CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.4. XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA CHẤT DTE5.VA
Từ cao ethyl acetate qua hai lần tách trên sắc ký cột với chất hấp phụ là silica gel, sau đó kết tinh trong methanol ta thu được chất sạch ký hiệu là
DTE5.VA với hàm lượng 7mg từ 10 gam cao (tương đương 0,0007% so với
khối lượng cao).
Trên bản mỏng tráng sẵn SiO2 của hãng MERCK, Cộng hòa liên bang
Đức, chất DTE5.VA cho một vệt hình oval, ban đầu hiện màu hồng nhạt sau đến màu đen khi phun thuốc thử Vanilin/ H2SO4 đặc và hơ nóng ở nhiệt độ
1000C. Theo kinh nghiệm chiết tách các chất từ thực vật thì cho thấy đây rất có thể là một axit béo. Để khẳng định cấu trúc của chất DTE5.VA chúng tôi
tiến hành ghi phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H – NMR và 13C – NMR của chất này.
Ø Phổ 1H – NMR của chất DTE5.VA:
Phổ 1H – NMR của chất DTE5.VA được ghi trong dung môi CDCl3 trên máy 500 MHz cho ta một phổ điển hình của một axit béo. Các tín hiệu đặc
trưng xuất hiện tại δ (ppm): 0,88 (3H, t, J = 6,8 Hz); 1,26 (37H, m); 1,63 (3H, m); 2,35 (2H, t, J = 6,7 Hz). Rõ ràng đây là phổ 1H – NMR của một mạch carbon dài, có một nhóm methyl (CH3) ở đầu mạch và một nhóm methylen
bốn (không mang hydro) và gắn với một gốc phân cực, vì nhóm này có độ
chuyển dịch hóa học lớn hơn các nhóm CH2 khác (δ = 2,35ppm).
Phổ 1H – NMR của chất DTE5.VA được trình bày trong Hình 3.20 và Hình
3.21.
Ø Phổ 13C – NMR của chất DTE5.VA:
Phổ 13C – NMR (125 MHz, CDCl3) của chất DTE5.VA hoàn toàn phù hợp với các số liệu của phổ 1H – NMR và cho thấy rõ ràng đây là một axit
béo no, mạch dài. Các tín hiệu thể hiện như sau: δ (ppm) : 14,13 (CH3); 22,70 (CH2); 24,71 (CH2); 29,08 (CH2); 29,25 (CH2); 29,37 (CH2); 29,45 (CH2); 29,60 (CH2); 29,71 (nhiều CH2); 31,94 (CH2); 33,77 (CH2); và 178,32 (- COOH).
Phổ 13C – NMR của chất DTE5.VA được trình bày trong Hình 3.22 và Hình 3.23.
Kết hợp số liệu từ phổ 1H – NMR và 13C – NMR ta có thể suy ra cấu trúc của chất DTE5.VA như sau:
• Từ giá trị tích phân số proton trong phổ 1H – NMR ta rút ra trong phân tử có 45 nguyên tử hydro (45 H) ở mạch chính.
• Mạch chính được gắn với một nhóm – COOH ở cuối mạch.
• Áp dụng cơng thức để tính số lượng ngun tử carbon cho một mạch
carbon no, ta có cơng thức: CnH2n+1 –
Với 2n + 1 = 45 → 2n = 45 – 1 = 44 → n = 22. Vậy chất DTE5.VA có cơng thức là C22H45COOH
Cơng thức cấu tạo: CH3[CH2]21COOH (Axit Tricosanoic).
Thông thường các axit béo thiên nhiên đều có số nguyên tử carbon là số chẵn. Nhưng trong trường hợp này chất DTE5.VA có 23 nguyên tử carbon (một số lẻ). Đây là chất lần đầu tiên được tìm thấy trong cây đỉnh tùng.