Chƣơng 1 : TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.5. Sự hoạt hóa yếu tố đơng máu IX
Để yếu tố đông máu IX (protein FIX) trở thành một protease chức năng trong q trình đơng máu, đoạn peptide hoạt hóa phải được loại bỏ khỏi chuỗi polypeptide của protein FIX tiền chất. Phân tử protein FIX có thể được hoạt hóa trở thành dạng protease (protein FIXaβ) bởi phức hợp TF/FVIIa hoặc FXIa (dạng hoạt hóa của yếu tố XI) cùng với sự có mặt của màng phospholipid và ion Ca2+ [27]. Sự hoạt hóa này liên quan đến sự thủy phân các liên kết peptide trong phân tử protein FIX tiền chất tại hai vị trí liên kết: Arg145-Ala146 và Arg180-Val181, đồng thời giải phóng một đoạn peptide hoạt hóa (35 acid amin) (Hình 13) [27].
Hình 13. Các con đường hoạt hóa yếu FIX [67].
Phân tử protein FIX được hoạt hóa bởi FXIa (phản ứng 5), TF-FVIIa (phản ứng 1 và 2) và RVV (phản ứng 3 và 4). Sau khi peptide hoạt hóa (AP) được loại bỏ, chuỗi nhẹ (LC) và chuỗi nặng (HC) được gắn kết với nhau bởi các liên kết disulfide đơn.
Sự hoạt hóa protein FIX bằng phức hệ TF/FVIIa xảy ra theo con đường ngoại sinh và cần có sự có mặt của màng phospholipid và ion Ca2+ [42]. Phản ứng này xảy ra trên bề mặt của các tế bào mang yếu tố mơ (TF) và cũng cần đến sự có mặt của vùng Gla chức năng trong phân tử protein FIX tiền chất. Trong cơ chế này, đầu tiên phần tử protein FIX được thủy phân tại vị trí liên kết Arg145-Ala146 tạo thành dạng trung gian FIXα. Sau đó, liên kết peptide tại vị trí Arg180
-Val181 mới được thủy phân tiếp, được thể hiện qua phản ứng (1) và (2) trong Hình 13. Kết quả của việc hoạt hóa này tạo ra protein FIXaβ có khối lượng khoảng 46 kDa, bao gồm một chuỗi nhẹ có khối lượng phân tử khoảng 18 kDa và một chuỗi nặng có khối lượng khoảng 28 kDa, hai chuỗi này được liên kết với nhau bằng các liên kết disulfide. Chuỗi nhẹ được tạo ra từ đầu amino acid của phân tử tiền chất, có trình tự đầu amino acid Tyr-Asn-Ser-Gly-Glu, bao gồm các vùng như Gla, EGF1, EGF2.
Trong khi đó, chuỗi nặng được sản sinh từ đầu carboxyl của phân từ tiền chất, có trình tự đầu amino acid Val-Val-Gly-Gly-Glu và chỉ chứa một vùng serine protease.
Cơ chế hoạt hóa yếu tố đơng máu IX bởi FXIa cũng theo phương thức tương tự như với phức hệ TF/FVIIa. Phản ứng hoạt hóa này xảy ra ở pha lỏng của mạch máu mà không phải trên bề mặt của các tế bào như các phản ứng khác của q trình đơng máu. Tuy nhiên, gần đây đã có những bằng chứng chỉ ra rằng phản ứng này lại xảy ra trên chính bề mặt của những tế bào tiểu cầu hoạt hóa, liên quan tới một loại protein đặc hiệu bề mặt của tế bào tiểu cầu, chứ không chỉ đơn thuần màng phospholipid. Một số dữ liệu gần đây còn chỉ ra sự thủy phân cả hai vị trí liên kết peptide trong phân tử tiền chất để hoạt hóa protein FIX thành protein FIXaβ mà không tạo ra dạng trung gian FIXα như sự hoạt hóa protein FIX bởi phức hệ TF/FVIIa [62], phản ứng (5) trong Hình 13.
Yếu tố đơng máu IX cũng được hoạt hóa bởi một protease được chiết suất từ lọc rắn Russell (Russell’s viper venom – RVV). Enzyme này khởi đầu bằng việc thủy phân liên kết peptide Arg180
-Val181 để tạo ra dạng trung gian FIXaα, phản ứng (3), Hình 13. Yếu tố trung gian này bao gồm một chuỗi nặng và một chuỗi nhẹ, hai chuỗi này liên kết với nhau bằng các liên kết đơn disulfide và chất trung gian có trọng lượng bằng với trọng lượng của tiền chất FIX (57 kDa). Phân tử trung gian này cũng có hoạt tính giống với hoạt tính của FIXaβ, có hoạt tính bằng 20% hoạt tính của FIXaβ chức năng [45]. Sau đó, dạng trung gian FIXaα được chuyển hóa thành protein FIXaβ bởi yếu tố FVIIa và FXIa (phản ứng (4), Hình 13).