT, GPT
100±6.8 59±5.2 42.4±5.1 31.6±4.3 35±3.7 29.4±2.8 20±1.5 37±2.7 0 30 60 90 120 GOT GPT N ồn g độ ( U /l )
Chuột ĐTĐ type 2 Chuột bình thường
trung bình tƣơng ứng là 29,4±2,8 và 35±3,7 U/l, điều này chứng tỏ gan có dấu hiệu đƣợc phục hồi.
3.3.1.2. Ảnh hưởng lên cấu trúc mô gan
Hình 3.11 là hình ảnh quan sát tiêu bản đúc cắt gan chuột. Quan sát cấu trúc tế bào học của các mẫu gan nhằm phát hiện những tổn thƣơng trong cấu trúc mô.
Hình 3.11. Hình ảnh quan sát tiêu bản đúc cắt gan chuột
1. Gan chuột ĐTĐ type 2 cho uống cao nƣớc lá vối - 2. Gan chuột ĐTĐ type 2 cho uống cao nƣớc lá chè đắng - 3. Gan chuột ĐTĐ type 2 cho uống nƣớc muối sinh lý - 4. Gan chuột bình thƣờng.
1A 1B
2A 2B
3A 3B
Tiêu bản gan chuột ĐTĐ type 2 không cho uống cao chiết thực vật các tế bào gan có biểu hiện bị tổn thƣơng, các tế bào méo mó, rời rạc, hình dạng tế bào khơng rõ rệt, thiếu sự liên kết với nhau, xuất hiện một số tế bào bị teo nhân, kích thƣớc nhỏ hơn so với các tế bào khác. Nhân tế bào bắt màu rất đậm chứng tỏ tế bào đã bị chết (3A và 3B). So sánh với tiêu bản gan chuột ĐTĐ type 2 cho uống CNN lá vối và lá chè đắng, hình ảnh tế bào quan sát nét hơn, dƣờng nhƣ không nhận ra sự phá hủy của tế bào, nhân tế bào cũng nhƣ các tế bào có kích thƣớc hồn tồn bình thƣờng và khá đồng đều, nhân tế bào bắt màu hồn tồn bình thƣờng, đồng thời các tế bào liên kết với nhau (1A, 1B, 2A, 2B), gần nhƣ tƣơng đƣơng với tiêu bản gan chuột nhắt bình thƣờng (4A và 4B).
Kết quả quan sát tiêu bản đúc cắt gan chuột đã phản ánh khả năng phục hồi các chỉ số men gan trong gan chuột đƣợc cho uống CNN lá vối, lá chè đắng mà
chúng tôi đã nghiên cứu trên đây, và mang ý nghĩa khoa học rất lớn khi hai lồi thực vật này khơng chỉ có khả năng hạ đƣờng huyết mà cịn thể hiện hoạt tính chống oxi hóa, bảo vệ gan. Theo các cơng bố của một số nhà khoa học nƣớc ngoài, trong cao nƣớc lá vối và lá chè đắng có thành phần các hoạt chất chống oxi hóa nhƣ các hợp chất flavonoid, carotenoid, polyphenolic…do đó ngồi tác dụng hạ đƣờng huyết chúng còn giúp hồi phục gan bị tổn thƣơng [1, 81, 119].
3.3.2. Cao chiết phân đoạn lá vối
Nhóm tác giả Đào Thị Thanh Hiền đã nghiên cứu một số tác dụng của lá cây vối về: khả năng kháng khuẩn (vi khuẩn E.coli), lợi mật, cả tinh dầu vối và cao khơ tồn phần đều có khả năng ức chế sự phát triển của các tế bào ung thƣ gan, màng tim, tử cung [14]. Với các nghiên cứu trên thế giới, đối tƣợng vối đƣợc nghiên cứu tập trung trên nụ vối về hoạt tính chống oxi hóa, chống viêm nhiễm, kháng vi sinh vật cũng nhƣ nghiên cứu về thành phần tinh dầu, các hợp chất flavonoid, terpenoid, chalcone, trong khi đó các cơng bố về lá vối cịn khá ít [35, 57, 58, 86, 111].