* Sơ đồ quy trình:
Hình 3.6: Sơ đồ quy trình chiết rút phlorotannins từ rong Sargassum cristaefolium - Khánh Hòa.
Rong khô Rửa Cắt nhỏ (băm nhỏ) Chiết phlorotannin Lọc Dịch lọc Thẩm tách Cô đặc (500C, 60p’) Ly tâm (15p’) Lạnh đông (3 ÷ 4h) Bã rong Sản xuất Alginate Đông khô (8 ÷ 10h) Định lượng phlorotannin
Thu hồi dung môi Dung môi:
Acetone/nước(7/3) Tỷ lệ NL/DM: 1/15÷1/20 t0C ủ: 50 ÷ 600C
Thời gian ủ: 15÷20 giờ.
* Tuyết minh quy trình :
- Nguyên liệu:
Lựa chọn loại rong Mơ ít tạp chất, có nguồn gốc và được thu mẫu đúng cách. Rong khô cần được bảo quản trong điều kiện thích hợp, tránh hút ẩm, tránh tiếp xúc trực tiếp với ánh sáng mặt trời. Vì khi đó một số thành phần nhạy cảm của rong với môi trường sẽ bị phân hủy gây hao hụt hoặc làm biến tính giá trị của chúng. Do đó rong được đựng trong bao bì nylon và để dưới bong tối.
- Rửa sạch:
Mục đích loại bỏ tạp chất bám dính trên rong nguyên liệu. Tiến hành rửa rong bằng nước sạch của nhà máy thành phố. Thao tác rửa phải nhanh và sạch, đồng thời tránh làm rong bị dập nát khi rửa, gây tổn thất chất tan theo nước.
- Cắt nhỏ (băm nhỏ):
Rong sau khi rửa sạch được mang đi làm ráo sơ bộ sau đó cắt nhỏ (băm nhỏ) khoảng 1 ÷ 3 mm. Đây là kích thước phù hợp cho quá trình chiết.
Có thể dùng kéo cắt hoặc dùng dao băm nhỏ rong theo kích thước trên. - Chiết phlorotannin:
Rong đã cắt nhỏ được cho vào các lọ thủy tinh có nắp vặn kín, tránh hiện tượng dung môi bay hơi trong quá trình ngâm rong. Ta tiến hành chiết trong các điều kiện: dung môi chiết là hỗn hợp acetone/nước (7/3), sử dụng tỷ lệ NL/DM trong khoảng 1/15÷1/20; ở nhiệt độ chiết 50 ÷ 600C và thời gian chiết là 15÷20 giờ. Thực hiện công đoạn chiết theo phương pháp ngâm. Khi gia nhiệt cho quá trình chiết, sử dụng tủ sấy điều chỉnh được nhiệt độ đồng thời phải thường xuyên lắc mẫu trong suốt thời gian chiết.
- Lọc:
Lọc nhằm mục đích loại bỏ các hợp chất không tan ra khỏi hỗn hợp chiết và thu hồi dịch chiết. Tiến hành lọc ở điều kiện phòng và sử dụng giấy lọc Whatman 01.
- Thẩm tách:
Thẩm tách để loại muối ra khỏi dịch lọc nhờ vào sự chênh lệch nồng độ chất tan giữa dịch chiết và môi trường nước.
Thực hiện quá trình bằng màng thẩm tách chuyên dụng trong nước sạch, nước luôn được lưu thông để đảm bảo sự chênh lệch nồng độ này. Thời gian thẩm tách khoảng 24 giờ.
- Cô đặc:
Tiến hành cô đặc ở nhiệt độ 500C trong khoảng thời gian 40÷50 phút thì đạt được nồng độ chất khô hoặc thể tích dịch chiết như mong muốn. Sauk hi cô đặc hầu như dung môi acetone bay hơi hết, lượng còn lại trong dung dịch chủ yếu là nước.
Sử dụng thiết bị cô quay điều chỉnh được nhiệt độ và áp suất một cách dễ dàng, tạo môi trường chân không và khuấy đảo cho quá trình cô đặc. Từ đó hạn chế được ảnh hưởng của các yếu tố môi trường, nhiệt độ cao đến hàm lượng và hoạt tính chất tan cần chiết.
- Ly tâm:
Một lượng tạp chất còn xót lại sau quá trình lọc và cô đặc sẽ được tách hết ra khỏi dịch chiết nhờ vào lực ly tâm của quá trình ly tâm. Vì thế sau khi ly tâm, dịch lọc trong hơn và màu sáng hơn.
Tiến hành ly tâm bằng máy ly tâm với tốc độ 5000 V/p, thời gian ly tâm 15 phút. - Đông khô:
Đông khô là quá trình chuyển trạng thái nước từ rắn sang khí không qua lỏng. Mục đích của quá trình này là làm khô dịch chiết, chất tan còn lại ở dạng bột khô, mịn. Trước khi cho mẫu vào thiết bị đông khô, ta cần làm đông mẫu trong ống nhựa (chất lỏng trong dịch chiết kết tinh lại) ở một thể tích nhất định, thời gian làm đông từ 5 ÷ 6 giờ trong tủ đông, Sau đó mẫu đông được đem đi đông khô bằng thiết bị chuyên dụng ở nhiệt độ 200C trong thời gian 8 ÷ 10giờ (các tinh thể nước đá sẽ thăng hoa để lại sản phẩm khô).
- Định lượng phlorotannin:
Sau công đoạn đông khô tiến hành xác định hàm lượng phlorotannin trong chất chiết khô. Từ đó xác định được hàm lượng phlorotannin có trong rong nguyên liệu.
Thực hiện quá trình định lượng bằng phương pháp so màu, dùng thuốc thử Folin – Ciocalteu ở bước sóng 750 nm.
Hình 3.7: Hình ảnh chất chiết khô có trong nguyên liệu sau khi đông khô.
3.6. Đánh giá chất lượng hợp chất chiết khô sau quá trình chiết.
Tiến hành chiết phlorotannin từ rong Sargassum cristaefolium - Khánh Hòa
theo quy trình đề xuất. Kết quả phân tích đánh giá chất lượng hợp chất chiết khô sau khi chiết được thể hiện ở bảng dưới đây.
Bảng 3.8 Phân tích thành phần chất chiết khô
STT Thành phần Hàm lượng trong chất chiết khô (%)
01 Phlorotannin 27
02 Carbohydrat (xơ hòa tan) 40
03 Protein 7,0
04 Lipit 1,0
05 Khoáng 20
Nhận xét: Từ kết quả đánh giá trên ta thấy trong hỗn hợp chất chiết khô có chứa nhiều thành phần quý của rong, có lợi cho sức khỏe con người. Do đó sản phẩm chiết là sản phẩm có giá trị và mang tính khả quan trong thực tế.