- Tiến hành thủ thuật nội soi dạ dày
+ Chuẩn bị và kiểm tra máy: Vận hành máy, kiểm tra hệ thống ánh sáng, kiểm tra hệ thống bơm hơi và nước, hệ thống hút, nút điều khiển và độ uốn cong của ống soi
+ Tiến hành nội soi: Bệnh nhân nằm ở tư thế nghiêng trái. Đặt ngáng miệng vào giữa hai cung răng bệnh nhân. Đưa ống nội soi đã được bôi trơn bằng gel xylocain qua miệng vào thực quản, đến dạ dày. Bơm hơi và quan sát kỹ các vùng niêm mạc dạ dày. Sử dụng kỹ thuật quay ngược ống soi để quan sát cùng tâm vị, phình vị, bờ cong lớn, bờ cong nhỏ. Khi phát hiện có tổn thương thì ghi nhận chi tiết về hình thái và vị trí tổn thương. Đưa ống xuống tá tràng quan sát và ghi nhận tổn thương [12].
+ Ghi nhận các hình thái tổn thương dạ dày
Các hình thái tổn thương dạ dày theo phân loại Sydney [156]. + Tiến hành lấy hai mẫu sinh thiết vùng hang vị.
- Xử lý 2 mẫu sinh thiết
Một mẫu được ngâm trong formol sau đó gửi khoa giải phẫu bệnh lý để làm xét nghiệm mô bệnh học.
Một mẫu làm xét nghiệm urease nhanh. Sau khi có kết quả dương tính với H. pylori, mẫu xét nghiệm này sẽ được tái sử dụng [122], lưu trữ ở nhiệt độ -200C, sau đó gửi đến bộ môn Di truyền y học của Trường Đại học Y Dược Huế đề xét nghiệm PCR xác định nhiễm H. pylori. Ngay sau khi có kết quả PCR dương tính với H. pylori, sản phẩm PCR sẽ được sử dụng để làm xét nghiệm RFLP xác định đề kháng clarithromycin.
2.2.5.4. Đánh giá các tổn thương dạ dày trên nội soi
- Vị trí viêm + Hang vị
+ Thân vị/ tồn dạ dày
- Mơ tả tổn thương (theo tiêu chuẩn Sydney [156])
Đối với những bệnh nhân có đồng thời nhiều tổn thương trên nội soi, chúng tôi chỉ ghi nhận tổn thương rõ ràng và nổi trội nhất.
+ Phù nề xung huyết + Trợt phẳng
+ Trợt lồi + Teo
+Xuất huyết
+ Phì đại nếp niêm mạc + Trào ngược dịch mật
2.2.5.5. Kỹ thuật xét nghiệm urease nhanh
Chúng tôi sử dụng test Urease được sản xuất bởi công ty cổ phần thương mại dịch vụ Việt Á.
Nguyên lý: Urê trong sản phẩm bị men urease của H. pylori thủy phân
tạo ra NH3 làm kiềm hóa mơi trường. Chất chỉ thị màu giúp nhận biết nếu phản ứng xảy ra [22].
Sản phẩm được bảo quản lạnh 4 - 100C.
Các đặc điểm kỹ thuật được nêu trong protocol của công ty là: + Độ nhạy > 90% + Độ đặc hiệu: > 95% + Chẩn đốn dương tính 100% + Chẩn đốn âm tính 86% + Độ chính xác chung 91% - Phương pháp tiến hành
+ Kiểm tra hạn dùng, màu sắc mẫu trước khi sử dụng (màu vàng nhạt). Thuốc thử được bảo quản trong tủ lạnh được lấy ra và để ổn định ở nhiệt độ phòng 15 - 20 phút.
+ Mảnh sinh thiết được cho ngập trong thuốc thử, đậy nút và không lắc. + Ghi rõ ràng tên bệnh nhân và giờ thử trên thân ống bằng mực màu. + Đọc kết quả sau 60 phút
Nhận định kết quả theo hướng dẫn của nhà sản xuất:
Clotest dương tính khi:
- Thuốc thử chuyển từ màu vàng cam sang màu đỏ tím trong vịng 5 phút: Mẫu chứa H. pylori có hoạt tính mạnh
- Thuốc thử chuyển từ màu cam sang sang màu đỏ cam sậm trong vòng 30 phút: Mẫu chứa ít H. pylori hoặc bệnh nhân đã có đợt điều trị nên H. pylori đang ở dạng thoái triển
Clotest âm tính khi:
- Thuốc thử chuyển từ màu vàng cam sang màu đỏ hồng sau 30 phút: Màu chuyển do tạp nhiễm các loài Proteus, Morganella hoặc do ảnh hưởng
tạm thời bởi pH của dạ dày.
- Thuốc thử không thay đổi màu vàng cam sau 60 phút