Hăm lượng chất khô của câc mẫu giống bí đỏ nghiín- 123docz.net

Bảng 3.9 Câc tổ hợp lai bí đỏ tạo quần thể lai theo hướng

3.11. Hăm lượng chất khô của câc mẫu giống bí đỏ nghiín cứu

Qua hình 3.10 cho thấy phần lớn câc mẫu giống có hăm lượng chất khô theo nằm trong khoảng từ 6-10% chiếm tỉ lệ 62,12% (82 mẫu giống) điển hình lă Bí đỏ tẻ (SĐK3634), Cắm quạ (SĐK5355), Bí đỏ (SĐK7534); nhóm

có hăm lượng chất khô thấp < 6% gồm 29 mẫu giống (chiếm 38,28%) điển hình lă Bí đỏ (SĐK3726) (4,0%), Xĩng to (SĐK7546) (4,0%), Mê ức (SĐK8385) (4,7%), Mạc ức kho (SĐK8393)(5,2%); nhóm có hăm lượng chất khô cao từ 10% gồm 21 mẫu giống (chiếm 15,9%) trong đó có 4 mẫu giống có hăm lượng chất khô cao (>13%) gồm: bí đỏ gâo (SĐK3630) (13,3%), Bí đỏ quả dăi (SĐK6916) (13,5%), Nhum xí (SĐK8387) (19%), Lăng quâ (SĐK19291) (13,5%).

-carotene lă tiền tố của vitamin A, khi văo cơ thể sẽ chuyển thănh vitamin A tham gia văo quá trình thị giác, bín cạnh đó còn tham gia văo câc quâ trình trao đổi protein, lipid, glucid vă muối khoáng. Khi thiếu vitamin A sẽ giảm tích lũy protein ở gan vă ngừng tổng hợp albumin ở huyết thanh. Thiếu vitamin A còn tăng hiện tượng tạo sỏi thận vă giảm kali ở nhiều cơ quan khác, một phđn tử -carotene sẽ cho ra hai phđn tử vitamin A. Như vậy,

-carotene được biết đến vớ i vai trò rất quan trọng cho cơ thể, những nghiín cứu gần đđy cho thấy - carotene còn lă tác nhđn chống lại các tế băo ung thư, chất độc do tia tử ngoại. Đối với việc sửa chữa các tổn thương do tia tử ngoại,

-carotene còn có tác dụng tốt hơn cả vitamin A (Gerardus & Grubben, 2004 [48]; Christophe Wiart, PharmD, PhD, 2012) [31].

Kết quả đânh giâ cho thấy câc mẫu giống nghiín cứu có hăm lượng β- carotene ở mức trung bình (5-10 µg/g) chiếm 81,1%. Câc mẫu giống có hăm lượng β-carotene ở mức thấp (< 5 µg/g) 23,5%. Còn lại 13 mẫu giống ở mức khâ (10 - 15 µg/g) chiếm 9,8% vă 2 mẫu giống có hăm lượng ở mức cao (>15 µg/g) chiếm tỷ lệ 1,5% lă câc mẫu giống có SĐK 15164 vă SĐK 3722.

Hăm lượng vitamin C của câc mẫu giống bí đỏ nghiín cứu biến động từ 1,4 - 19,1 mg/100g; đa số câc mẫu giống bí đỏ (57,6%) có hăm lượng vitamin C ở mức khâ (5 - 10 mg/100g), 40,1% câc mẫu giống đạt mức thấp (<5 mg/100g).

Kết quả đânh giâ hăm lượng Vitamin C thể hiện ở Bảng 3.4 vă Hình 3.15 cho thấy: có 53 mẫu (chiếm tỷ lệ 40,1%) có hăm lượng vitamin C mức <5 mg/100g; 67 mẫu giống (chiếm tỷ lệ 50,8%) có hăm lượng vitamin C ở mức 5 -

10 mg/100g; 10 mẫu giống (chiếm tỷ lệ 7,6%) đạt mức 10 - 15 mg/100g vă chỉ có có 2 mẫu giống (chiếm tỷ lệ 1,5%) có hăm lượng vitamin C ở mức rất cao (>15 mg/100g) lă hai mẫu giống bí đỏ SĐK 7955 (19,1 mg/100 g) vă SĐK 8396 (17,7 mg/100 g), tương đương câc giống bí đỏ F1-LTP 868 [17] hoặc giống bí nhập nội của Hăn Quốc như các giống TN220, Season opener [5].

3.1.4. Xâc định một số mẫu giống bí đỏ triển vọng sử dụng lăm vật liệu chọn tạo giống vă giới thiệu sản xuất theo hướng hăm lượng chất khô, chọn tạo giống vă giới thiệu sản xuất theo hướng hăm lượng chất khô, năng suất cao.

Kết quả nghiín cứu đânh giâ đặc điểm nông sinh học của tập đoăn 132 mẫu giống bí đỏ; phđn tích đa dạng di truyền của nguồn gen, phđn nhóm câc mẫu giống theo tính trạng hình thâi nông học, năng suất vă phđn tích chất lượng câc mẫu giống lă cơ sở để lựa chọn tạo vật liệu khởi đầu trong nghiín cứu chọn tạo giống vă khai thâc phât triển nguồn gen có hăm lượng chất khô, năng suất cao để phục vụ cho câc nghiín cứu tiếp theo vă giới thiệu cho sản xuất.

Qua kết quả đânh giâ đặc điểm nông sinh học của tập đoăn bí đỏ đê cho thấy câc mẫu giống bí đỏ biểu hiện tốt ở tính trạng năy nhưng lại biểu hiện bình thường ở tính trạng khâc. Do vậy, nhằm tuyển chọn câc mẫu giống bí đỏ đồng thời có năng suất cao vă câc tính trạng về chất lượng phù hợp, trong nghiín cứu đê sử dụng chương trình chọn lọc, version 1.0 của Nguyễn Đình Hiền (1996), dựa trín chỉ tiíu: Năng suất thực thu, hăm lượng chất khô, độ brix, hăm lượng β-caroten vă hăm lượng vitamin C; với câc tiíu tiíu chuẩn chọn lọc như sau: mẫu giống có năng suất ≥ 15,00 tấn/ha, hăm lượng chất khô (%) ≥ 7,5, độ brix (%) ≥ 5,9, hăm lượng β-caroten µg/g) ≥ 8,6 vă hăm lượng vitamin C ≥ 2,50. Năm chỉ tiíu đưa văo chương trình chọn dòng, trong đó có 3 chỉ tiíu (độ brix, hăm lượng β-caroten vă vitamin C) không ưu tiín với hệ số = 1; 2 chỉ tiíu ưu tiín với hệ số = 10 lă năng suất thực thu vă hăm lượng chất khô.. Căn cứ văo chỉ tiíu tổng hợp để chọn ra câc mẫu giống gần nhất so với mục tiíu đê đặt ra dựa theo khoảng câch Euclide (khoảng câch năy không tính đến mối quan hệ giữa câc chỉ tiíu). Kết quả đê chọn được 14/132 mẫu giống bí đỏ đâp ứng được câc tiíu chí chọn lọc níu trín, được trình băy tại Bảng 3.5 vă Phụ lục 7.

Bảng 3.5. Kết quả chọn lọc 14 mẫu giống bí đỏ có triển vọng theo chương trình chọn dòng (Selection Index) TT SĐK Chỉ số Năng suất quả (tấn/ha) Chất khô (%) Độ Brix (%) β- carotene (µg/g) Vitamin C (mg/100g) 1 8387 12,33 15,70 19,00 6,30 9,20 3,50 2 5357 12,35 16,10 11,20 5,90 9,70 5,10 3 15113 12,62 15,20 13,00 11,20 8,60 8,10 4 3630 12,76 15,00 13,30 9,90 9,40 8,90 5 5354 12,90 17,70 7,90 8,20 14,30 3,70 6 15156 13,33 15,20 11,60 6,40 9,20 4,10 7 8392 13,60 15,70 9,70 9,10 9,80 5,00 8 3633 13,68 15,70 9,50 9,40 13,90 10,10 9 8396 13,70 15,10 11,30 10,80 9,60 17,70 10 3722 14,18 16,00 8,80 8,50 21,60 8,30 11 16379 14,29 15,20 9,80 7,00 9,00 3,40 12 3826 14,51 15,70 8,30 8,70 9,30 8,90 13 9294 14,55 15,40 9,00 8,10 14,45 3,20 14 6742 14,86 16,20 7,50 6,60 13,90 2,50

Trong đó số đăng ký (SĐK) tại Ngđn hăng gen, tín giống vă địa điểm thu thập như sau:

TT Số đăng ký Tín giống Địa điểm thu thập

1 8387 Nhúm xí Sơn La

2 5357 Bí đỏ Yín Bâi

3 15113 Nông tđu đằng Điện Biín

4 3630 Bí đỏ gâo Thâi Nguyín

5 5354 Că đĩng nú Lạng Sơn

6 15156 Pe ơ Lai Chđu

7 8392 Plảy xĩng Sơn La

8 3633 Qủa nhậm lă Bắc Cạn

9 8396 Pin tô Sơn La

10 3722 Bí đỏ Quảng Ninh

11 16379 Nông lăng qua Lăo Cai

12 3826 Bí đỏ Sơn La

13 9294 Qua đeng Bắc Giang

Đânh giâ tổng hợp câc chỉ tiíu về đặc điểm nông sinh học chính, về năng suất thực thu, hăm lượng chất khô, độ brix, hăm lượng β-carotene (µg/g) vă hăm lượng vitamin C của 14 mẫu giống bí đỏ triển vọng, ưu tiíu tiíu chí năng suất thực thu vă hăm lượng chất khô cao cho thấy hăm lượng chất khô cao nhất lă mẫu giống Nhum xí (SĐK 8387), thu thập tại Sơn La, có năng suất cao >15 tấn/ha, hăm lượng chất khô cao nhất đạt 19,0% có số điểm được xếp ưu tiín số 1, số 2 lă mẫu giống Bí đỏ gâo có SĐK 3630, thu thập Thâi Nguyín; xếp số 3 lă mẫu giống Nông tđu đằng có SĐK 15113, thu thập Điện Biín; tiếp đến lă mẫu giống Nông Pe ơ - SĐK 15156, thu thập Lai Chđu xếp thứ 4; mẫu giống Pin tô, SĐK 8396, thu thập tại Sơn La xếp thứ 5; số 6 lă mẫu giống 5357, thu thập tại Yín Bâi, tiếp đến lă mẫu giống Nông lăng qua SĐK 16379, thu thập Lăo Cai; SĐK 8392 - Plảy xĩng, thu thập Sơn La; SĐK – 3633 Quả nhậm lă, thu thập Bắc Cạn; SĐK 9294 – Qua đeng, thu thập Bắc Giang lần lượt xếp thứ tự 7, 8, 9, 10 đều có năng suất cao > 15 tấn/ha, ưu tiín chỉ số hăm lượng chất khô; 02 mẫu giống Bí đỏ SĐK 3722 thu thập ở Quảng Ninh vă SĐK 3826, thu thập Sơn La xếp thứ 11 vă 12 đều có năng suất thực thu cao vă hăm lượng chất khô vă 8,8 % vă 8,3 %; xếp cuối lă 02 mẫu giống đều thu thập ở Lạng Sơn lă Că đĩng nú, SĐK 5354 vă SĐK 6742 – Bí đỏ nếp đứng thứ 13 vă 14 có hăm lượng chất khô cao > 7,0 %. Câc mẫu giống bí đỏ năy sẽ lă nguồn vật liệu tiềm năng cho nghiín cứu chọn tạo giống vă phât triển bí đỏ năng suất vă chất lượng cao ở Việt Nam (Bảng 3.6).

Bảng 3.6. Thông tin của 14 mẫu giống bí đỏ địa phương được tuyển chọn TT Số đăng TT Số đăng

ký Tín mẫu giống Thu thập Năng suất (tấn/ha) Hăm lượng chất khô (%) Độ Brix (%) β-carotene (µg/g) VitaminC (mg/100g) 1 8387 Nhúm xí Sơn La 15,7 19,0 6,3 9,15 3,5

2 3630 Bí đỏ gâo Thâi Nguyín 15,0 13,3 9,90 9,4 8,9

3 15113 Nông tđu đằng Điện Biín 15,2 13,0 11,2 8,6 8,1

4 15156 Pe ơ Lai Chđu 15,2 11,6 6,40 9,2 4,1

5 8396 Pin tô Sơn La 15,1 11,3 10,8 9,6 17,7

6 5357 Bí đỏ Yín Bâi 16,1 11,2 5,9 9,71 5,1

7 16379 Nông lăng qua Lăo Cai 15,2 9,8 7,0 8,96 3,4

8 8392 Plảy xĩng Sơn La 15,7 9,7 9,1 9,83 5,0

9 3633 Qủa nhậm lă Bắc Cạn 15,7 9,5 9,4 13,90 10,1

10 9294 Qua đeng Bắc Giang 15,4 9,0 8,1 14,45 3,2

11 3826 Bí đỏ Sơn La 15,7 8,3 8,7 9,26 8,9

12 3722 Bí đỏ Quảng Ninh 16,0 8,8 8,5 21,50 8,3

13 5354 Că đĩng nú Lạng Sơn 17,7 7,9 8,2 14,26 3,7

Câc mẫu giống triển vọng trín đđy sẽ được sử dụng lăm vật liệu lai tạo cho nghiín cứu xâc định chỉ thị liín kết với hăm lượng chất khô.

3.2. Kết quả đânh giâ đa dạng di truyền câc mẫu giống bí đỏ sử dụng chỉ thị phđn tử thị phđn tử

3.2.1. Kết quả tâch chiết vă tinh sạch ADN tổng số

Trong nghiín cứu năy 132 mẫu giống bí đỏ được tiến hănh tâch chiết ADN sử dụng CTAB của Doyle et al., (1987)[43]. Mẫu ADN của 132 mẫu

giống bí đỏ nghiín cứu được điện di vă kiểm tra mẫu trín gel agarose 1% vă nồng độ được đo bằng mây quang phổ nanodrop ở bước sóng OD260/OD280.

Hình 3.12. Kết quả điện di ADN tổng số của 132 mẫu giống bí đỏ nghiín cứu trín gel agarose 1%

Ghi chú: Số ghi trín bản gel lă kí hiệu số đăng ký của câc mẫu giống bí

Kết quả điện di ADN Hình 3.12 cho thấy câc mẫu ADN tổng số thu được đều nguyín vẹn, độ tinh sạch nằm trong khoảng từ 1,8 đến 2,0 vă có nồng độ của ADN khâ cao từ 150 ng/µl - 320ng/µl, hoăn toăn đâp ứng được yíu cầu cho phản ứng nhđn gen PCR trong câc nghiín cứu tiếp theo.

3.2.2. Đânh giâ sự đa hình của câc chỉ thị SSR với tập đoăn bí đỏ nghiín cứu nghiín cứu

Để đânh giâ đa dạng di truyền của 132 mẫu giống bí đỏ, nghiín cứu đê sử dụng 48 cặp mồi SSR trín hệ genome bí đỏ. Tổng số thu được 6.336 phản ứng PCR.

Kết quả phđn tích 48 locut SSR trín tập đoăn 132 mẫu giống bí đỏ cho thấy sản phẩm PCR lă câc băng có kích thước nằm trong khoảng 70-239 bp. Tại mỗi locut, kích thước câc alen thu được đối với câc mẫu giống nghiín cứu từ 70 bp (ở chỉ thị CMTp107) cho đến 239 pb (ở chỉ thị CMTm161) (Hình 3.13).

Hình 3.13. Biến động kích thước alen tại câc locut SSR nghiín cứu

Tổng số alen được phât hiện tại 48 locut lă 126 alen. Số alen đa hình tại mỗi locut biến động từ 2 alen (CMTp131) đến 6 alen (CMTp176), trung bình

đạt 2,63 alen/locut. Có 14 cặp mồi cho 3 alen (CMTp127, CMTp138, CMTm183, CMTm259, CMTmC67, CMTmC34, CMTm131, CMTp210, CMTp247, CMTm206, CMTp46, CMTp236, CMTm107, CMTm84); có 3 cặp mồi cho 4alen (CMTp182, CMTp193, CMTm252), có 2 cặp mồi cho 5 alen (CMTm232, CMTm120) vă 1 cặp mồi (CMTp176) cho 6 alen.

Trong số 48 chỉ thị SSR sử dụng trong nghiín cứu có 10 chỉ thị xuất hiện alen đặc trưng ở 10 mẫu giống bí đỏ. Câc alen đặc trưng đê phât hiện sẽ giúp nhận dạng câc mẫu giống trín nhờ xuất hiện câc băng ADN có kích thước khâc nhau được thể hiện ở hình 3.15 đến 3.24.

Chỉ thị CMTp127 nhận dạng Bí đỏ (SĐK 3826 - thu thập Sơn La, NSTT đạt 15,7, hăm lượng chất khô lă 14,0%, thịt quả có mău cam đậm, khối lượng quả trung bình) (Hình 3.14).

Hình 3.14. Hình ảnh nhận dạng kiểu gen của một số mẫu giống bí đỏ bằng chỉ thị CMTp127 trín gel polyacrylamide 8%