V t thy tinh, nha ự
H nh p Chloroform:Isoamylalcohol (24:1): ỗợ Dùng để lo ạ
bỏ protein, polycaccharide và các ph c h p khơng ph i DNA. Sau khi li tâmứ ợ ả
v i v n t c 13000rpm trong 5 phút dung d chớ ậ ố ị chia ra thành 3 l p: l pớ ớ
thứ nh t làấ ph n d ch trongầ ị ở trên cùng cĩ ch a DNA, l p thứ ớ ứ hai là m tộ
l p protein, l p kớ ớ ế ti p cĩế ch a chloroform vàứ t t cấ ả nh ng thành ph nữ ầ
c n lo i bầ ạ ỏ khác.
Ethanol 96% và 70%: Ethanol 96% dùng để t a DNA vàủ b oả
vệ chúng kh i sỏ ự phân h y c a các enzyme. Chúng k t h p v iủ ủ ế ợ ớ
mu iố để tránh gây h i cho DNA.ạ
Ethanol 70% dùng để r a t a, lo i bử ủ ạ ỏ isopropanol, mu i CTAB raố
kh i DNAỏ
Câu 2: Sự khác nhau khi dùng TE 0.1X và nước để hịa tan DNA
TE 0.1 Buffer bao g m 10mM Tris pH8 ,0.1 mM EDTA (pH 8)ồ
cĩ tác d ng b o qu n DNA (ch ng oxy hĩa DNA, b o vụ ả ả ố ả ệ DNA kh i sỏ ự phân
h y c a các enzyme) trong th i gian lâu h n so v i khi ta hịa tan DNA v iủ ủ ờ ơ ớ ớ
nước.
DNA sau khi r aử được làm khơ b ng cáchằ
ph iơ ở nhi tệ độ phịng qua đêm hay s y khơ. M cấ ụ đích tránh m u DNA cịnẫ
ch a ethanol sẽứ nh hả ưởng đ n DNA t ng s . Vàế ổ ố q trình phân tích m uẫ
về sau. Khi c n cĩầ thể hịa tan l i v i nạ ớ ước theo n ngồ độ mong mu n.ố
Câu 4:
N ngồ độ và số lượng DNA ở m u tơm:ẫ
Ta cĩ: OD260nm = 1 Þ DNA = 50ng/ml
Qua k t quế ả đo OD c a Tơm ta cĩ: ODủ 260nm = 2.5825
Trước khi ti n hànhế đo OD, m uẫ đã được pha lỗng 10 l n. V yầ ậ
n ngồ độ DNA trong m u Tơm thuẫ được:
CDNA= OD260nm* 50ng/ml*10 = 2.5825*50ng/ml*10 = 1291.25 ng/ml.
Dung d ch DNA trị ước khi pha lỗng là 30 ml nên số lượng DNA thu được là: 30*1291.25 = 38,737.5ng
K t quế ả OD260/OD280 là 1.9888 cho th y DNA c a m u tơmấ ủ ẫ
là khá tinh s ch,khơng bạ ị nhi m Protein cũng nhễ ư Chlorofrom,đ ng th iồ ờ
n ngồ độ DNA thu được cũng khá cao (1291.25 ng/µl)
Tương t :ự