Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.6. Thực nghiệm
2.6.2. Xác định hóa chất bảo vệ thực vật trong các mẫu nghiên cứu
Các mẫu đất lấy ở mục 2.4.1 được sử dụng để xác định hàm lượng các hóa chất BVTV. Các hóa chất BVTV được xác định theo các phương pháp tiêu chuẩn của Việt Nam và quốc tế. Xác định nhóm clo hữu cơ trong đất và trầm tích đáy theo phương pháp US EPA 8081A [173]. Xác định nhóm clo hữu cơ trong nước và rau xác định theo phương pháp US EPA 508 [172]. Xác định nhóm lân hữu cơ trong đất và trầm tích đáy theo phương pháp US EPA 4041A [170]. Xác định nhóm lân hữu cơ trong nước theo phương pháp US EPA 507 [171]. Xác định nhóm pyrethroid trong đất, trầm tích và nước theo phương pháp sắc ký khí GC/ECD [3]. Xác định nhóm carbamat và thuốc trừ cỏ trong các mẫu đất, trầm tích và nước theo phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC/DAD - UV [174].
2.6.3. Xác định Collembola trong các mẫu nghiên cứu
Collembola và các động vật không xương sống khác được tách ra khỏi đất
bằng phễu Tullgren trong thời gian 7 ngày đêm ở nhiệt độ phịng thí nghiệm. Phương pháp này cho phép thu thập được số lượng cá thể lớn hơn nhiều khi thu bằng tay và cũng cho tập hợp những thông tin về mật độ nhiều hơn. Phễu Tullgren được tạo ra từ bìa carton cứng có đường kính 20 cm, độ cao 15-18 cm. Ở đáy phễu có gắn một ống nghiệm có đường kính 1,0 cm, dài 4 cm có đựng dung dịch định hình là cồn 90o
. Mẫu đất được chuyển vào một cái rây lọc có đường kính 18 cm, thành rây bằng sắt cao 5 cm, đáy rây là lưới nilon với kích thước lỗ lưới (1,5 x 1,5) mm. Đặt rây này bên trong phễu giấy carton và đặt trên một giá sắt cố định. Sau 7 ngày thu các ống nghiệm có chứa động vật đất. Các động vật này chui ra khỏi đất rơi vào ống nghiệm và được định hình bằng cồn 90o.
Xử lý mẫu vật, bảo quản và định loại: các ống nghiệm có mẫu vật
Collembola thu được nhờ phễu Tullgren sẽ được lần lượt đổ ra đĩa petri để tính đếm
số lượng các nhóm, các dạng lồi dưới kính lúp hai mắt Olympus SZ40. Để xác định đến loài, tiến hành làm tiêu bản cố định, soi dưới kính hiển vi Olympus CH2 có độ phóng đại lớn đến 4.000 lần. Sử dụng các tài liệu để so sánh định loại. Các mẫu Collembola không làm tiêu bản sẽ được cho vào trong ống nghiệm chứa dung
dịch cồn 90o để bảo quản. Các ống nghiệm đều được gắn nhãn ghi đầy đủ thơng tin về mẫu.
Tồn bộ tiêu bản định loại và các mẫu vật được bảo quản tại phòng Sinh thái Môi trường đất, Viện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật, Viện Khoa học và Cơng nghệ Việt Nam. Danh sách lồi Collembola được sắp xếp theo hệ thống cây chủng loại phát sinh dựa theo hệ thống phân loại của Moen và Ellis. Các loài trong một giống được sắp xếp theo vần a, b, c. Định tên lồi theo tài liệu nghiên cứu đã được cơng bố [24, 84, 163]. Các số liệu thu được sử dụng để xác định các giá trị sau: số lượng loài, số cá thể, chỉ số đa dạng Shannon-Weaver (H’), chỉ số đồng đều (J’) hay chỉ số Pielou, loài ưu thế. Phương pháp xác định các giá trị này nêu trong phần phương pháp nghiên cứu mục 2.3.3.2.