a) Mơi trường phân lập vi khuẩn (mơi trường Ashby)
Sucrose 20g CaCO3 5g K2HPO4 0,2g MgSO4.7H2O 0,2g NaCl 0,2g K2SO4 0,1g Agar 15g pH ( ở 250C) 6,8 2
Hịa tan các thành phần của mơi trường trong 1lít nước cất, điều chỉnh pH theo yêu cầu rồi chia vào các bình tam giác. Đậy nút bơng, giấy báo rồi đem hấp khử trùng ở nhiệt độ 1050C trong 30 phút. Việc bao gĩi phải thật kín và cẩn thận để sau khi khử trùng khơng bị bật nút rất dễ nhiễm vi sinh vật, tránh mất nước và làm pH thay đổi.
22 b) Mơi trường lên men
KH2PO4 0,5g MgSO4.7H20 0,3g NaCl 0,3g FeSO4 0,005g MnSO4 0,005g (NH4)6Mo7O24 0,005g CaCO3 3,5g Propynol 380 ml Sucrose 20g pH (ở 250C) 6,8 2
Hịa tan các thành phần của mơi trường trong 1lít nước cất, điều chỉnh pH theo yêu cầu rồi chia vào các bình tam giác. Đậy nút bơng, giấy bạc rồi đem hấp khử trùng ở nhiệt độ 1050C trong 30 phút.
c) Dung dịch nước muối sinh lý
Hịa tan 8,5g NaCl trong 1 lít nước cất. Hấp khử trùng ở nhiệt độ 1210C trong 15 phút rồi để nguội.
d) Dung dịch H2O2 30%
Dung dịch H2O2 30% là dung dịch được sử dụng để thử hoạt tính catalase. e) Thuốc thử Nessler
- Dung dịch KCl 20%.
- Dung dịch muối KNaC4H4O6.4H2O (Tactrat Kali Natri) 50g muối hịa tan trong 100ml nước cất.
- Dung dịch NH4Cl tiêu chuẩn mẹ (0,1mg N/ml) 0,382g NH4Cl tinh khiết sấy khơ pha thành 1 lít.
Dung dịch NH4Cl đem dùng cĩ nồng độ 0,01 mgN/ml, lấy dung dịch mẹ pha lỗng 10 lần bằng nước cất.
-Thuốc thử Nessler: 15g HgI2 và 10g KI hịa vào 500ml nước cất, tiếp tục cho vào 40g NaOH. Quấy đều cho tan, để lắng vài ngày, gạn dung dịch rồi cho vào bình màu nâu để dùng.
23
Tất cả các dung dịch thuốc thử trên đều pha bằng nước cất vơ trùng, khơng chứa đạm.