Cân 0,5 g bụi vào ống nghiệm thủy tinh 10 ml
+ 100 µL IS 100 ppb + 0,5 g Na2SO4 khan
Ly tâm, chuyển dịch chiết vào vial 15 ml
- Hoạt hóa: 5 mL DCM - Nạp mẫu và rửa giải trực tiếp dịch chiết Thổi khô N2 về thể tích 0,5 mL Lọc qua màng lọc 0,2 µm LC - MS/MS Chiết rắn - lỏng lặp lại 3 lần x 3 mL ACN
3.3. Xác nhận giá trị sử dụng của phƣơng pháp 3.3.1. Tính đặc hiệu, chọn lọc 3.3.1. Tính đặc hiệu, chọn lọc
Kết quả phân tích chất chuẩn, các mẫu trắng và các mẫu trắng thêm chuẩn để đánh giá tính đặc hiệu, chọn lọc của phƣơng pháp đƣợc trình bày tại bảng 3.10.
Bảng 3.10. Đánh giá tính đặc hiệu, chọn lọc
Mẫu phân tích
Thời gian lƣu (phút) Bias (%)
TCS 13TCS C12 TCC TCS TCS 13C12 TCC Chất chuẩn 7,58 7,57 7,35 0,3 0,3 0,0 Mẫu trắng thêm chuẩn 7,55 7,55 7,35
Mẫu trắng ND ND ND
Chú thích: ND = khơng phát hiện tín hiệu chất phân tích
Nhận xét: Độ chệch thời gian lƣu của chất chuẩn và mẫu thêm chuẩn có giá
trị từ 0 – 0,3%. Theo quy định của AOAC giá trị độ chệch của thời gian lƣu Bias ≤ 5%. Do đó, phƣơng pháp phân tích triclosan và triclocarban có độ chệch thời gian lƣu phù hợp quy định của AOAC, tính đặc hiệu, chọn lọc cao.
3.3.2. Kết quả xác định giới hạn phát hiện và giới hạn định lƣợng của phƣơng pháp pháp
Giới hạn phát hiện MDL đƣợc xem là nồng độ thấp nhất của chất phân tích mà hệ thống phân tích cịn cho tín hiệu phân tích khác có nghĩa với tín hiệu của mẫu trắng hay tín hiệu nền [3].
Giới hạn định lƣợng MQL đƣợc xem là nồng độ thấp nhất mà hệ thống phân tích định lƣợng đƣợc với tín hiệu phân tích khác có ý nghĩa định lƣợng với tín hiệu của mẫu trắng hay tín hiệu nền. Theo lí thuyết thống kê hóa phân tích thì MQL = 3,33 MDL [3].
Để xác định giới hạn định lƣợng MQL, chúng tôi thêm chuẩn trên nền mẫu trắng ở mức nồng độ gần với giới hạn phát hiện của thiết bị. Đối với triclosan là 10 ng/g, với triclocarban là 1 ng/g.
Kết quả thí nghiệm xác định giới hạn định lƣợng của phƣơng pháp đƣợc thể hiện qua sắc ký đồ dƣới đây.