Chương 2 : VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2. Hóa chất thiết bị và địa điểm nghiên cứu
2.2.1. Hóa chất
Sử dụng các loại hóa chất tinh khiết và thông dụng có nguồn gốc từ Anh, Đức, Mỹ, Thụy Điển, Trung Quốc:
- Hóa chất tách DNA tổng số: gồm có đệm tách (Tris HCl 1M, PH=8,NACl 5M, EDTA 0,5M, CTAB 4% H2O), đệm rửa (Tris HCl 1M , EDTA 0,5M, PH=8, Sobitol 2M, NaH2PO4 0,4%, H2O), dung dịch chloroform/isoamyl ancolhol 24:1, dung dịch Isopropanol,...
- Hóa chất điện di: Đệm TAE 50X: 57,1 ml CH3COOH, 100ml 0,5M EDTA, 242g TRIS- BASE, đệm TAE 1X, agarose, loading dye, ethidium bromide.
- Các hóa chất phục vụ nhân gen: Taq polymerase do hãng Fermentas cung cấp. Cặp mồi đặc hiệu được thiết kế dựa trên trình tự gen IFS2 đã được công bố trên ngân hàng gen quốc tế với mã số NM001249093.
- Hóa chất dùng trong biến nạp: Vector tách dòng pBT của Viện Công nghệ Sinh học, môi trường LB, xgal, IPTG.
- Các bộ kit dùng cho phản ứng PCR QIAquick Gel Extraction Kit, tinh sạch sản phẩm PCR AccuPrep PCR Purification Kit (Bioneer),…và một số hóa chất khác.
2.2.2. Thiết bị
Bảng 2.2. Danh mục các thiết bị đã sử dụng
STT Thiết bị Nguồn gốc, xuất xứ
1 Máy PCR Applied Biosystem - Mỹ
2 Bộ điện di Pharmacia Biotech, Scie-plas Ltd. - Anh 3 Bể ổn nhiệt Memmert - Đức
4 Máy ly tâm Thermo Sci Legend Micro 21R - Mỹ 5 Máy chụp ảnh gel Gel Logic Kodak 1500 - Mỹ
6 Máy lắc Vortex IKA Minishaker MS1 - Đức 8 Cân điện tử Precisa XB1200C - Đức
10 Máy cất nước Cascada Bio-Water - Pall Life - Mỹ/Anh 11 Máy đo quang phổ định lượng NanoDrop Lite Spectrophotometer - Mỹ 13 Tủ lạnh -20oC Sanyo - Nhật Bản
16 Tủ lạnh -4oC Sanyo - Nhật Bản 17 Máy lắc ấm Hàn Quốc
18 Bể ổn nhiệt BW-05G Jeiotech - Hàn Quốc
Cùng với các dụng cụ vô khuẩn cần thiết cho thí nghiệm bao gồm: Đĩa Petri, pipet, ống nghiệm, que cấy, que trang, bình tam giác, đèn cồn,…
2.2.3. Địa điểm nghiên cứu
Các thí nghiệm được thực hiện tại phòng thí nghiệm của Khoa Khoa học sự sống - Trường Đại học Khoa học - Đại học Thái Nguyên và Phòng Thí
nghiện trọng điểm Công nghệ gen, Phòng Công nghệ ADN ứng dụng - Viện Công nghệ Sinh học - Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam .