3. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.5.1 Lây nhiễm nhân tạo (thực hiện trên thắ nghiệm chọn lọc các dòng, giống triển
triển vọng)
9 chủng vi khuẩn phổ biến ở miền bắc Việt Nam ựược sử dụng trong thắ nghiệm này. Danh sách các chủng ựược sử dụng ựể lây nhiểm nhân tạo sau
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ.. 39
Bảng 3.2 Danh sách các chủng vi khuẩn ựược sử dụng ựể lây nhiễm nhân tạo
STT Kắ hiệu Isolate
Phân lập Từ giống
địa ựiểm thu thập mẫu bệnh
2 911 HAU 10134-3 Nếp tân Thuận Châu (Sơn la) 3 R7 Nhị ưu 838 Quỳnh Giang Ờ Quỳnh
Lưu (Nghệ An) 4 893 HAU 10132-5 Tẻ ựỏ Hải Dương
5 997 HAU 10147-6 Khang dân Diễn Kỳ - Diễn Châu (Nghệ An)
6 950 HAU 10141-9 Nhị ưu 838 Cường Thịnh Ờ Yên kì (Yên Bái)
7 507 HAU 0808-8 Nếp thơm Vinh Hống Ờ Bình Giang (Hải Dương)
8 R14 - Hưng Hà (Thái Bình)
9 918 HAU 10131-1 - Nam Trực (Nam định) 10 948 HAU 10141-7 - Nông Cống (Thanh Hóa)
Dấu Ộ-Ợ thể hiện phân lập từ nhiều giống.
Vi khuẩn ựược bảo quản trong môi trường Skim milk và pharaphin lỏng. Dung dịch vi khuẩn có nồng ựộ từ 108 Ờ 109/ml. Vi khuẩn ựược ựem thử ựộc tắnh sau khi bảo quản bằng cách lây nhiễm thử trên dòng nhiễm chuẩn IR24.
- đánh giá khả năng kháng nhiễm bệnh bạc lá
Thắ nghiệm lây nhiễm nhân tạo ựược tiến hành bằng cách cắt ựầu lá lúa khi bắt ựầu có ựòng (trước trỗ bông 20 ngày) là thời kỳ cây lúa mẫn cảm nhất với bệnh. Toàn bộ ựầu lá xanh của một khóm lúa ựược cắt sâu 3 - 5cm bằng kéo nhúng dung dịch vi khuẩn.
Mỗi một khóm tương ứng với một chủng vi khuẩn nêu trên.
đánh giá khả năng kháng bệnh của từng giống bằng cách ựo chiều dài vết bệnh (cm) sau 18 ngày lây nhiễm, sau ựó ựánh giá phản ứng với vi khuẩn gây bệnh theo phương pháp ựo chiều dài vết bệnh theo quy ựịnh của IRRI như sau:
Chiều dài vết bệnh (cm) Phản ứng
< 8 Kháng - Resistant (R)
8 Ờ 12 Nhiễm vừa Ờ Moderately resistant (M) > 12 Nhiễm nặng - Suscepptible (S)
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ.. 40
đánh giá khả năng kháng bằng so sánh với phổ kháng nhiễm của các mẫu giống với các dòng ựẳng gen mang gen kháng.