- Trước phẫu thuật đánh số từng con thỏ theo số thứ tự từ 1 đến 12 Răng tiến hành phẫu thuật là răng cửa hàm dưới bên trái.
2.2.4. Các bước nghiên cứu siêu cấu trúc
Hai mẫu ở giai đoạn 4 tuần và hai mẫu ở giai đoạn 12 tuần được làm siêu cấu trúc để mô tả quá trình liền thương sau cắm lại răng. Mô tả sự liền thương trên siêu cấu trúc của bề mặt răng, bề mặt xương ổ răng và DCQR.
Quy trình:
- Xử lí mẫu xương nghiên cứu pha khoáng
• Cưa đôi XOR, bóc tách lấy chân răng và XOR
• Rửa mẫu dưới vòi nước ấm 3-5 phút để loại bỏ mạt cưa
• Khử chất hữu cơ bằng dung dịch Natrihypochlorit 5% trong 5 – 7 phút
• Rửa mẫu dưới vòi nước chảy 12 – 24 giờ
• Rửa lại mẫu dưới vòi nước ấm 3 – 5 phút
• Khử nước trong các mẫu bằng cồn có nồng độ tăng dần theo quy trình sau:
Cồn 500 x 5 phút/ lần x 1 lần
Cồn 700 x 20 phút/ lần x 1 lần
Cồn 850 x 2 phút/ lần x 1 lần
Cồn 960 x 20 phút/ lần x 1 lần
Cồn 1000 x 20 phút/ lần x 2 lần
• Khử cồn trong các mẫu xương bằng cồn T- Butyl theo quy tình
Ngâm các mẫu xương trong cồn T- Butylx 30 phút/lần x3 lần. Sau lần 3 để trong ngăn đá tủ lạnh 30 phút đến 1 h.
• Mạ phủ mẫu bằng máy JFC -1200
• Nghiên cứu mẫu dưới kính hiển vi điện tử quét JSM-5410LV - Xử lí mẫu xương nghiên cứu pha hữu cơ
Các bước làm tương tự như quy trình xử lí mẫu xương ở trên pha khoáng, chỉ khác bước loại bỏ các dây chằng quanh răng, tủy xương bằng cách ngâm trong dung dịch tripsin 1,5% trong 4 -5 ngày, hàng ngày thay dung dịch 1 lần. Và cố định mẫu bằng dung dịch axit osmic 1% pha đệm cocadylat (pH=7,2- 7,4) trong 4 – 6 giờ.
- Xử lí mẫu xương nghiên cứu mô xương, răng, hệ thống DCQR
Các bước làm tương tự như pha khoáng, chỉ khác là khử chất khoáng mô xương bằng dung dịch axit nitric 5% x 5 – 7 ngày.