CHƢƠNG 2 ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2. Phương pháp nghiên cứu
2.2.3. Phương pháp xác định một số tính chất đất
Sử dụng các phương pháp phân t ch phổ dụng trong phịng thí nghiệm để xác định các chỉ tiêu sau:
pH (H2O): xác định bằng máy đo pH Meter, chiết mẫu bằng nước cất với tỉ lệ đất: nước là 1: 2,5 (TCVN 5979:2007).
Độ ẩm: xác định theo phương pháp khối lượng (TCVN 4048:2011).
Hàm lượng C tổng số: Phương pháp Walkley – Black (TCVN 8941:2011).
Hàm lượng N tổng số: Phương pháp Kjeldahl (TCVN 6498:1999).
Hàm lượng Al3+
tổng số: xác định bằng phương pháp quang phổ phát xạ nguyên tử (ICP – OES OPTIMA 7300V), phá mẫu theo TCVN 7370-1:2004.
Mật độ VSV tổng số:
- Chuẩn bị các bình tam giác chứa mơi trường thạch – nước thịt – pepton (Bảng 2.2), khử trùng bằng nồi hấp áp lực (autoclave) ở nhiệt độ 121oC trong 15 phút, sau đó phân phối vào các đĩa petri vô trùng, để yên trong 30 phút cho thạch đông.
Bảng 2.2. Thành phần môi trường nước thịt pepton
Hóa chất Hàm lượng (g/L) Cao thịt 3 Pepton 10 NaCl 5 Agar 15 pH 7,0
- Pha loãng các mẫu đất đã qua xử lý thành các mẫu có độ pha lỗng khác nhau bằng nước cất (10-2 đến 10-5).
- Nhỏ 0,1 ml dịch mẫu đã pha lỗng vào bề mặt của đĩa mơi trường và gạt đều.
- Nuôi cấy trong tủ ấm ở 30oC trong 2 ngày.
- Đếm số khuẩn lạc mọc trên các đĩa môi trường và xác định mật độ VSV tổng số theo công thức sau:
M (CFU/g) = C1 + ... + Ci n1Vf1 + ... + niVfi
M: số tế bào đơn vị hình thành khuẩn lạc) VSV trong 1 g đất tươi Ci: tổng số khuẩn lạc đếm được trên các đĩa đã chọn ở độ pha loãng i V: thể tích dịch mẫu (ml) cấy vào trong mỗi đĩa
fi: hệ số pha loãng tương ứng (10-1... 10-i).
ni: số lượng đĩa tương ứng với mỗi một hệ số pha loãng (1, 2, 3,...).