CAT T IEN449 CAT T IEN7 CAT T IEN3N CAT T IEN250 CAT T IEN463 EA SO3 CAT T IEN211 EA SO12 CAT T IEN169 CAT T IEN132 CAT T IEN361 T HAO CAM VIEN CAT T IEN9 CAT T IEN324 CAT T IEN419 CAT T IEN459 CAT T IEN74 BU GIA MAP CAT T IEN82 CAT T IEN171 CAT T IEN470 CAT T IEN388 CAT T IEN241 CAT T IEN405 CAT T IEN409 CAT T IEN412 CAT T IEN25 CAT T IEN252 CAT T IEN418 CAT T IEN420 CAT T IEN52 CAT T IEN398 CAT T IEN162 CAT T IEN396 CAT T IEN246 CAT T IEN348 CAT T IEN249 CAT T IEN421 EA SO2 CAMPUCHIA1 DAN MACH1 PARI ZOO1 DAN MACH2 PARI ZOO2 CAMPUCHIA2 CAT T IEN340 CAT T IEN200 CAT T IEN345 CAT T IEN294 CAT T IEN1 CAT T IEN300 CAT T IEN330 CAT T IEN199 CAT T IEN325 CAT T IEN143 CAT T IEN12N CAT T IEN16N INDIA DQ377061 INDIA DQ377056 INDIA DQ377057 INDIA DQ377058 INDIA DQ377059 T AY BAN NHA3 INDIA DQ377060 T AY BAN NHA4 T AY BAN NHA1 T AY BAN NHA2 KRONG T RAI EA SO11 EA SO1 BU GIA MAP1 EA SO17 EA SO7 CAMPUCHIA (B Javanicus) EA SO10 YOK DON EA SO13 EA SO14 EA SO4 EA SO15 EO SO5 EA SO6 EA SO8 BU GIA MAP3 EA SO16 EA SO9 BU GIA MAP2 BOS GRUNNIES BISON BONAS BOS T AURUS BOS INDICUS 100 82 98 97 43 100 89 41 61 24 56 99 99 93 100 97 97 87 96 54 83 0.02 Bị tót Bị tót của Việt Nam mang kiểu haplotype 1, bị tót Campuchia, Đan Mạch và vƣờn thú Pari-Pháp (Lào) Bị tót Bị tót của Việt Nam mang kiểu haplotype 2 Bị tót Các mẫu bị tót ở Ấn Độ và Tây Ban Nha Bò rừng: Các mẫu bò rừng Việt Nam và Campuchia Hình 3.18: Cây phân loại di
truyền giữa bị tót, bị rừng, bị Tây Tạng (Bos grunnies), bò
rừng châu Âu (Bison bonas) và bị ni (Bos taurus, Bos indicus). Hoành độ của cây
thể hiện khoảng cách di truyền. Các số giữa các gốc nhánh là giá trị bootstrap
KẾT LUẬN
1. Bị ni tại tỉnh Hà Giang có tính đa dạng di truyền cao ở các locút microsatllite của hệ gen nhân và trình tự ADN vùng D-loop của hệ gen ty thể. Trong số 23 locút microsatellite nghiên cứu đã xác định đƣợc 205 alen khác nhau. Số lƣợng alen và tần số dị hợp tử trung bình của mỗi locút tƣơng ứng là 8,9 và 0,73. Hầu hết các locút microsatellite đều không ở trạng thái cân bằng di truyền Hardy-Weinberg, do đó xét trên phƣơng diện tổng thể thì bị ni tại Hà Giang khơng cân bằng di truyền Hardy-Weinberg (p<0,01). Ngoài ra, đã xác định đƣợc 14 kiểu haloptype hệ gen ty thể của bò nuôi ở tỉnh Hà Giang và giữa 14 kiểu haplotype có 34 điểm đa hình trình tự nucleotide.
2. Bị ni tại tỉnh Hà Giang có nguồn gốc từ sự lai tạp giữa hai loài phụ Bos taurus (bị khơng có u) và Bos indicus (bị có u). Trong đó, tỷ lệ bị có nguồn gốc thuộc
loài phụ Bos taurus và Bos indicus tƣơng ứng là 46% và 54%.
3. Cấu trúc di truyền quần thể bị ni ở Hà Giang phân thành hai nhóm bị khác nhau về di truyền (quần thể phụ), hai nhóm bị này phân bố chính ở hai khu vực tiểu sinh thái khác nhau: vùng cao núi đá (Đồng Văn, Mèo Vạc) và vùng cao núi đất (Hồng Su Phì, Xín Mần).
4. Tỷ lệ tách chiết ADN thành cơng từ các mẫu phân bị hoang dã là khoảng 40%. Thời gian và nhiệt độ bảo quản mẫu mẫu phân đã ảnh hƣởng đến kết quả tách chiết ADN: các mẫu phân có thời gian bảo quản càng ngắn (tính từ khi đƣợc thu thập đến khi tiến hành tách chiết ADN) thì tỷ lệ tách chiết ADN thành công càng cao, các mẫu đƣợc bảo quản ở nhiệt độ 40C cho kết quả cao hơn các mẫu đƣợc bảo quản ở nhiệt độ ngoài trời. Khơng có sự khác nhau giữa phƣơng pháp bảo quản bằng dung dịch cồn (100%) và dung dịch bảo quản RNAlater đến kết quả tách chiết ADN. 5. Đã áp dụng thành công một số chỉ thị phân tử của bị ni nhƣ phân tích trình tự ADN vùng D-loop, phân tích đoạn gen đặc trƣng trên nhiễm sắc thể Y để xác định lồi và giới tính ở bị tót và bị rừng hoang dã.
6. Đã xác định đƣợc 5 kiểu haplotype hệ gen ty thể trong quần thể bị tót ở khu vực Đơng Dƣơng bao gồm Việt Nam (2), Lào (1) và Campuchia (2). Trong đó ở quần thể bị tót của Việt Nam đã xác định 2 kiểu haplotype có khoảng cách di truyền rất xa nhau. Qua đó cho thấy trong quần thể bò tót của Việt Nam tồn tại 2 nhóm rất khác nhau về di truyền.
7. Đã xác định đƣợc 2 kiểu haplotype hệ gen ty thể ở quần thể bò rừng Việt Nam và 1 kiểu haplotype ở quần thể bị rừng của Campuchia. Khơng có sự sai khác di truyền đáng kể giữa các kiểu haplotype của bò rừng ở Việt Nam và bò rừng ở Campuchia.
8. Quần thể bị tót và bị rừng ở Việt Nam có tính đa dạng di truyền rất thấp thể hiện qua việc rất ít kiểu haplotype hệ gen ty thể đƣợc xác định.
ĐỀ NGHỊ
1. Khi xây dựng các đề tài, dự án bảo tồn quần thể bò ở Hà Giang nên chủ yếu tập trung bảo tồn hai nhóm bị có sự khác nhau về di truyền ở các huyện Đồng Văn, Mèo Vạc và Hồng Su Phì, Xín Mần.
2. Cần tiến hành mở rộng nghiên cứu nhằm đánh giá đa dạng di truyền và cấu trúc di truyền trên các quần thể bò vàng bản địa khác của Việt Nam nhƣ: bò vàng Lạng Sơn, Thanh Hố, Nghệ An, U đầu rìu, Bà Rịa Vũng Tàu, Phú Yên. So sánh sự sai khác và tính đa dạng di truyền giữa các nhóm bị vàng địa phƣơng của Việt Nam. 3. Cần tiếp tục nghiên cứu đánh giá sự đa dạng di truyền của quần thể bị tót và bị rừng đƣợc ghi nhận tồn tại ở tất cả các khu vực của Việt Nam.
4. Tiến hành so sánh đặc điểm hình thái và di truyền của 3 loài phụ bị tót để xác định liệu 2 nhóm bị đƣợc xác định ở Việt Nam có phải là các lồi phụ khác nhau hay khơng.
DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ
1. Phạm Doãn Lân, Nguyễn Trọng Bình, Trần Xn Hồn, Vũ Chí Cƣơng, Lê Đình Lƣơng và J.C. Maillard (2008), “Phân tích đa dạng trình tự nucleotide ADN ty thể và mối quan hệ di truyền của bị H’mơng với một số quần thể bị khác”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Chăn nuôi. Số 13, trang 51-57.
2. Taiana Rivière-Dobigny, Lan Pham Doan, Nam Le Quang, Jean-Charles Maillard and Johan Michaux (2008), “Species Identification, Molecular Sexing and Genotyping Using Non-invasive Approaches in Two Wild Bovids Species:
Bos gaurus and Bos javanicus” Journal of Zoo Biology. 28 (2), pp. 127-136
3. Phạm Doãn Lân, Nguyễn Trọng Bình, Vũ Chí Cƣơng, Jean-Charles Maillard, (2008), “Sử dụng kỹ thuật microsatellite để đánh giá tính đa dạng di truyền và cấu trúc di truyền của quần thể bị ni ở tỉnh Hà Giang” Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ. Số 4 (24), trang 310-317.
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt
[1]. Nguyễn Văn Cƣờng, Nguyễn Thị Diệu Thuý, Nguyễn Thu Thuỷ, Đậu Hùng Anh, Nguyễn Đăng Vang (2003), “So sánh tính đa hình gen RYR-1 và gen FSH ở lợn nội và lợn ngoại”, Tạp chí Cơng nghệ Sinh học. Số 1 (1), trang. 39-46
[2]. Hồ Huỳnh Thuỳ Dƣơng (1997), Sinh học phân tử, Nhà xuất bản giáo dục [3]. Nguyễn Mạnh Hà (2008), Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học-sinh thái và
bảo tồn lồi bị tót (Bos gaurus Smith, 1827) ở Việt Nam, Luận án Tiến sỹ,
Viện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật.
[4]. Nông Văn Hải, Lê Thị Thu Hiền, Kim Thị Phƣơng Oanh, Huỳnh Thị Thu Huệ, Nguyễn Đăng Tôn, Đặng Văn Hạnh, Nguyễn Huy Hoàng, Trần Thị Phƣơng Liên, Lê Trần Bình (1999), “Ứng dụng cơng nghệ DNA trong nghiên cứu tài nguyên động vật và thực vật Việt Nam”, Báo cáo khoa học hội nghị sinh học toàn quốc, Hà Nội. Nhà xuất bản khoa học và kỹ thuật,
trang. 1197-1204.
[5]. Nguyễn Văn Hậu, Nhữ Văn Thụ, Phạm Doãn Lân, Lê Thị Th (2000), “Phân tích trình tự nucleotide gen hormon sinh trƣởng của một số giống lợn nội Việt Nam”, Tạp chí di truyền & ứng dụng. Số 3, trang 6-10.
[6]. Trần Xuân Hoàn (2002), Nghiên cứu sự sai khác di truyền ở gen hormon sinh trưởng của một số giống gà của Việt Nam, Luận án Tiến sỹ, Đại học
Quốc gia Hà Nội.
[7]. Đặng Huy Huỳnh (1986), Sinh học và sinh thái học các lồi thú móng guốc ở
Việt Nam, Nhà xuất bản Khoa học và kỹ thuật, Hà Nội
[8]. Lê Đình Lƣơng (2001), Nguyên lý và Kỹ thuật Di truyền. Nhà xuất bản khoa học và kỹ thuật.
[9]. Lê Viết Ly, Hoàng Kim Giao, Mai Văn Sánh, Võ Văn Sự, Lê Minh Sắt (1999), Chuyên khảo bảo tồn nguồn gen vật nuôi ở Việt Nam. Tập I: Phần gia súc . Nhà xuất bản nông nghiệp, Hà Nội.
[10]. Phan Cự Nhân (1982), “Sử dụng các chỉ tiêu di truyền sinh hóa protein máu, sữa trong công tác giống gia súc”, Khoa học và kỹ thuật nông nghiệp. Số
241, trang. 311-314.
[11]. Niên giám thống kê (2007). Nhà xuất bản thống kê, Hà Nội
[12]. Lê Minh Sắt, Nguyễn Văn Hậu, Nhữ Văn Thụ, Phạm Doãn Lân (1999), “Kết quả xác định kiểu gen halothan ở lợn bằng kỹ thuật nhân gen (PCR). Di truyền học & ứng dụng. Số 2, trang. 1-5.
[13]. Đỗ Lê Thăng, Đinh Đoàn Long (2007), Chú giải di truyền học, Nhà xuất bản giáo dục, trang. 164.
[14]. Lê Thị Thuý, Lƣu Quang Minh, Trần Thu Thuỷ, Nguyễn Trọng Bình, Phạm Dỗn Lân, Nguyễn Đăng Vang (2005), “Phân tích đa hình gen mã hố thụ thể Oestrogen (Oestrogen Receptor-ESR) ở một số giống lợn nuôi tại Việt nam” Tạp chí Cơng nghệ sinh học. Số 3 (1), trang. 45-50.
Tài liệu tiếng Anh
[15]. Anderson S., De Bruijn M., Coulson A., Eperon I., Sanger F. and Young I. (1982), “Complete sequence of bovine mitochondrial DNA. Conserved features of the mammalian mitochondrial genome”, Journal of Molecular Biology. 156 (4), pp. 683-717.
[16]. Avise J.C. (1994), Molecular Markers, Natural History and Evolution (1st ed.), New York: Chapman & Hall.
[17]. Belkhir K., Borsa P., Chikhi L., Raufaste N. and Bonhomme F. (2004),
GENETIX 4.05, logiciel sous Windows TM pour la génétique des populations. Laboratoire Génome, Populations, Interactions, CNRS UMR
[18]. Bell C.J. and Ecker J.R. (1994), “Assignment of 30 microsatellite loci to the linkage map of Arabidopsis”, Genomics. 19 (1), pp. 137-144.
[19]. Bell K. (1983), The blood groups of domestic mammals: Red Blood Cells of
Domestic Mammals, Amsterdam: Elsevier, pp. 133-164.
[20]. Bellemain E., Nawaz M., Valentini A., Swenson J. and Taberlet P. (2007), “Genetic tracking of the brown bear in northern Pakistan and implications for conservation”, Biological Conservation. 134 (4), pp. 537-547.
[21]. Bellemain E., Swenson J., Tallmon D., Brunberg S. and Taberlet P. (2005), “Estimating population size of elusive animals with DNA from hunter- collected feces: four methods for brown bears”, Conservation Biology. 19
(1), pp.150-161.
[22]. Bhat P., Mishra B. and Bhat P. (1990), “Polymorphism of mitochondrial DNA (mtDNA) in cattle and buffaloes”, Biochemical Genetics. 28 (7), pp.
311-318.
[23]. Bongso T., Hilmi M., Sopian M. and Zulkifli S. (1988), “Chromosomes of gaur cross domestic cattle hybrids”, Research in Veterinary Science. 44 (2), pp. 251-254.
[24]. Boom R., Sol C., Salimans M., Jansen C., Wertheim-van Dillen P. and Van der Noordaa J. (1990), “Rapid and simple method for purification of nucleic acids”, Journal of Clinical Microbiology. 28 (3), pp. 495-503.
[25]. Botstein D., White R.L., Skolnick M. and Davis R.W. (1980), “Construction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphisms”, American Journal of Human Genetics. 32 (3), pp. 314-331. [26]. Bradley D. G., MacHugh D. E., Loftus R. T., Sow R. S., Hoste C. H. and Cunningham E. P. (1994), “Zebu-taurine variation in Y chromosomal DNA: a sensitive assay for genetic introgression in west African trypanotolerant cattle populations”, Animal Genetics. 25 (1), pp. 7-12.
[27]. Bradley D., MacHugh D.E., Cunningham P. and Loftus R. (1996), “Mitochondrial diversity and the origins of African and European cattle”,
Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 93 (10), pp. 5131-
5135.
[28]. Bradshaw C., Isagi, Y., Kaneko S., Brook B., Bowman D. and Frankham R., (2007), “Low genetic diversity in the bottlenecked population of endangered non-native banteng in northern Australia”, Molecular Ecology. 16 (14), pp. 2998-3008.
[29]. Brenneman R., Chase JC., Olson T., Riley D. and Coleman S. (2007), “Genetic diversity among Angus, American Brahman, Senepol and Romosinuano cattle breeds”, Animal Genetics. 38 (1), pp. 50-53.
[30]. Britten R.J., Kohne D.E. (1968), “Repeated sequences in DNA”, Science.
161, pp. 529-540.
[31]. Byers O., Hedges S. and Seal U.S. (1995), Asian Wild Cattle Conservation
Assesment and Management Plan Workshop. Working Document. Apple
Valley, MN, USA: IUCN/SSC Conservation Breeding Specialist Group. [32]. Cai X., Chen H., Lei C., Wang S., Xue K. and Zhang B. (2007), “mtDNA
diversity and genetic lineages of eighteen cattle breeds from Bos taurus and Bos indicus in China”, Genetica. 131 (2), pp. 175-183.
[33]. Canon J., Alexandrino P., Bessa I., Carleos C., Carretero Y., Dunner S., Ferran N., Garcia D., Jordana J. and Laloe D. (2001), “Genetic diversity measures of local European beef cattle breeds for conservation purposes”,
Genetics Selection Evolution. 33 (3), pp. 311-332.
[34]. Canon J., Checa M., Carleos C., Vega-Pla J., Vallejo M. and Dunner S. (2000), “The genetic structure of Spanish Celtic horse breeds inferred from microsatellite data”, Animal Genetics. 31 (1), pp. 39.
[35]. Cavalli–Sforza L.L., Menozzi P. and Piazza A. (1994), The History and Geography of Human Genes, Princeton, N.J. Princeton University Press.
[36]. Condit R. and Hubbell S. (1991), “Abundance and DNA sequence of two- base repeat regions in tropical tree genomes”, Genome. 34(1), pp. 66-71. [37]. Cozzi M., Strillacci M., Valiati P., Bighignoli B., Cancedda M. and Zanotti
M. (2004), “Mitochondrial D-loop sequence variation among Italian horse breeds”, Genetics Selection Evolution. 36, pp. 663-672.
[38]. Crooijmans R., Kampen A., Poel J. and Groenen M. (1993), “Highly polymorphic microsatellite markers in poultry”, Animal Genetics. 24 (6), pp. 441- 443.
[39]. Cuc N., Muchadeyi F., Baulain U., Eding H., Weigend S. and Wollny C. (2006), “An assessment of genetic diversity of Vietnamese H'mong chickens”, International Journal of Poultry Science. 5 (10), pp. 912-920. [40]. Daniel G., Bradley., Ronan T., Loftus., Patrick Cunningham., David E. and
MacHugh D.E (1998), “Genetics and domestic cattle origins”, Evolutionary Anthropology. 6 (3), pp. 79-86.
[41]. Diez-Tascon C., Littlejohn R., Almeida P. and Crawford A. (2000), “Genetic variation within the Merino sheep breed: analysis of closely related populations using microsatellites”, Animal Genetics. 31 (4), pp. 243-251. [42]. Epstein H. and Mason I.L. (1984), Evolution of Domesticated Animals. (1st
ed.), London: Longman. pp. 6-27.
[43]. Estoup A., Presa P., Krieg F., Vaiman D. and Guyomard R. (1993), “(CT)n and (GT)n microsatellites: a new class of genetic markers for Salmon trutta L.(brown trout)”, Heredity. 71, pp. 488-496.
[44]. Gallagher D., Davis S., De Donato M., Burzlaff J., Womack J., Taylor J. and Kumamoto A. (1999), “A Molecular Cytogenetic Analysis of the Tribe Bovini (Artiodactyla: Bovidae: Bovinae) with an Emphasis on Sex
Shromosome Morphology and NOR Distribution”, Chromosome Research. 7 (6), pp. 481-492.
[45]. Giles R., Blanc H., Cann H. and Wallace D. (1980), “Maternal inheritance of human mitochondrial DNA”, Proceedings of the National Academy of Sciences. 77 (11), pp. 6715-6719.
[46]. Goossens B., Chikhi L., Utami S., de Ruiter J. and Bruford M. (2000), “A multi-samples, multi-extracts approach for microsatellite analysis of faecal samples in an arboreal ape”, Conservation Genetics. 1 (2), pp. 157-162. [47]. Graml R., Ohmayer G., Pirchner F., Erhard L., Buchberger J. and Mostageer
A. (1986), “Biochemical polymorphism in Egyptian Baladi cattle and their relationship with other breeds”, Animal Blood Groups and Biochemical Genetics. 17 (1), pp. 61-76.
[48]. Hall T. (2001), BioEdit, version 5.0. 9, North Carolina State University,
Raleigh, NC.
[49]. Harris H. (1966), “Enzyme polymorphisms in man”, Proceedings of Royal Society of London. Series B. 164 (995), pp. 298-310.
[50]. Hassanin A. and Ropiquet A. (2007), “What is the taxonomic status of the Cambodian banteng and does it have close genetic links with the kouprey?”,
Journal of Zoology. 271 (3), pp. 246-252.
[51]. Hassanin A., Ropiquet A., Cornette R., Tranier M., Pfeffer P., Candegabe P. and Lemaire M. (2006), “Has the kouprey (Bos sauveli Urbain, 1937) been domesticated in Cambodia?”, Comptes rendus-Biologies. 329 (2), pp.124-
135.
[52]. Hayes B. (2004), Wild cattle survey of Cattien National Park-Vietnam,
Technical Report No. 47 to WWF-Cattien National Park Project-Vietnam [53]. Huber S., Bruns U. and Arnold W. (2003), “Genotyping herbivore feces
[54]. Ibeagha-Awemu E. and Erhardt G. (2005), “Genetic structure and differentiation of 12 African Bos indicus and Bos taurus cattle breeds,
inferred from protein and microsatellite polymorphisms”, Journal of Animal
Breeding and Genetics. 122 (1), pp. 12-20.
[55]. IUCN Red list of Threatened Species [http://www.iucnredlist.org/]
[56]. Janssens X., Fontaine M., Michaux J., Libois R., de Kermabon J., Defourny P. and Baret P. (2008), “Genetic pattern of the recent recovery of European otters in southern France”, Ecography. 31 (2), pp. 176-186.
[57]. Jeffreys A.J., Wilson V., Neumann R. and Keyte J. (1988), “Amplification of human minisatellites by the polymerase chain reaction: towards DNA fingerprinting of single cells”, Nucleic Acids Research. 16, pp. 10953-10971. [58]. Jeffreys A.J., Wilson V. and Thein S.L. (1985), “Hypervariable
“minisatellite” regions in human DNA”, Nature. 314, pp. 67-73.
[59]. Kageyama S., Yoshida I., Kawakura K. and Chikuni K. (2004), “A novel repeated sequence located on the bovine Y chromosome: its application to rapid and precise embryo sexing by PCR”, Journal of Veterinary Medical Science. 66 (5), pp. 509-514.
[60]. Kashi Y., King D. and Soller M. (1997), Simple sequence repeats as a source of quantitative genetic variation”, Trends in Genetics. 13 (2), pp. 74-78. [61]. Kidd K. and Pirchner F. (1971), “Genetic relationships of Austrian cattle
breeds”, Animal Blood Groups and Biochemical Genetics. 2, pp. 145-58. [62]. Kidd K., Stone W., Crimella C., Carenzi C., Casati M. and Rognoni G.
(1980), “Immunogenetic and population genetic analyses of Iberian cattle”,
Animal Blood Groups and Biochemical Genetics. 11 (1), pp. 21-38.
[63]. Kim K. I., Lee J. H., Lee S. S. and Yang Y. H. (2003), “Phylogenetic relationships of Northeast Asian cattle to other cattle populations determined
using mitochondrial DNA D-loop sequence polymorphism”, Biochemical Genetics. 41, pp. 91-98.
[64]. Kim K., Yeo J. and Choi C. (2002), “Genetic diversity of north-east Asian cattle based on microsatellite data”, Animal Genetics. 33 (3), pp. 201-204. [65]. Kim T., Kim K., Choi B., Yoon D., Jang G., Lee K., Chung H., Lee H., Park
H. and Lee J. (2005), “Genetic structure of pig breeds from Korea and China using microsatellite loci analysis”, Journal of Animal Science. 83, pp. 2255- 2263.
[66]. Kimura M. (1968a), “Evolutionary rate at the molecular level”, Nature. 217, pp. 624-626.
[67]. King D. and Soller M. (1999), “Variation and fidelity: the evolution of simple sequence repeats as functional elements in adjustable genes”,
Evolutionary Theory and Processes: Modern Perspective, Papers in Honour of Eviatar Nevo, pp. 65–82.
[68]. King D., Soller M. and Kashi Y. (1997), “Evolutionary tuning knobs”
Endeavour. 21 (1), pp. 36-40.
[69]. Kohn M., Knauer F., Stoffella A., Schroder W. and Paabo S. (1995), “Conservation genetics of the European brown bear-a study using excremental PCR of nuclear and mitochondrial sequences”, Molecular