Bản 1
Giếng 1: Blank
Giếng 2: Dịch chiết tía tơ với nước Giếng 3: Dịch chiết tía tơ với nước Giếng 4: Dịch chiết tía tơ với ethanol
Bản 2
Giếng 1: Blank
Giếng 2: Cao tía tơ chiết với nước Giếng 3: Cao tía tơ chiết với ethanol Giếng 4: Cao dây gắm chiết với nước
Kết quả thí nghiệm MTT trên dòng tế bào RAW 264.7 sau khi đã thử với các loại dịch chiết cho thấy, nhiều dịch chiết không ảnh hƣởng đến khả năng sống của tế bào (Hình 17). Ví dụ nhƣ dịch chiết nƣớc của tía tơ, ở các nồng độ từ 0,625 mg/ml, 1,25 mg/ml, 2,5 mg/ml, 5 mg/ml và 10 mg/ml đều không ảnh hƣởng tới khả năng sống của tế bào, nồng độ này tƣơng đƣơng với việc tế bào đƣợc xử lý với 10 mg, 5 mg, 2,5 mg và 1,25 mg trên 1x104
tế bào. Cụ thể, tỷ lệ tế bào sống ở các nồng độ này dao động từ 98% - 100%, trong khi đó, ở nồng độ 10 mg/ml, tỷ lệ tế bào sống giảm xuống chỉ còn khoảng từ 73-79%, khác biệt hẳn với nhóm có nồng độ dƣới 5 mg/ml (p<0,05).
Tỷ lệ sống của các nhóm tế bào đƣợc thử với cao dịch chiết ethanol của tía tơ khơng có sự thay đổi nhiều với p>0,05. Tƣơng tự nhƣ vậy, khi thay đổi nồng độ cao dịch chiết methanol của tía tơ trên tế bào cũng khơng làm thay đổi nhiều về tỷ lệ sống (p<0,05), tuy nhiên, khác với cao dịch chiết ethanol, tỷ lệ tế bào sống chỉ khoảng 80% thì cao dịch chiết methanol đều cho tỷ lệ sống của tế bào trên 90% ở đa số các nồng độ đƣợc thử nghiệm. Từ các số liệu trên có thể xác định đƣợc giá trị LC50 của các cao dịch chiết, đáng chú ý, theo tính tốn, dịch chiết nƣớc của tía tơ có giá trị LC50 cao nhất trong tất cả các dịch chiết, lên tới 175,90±78,63 mg/ml.
Đối với dịch chiết dây gắm, có thể thấy loại dƣợc liệu có độc tính thấp với tế bào RAW246.7 trên cả 3 loại dung môi chiết. Cụ thể, dịch chiết với methanol, tỷ lệ tế bào sống chỉ đạt 39% ở nồng độ 10 mg/ml, sau đó tăng lên 55% ở nồng độ 5 mg/ml và 95% ở nồng độ 2,5 mg/ml. Dịch chiết với ethanol cũng tƣơng tự, chỉ có ~55% tế bào sống sau khi xử lý với dịch chiết nồng độ 10 mg/ml, cũng ở cùng nồng độ này, chỉ có 48% tế bào sống sau khi xử lý với dịch chiết nƣớc. Tuy nhiên, tỷ lệ tế bào sống đã tăng lên khi giảm nồng độ dịch chiết. Cụ thể, đối với dịch chiết với nƣớc, tỷ lệ tế bào sống tăng lên tới 91% khi giảm nồng độ xuống cịn 5 mg/ml. Tiếp tục phân tích kết quả cho thấy, giá trị LC50 của cao dịch chiết ethanol 80 của dây gắm rất cao, lên tới 122,95±20,52 mg/ml.
Các dịch chiết của thổ phục linh đều gây ra sự giảm mạnh về tỷ lệ sống của tế bào. Cụ thể, đối với dịch chiết nƣớc, các tế bào có tỷ lệ sống cao nhất là 84% ở nồng độ 2,5 mg/ml và thấp nhất ở nồng độ 5 mg/ml (64%). Đối với cao chiết ehtanol, tỷ lệ này cũng chỉ duy trì trong khoảng từ 73%-88% và chỉ đạt giá trị cao nhất đến 99% ở nồng độ 1,25 mg/ml. Đáng chú ý, dịch chiết với nƣớc của thổ phục linh có giá trị LC50 rất cao, lên đến 156,26±50,61 mg/ml, đồng thời, cao chiết ethanol cũng có LC50 lên đến 87,80±8,38 mg/ml.
Ở các mẫu dịch chiết dâu, kết quả cho thấy, ở dịch chiết với nƣớc, khi giảm nồng độ dịch chiết sử dụng, lƣợng tế bào sống cũng đồng thời giảm theo, từ 100% xuống còn 36% khi giảm nồng độ từ 10 mg/ml xuống 0,625 mg/ml, xu hƣớng này khác hẳn với tất các dịch chiết của các dƣợc liệu đƣợc sử dụng trong nghiên cứu này. Ở cao chiết ethanol, tỷ lệ sống của tế bào tăng dần theo chiều giảm nồng độ dịch chiết sử dụng, từ 54% lên đến cao nhất là 100%. Từ các tính tốn sau đó, giá trị LC50 của các dịch chiết nƣớc và cao chiết ethanol của dâu tằm cũng khá cao, lần lƣợt là 16,89±9,06 mg/ml và 114,88±1,18 mg/ml (Hình 18). Từ thí nghiệm này, có thể thấy đa số các cao chiết của các loại dƣợc liệu đƣợc chọn đều ít gây độc trên tế bào với giá trị LC50 lớn hơn 10 mg/ml, ngoại trừ cao chiết của dâu tằm với nƣớc và cao chiết ethanol của thổ phục linh.
Từ kết quả đánh giá khả năng chống oxi hóa và độc tính trên tế bào RAW 264.7, nhóm nghiên cứu đã chọn lựa các cao chiết và nồng độ phù hợp để tiếp tục thử nghiệm trên mơ hình tế bào và chuột, cụ thể gồm cao chiết tía tơ với nƣớc, ethanol; cao chiết dây gắm với nƣớc và ethanol 80%.