4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU, THẢO LUẬN
4.2.2 Kết quả PCR kiểm tra gen kháng bạc lá
để kiểm tra khả năng mang 3 gen kháng bạc lá Xa4, xa5, Xa7 của các dòng, giống khảo sát chúng tôi tiến hành bằng kỹ thuật PCR xác ựịnh gen kháng sử dụng các cặp mồi như ựã nêu ở phần phương pháp nghiên cứu.
Các ựối chứng là các dòng ựẳng gen IR24; IRBB4; IRBB5; IRBB7. Trong các phản ứng PCR các gen kháng ựược xác ựịnh bằng cách so sánh kắch cỡ vệt băng nhân lên của mẫu với kắch thước vệt băng của ựối chứng từ ựó rút ra kết luận về gen kháng của mẫu giống khảo sát.
Cụ thể, trong trường hợp của gen Xa4 vơi cặp mồi Npb181, thì kắch thước vệt băng của mẫu nếu chứa gen Xa4 là 120 bp, không chứa gen Xa4 là 150 bp; trong trường hợp Xa7 với cặp mồi P5 kắch thước vệt băng của mẫu nếu chứa gen Xa7 là 297 bp, không chứa gen Xa7 là 262 bp. Trong trường hợp gen xa5 sử dụng cặp mồi PG556 và emzyme Dral, sản phẩm PCR của mẫu giống mang gen lặn xa5 sau khi cắt bằng emzyme sẽ xuất hiện vạch băng kép tại kắch thước khoảng 450 bp.
Hình 4.1. điện di kiểm tra gen kháng Xa4
1: IR24, 2: IRBB4, 3: KD18, 4: H116, 6: PA1, 7: T7, 8: T12, 9: T18, 9: T23, 10:T24, 11:T24, 12:T32, 13:T70, 14:T31, 15: T51, 16:T55, 17: 10763, 18:10684,19:Tl69, 20:10698
Kết quả trình bày Bảng 4.9 cho thấy trong 31 mẫu giống trong tập ựoàn có 7/31 dòng chứa gen Xa4 ựó là T7, T36, T42, T65-1, T70, 10600-1, 10738, chỉ có 1 mẫu giống chứa gen Xa7 là PA2, không mẫu giống khảo sát nào chứa cả 2 hoặc 3 gen nói trên.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ.. 69