5.1. KẾT LUẬN
5.1.1. Hoàn thiện quy trình sản xuất vắc xin phòng hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn trên hệ thống chai roller với quy mô 100 lít kháng nguyên/mẻ.
- Nuôi cấy tế bào Marc-145 trên hệ thống chai roller tối ưu trong điều kiện không CO2 với lượng tế bào ra ban đầu là 1x105 Cells/ml, sau 72h cấy chuyển tế bào 1 lần và tốc độ lăn 0,2 đến 0,3 rpm.
- Liều gây nhiễm thích hợp nhất đối với virus hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp chủng KTY - PRRS - 01 trên môi trường nuôi cấy tế bào Marc - 145 là: 104 TCID50.
- Thời gian thu hoạch huyễn dịch virus PRRS thích hợp nhất, hàm lượng virus cao, chất lượng tốt là sau khi gây nhiễm virus 72 giờ.
- Bất hoạt, nhũ hóa vắc xin vô hoạt nhũ dầu phòng PRRS, sản xuất thành công 03 lô liên tiếp quy mô tối thiểu 20.000 liều/mẻ.
- Vắc xin vô hoạt phòng hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp được bất hoạt theo quy trình thích hợp bằng BEI tại nồng độ 1mM trong 24h tại 370C, hiệu giá virus trước khi bất hoạt 108 TCID50/ml và nhũ hóa bằng dầu khoáng ISA 201 VG. 5.1.2. Kiểm nghiệm vắc xin phòng hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn theo quy mô công nghiệp. Vắc xin sản xuất ra đạt chất lượng theo tiêu chuẩn TCVN 8685-13:2014.
- Vắc xin đạt cảm quan, không lắng cặn, không đông vón, màu trắng sữa - Vắc xin đạt yêu cầu vô trùng, không bị tạp nhiễm vi khuẩn và nấm mốc - Vắc xin đạt yêu cầu an toàn khi tiêm gấp 2 liều sử dụng
- Văc xin đạt yêu cầu hiệu lực khi đánh giá bằng cả 3 chỉ tiêu ELISA, IPMA và công cường độc.
5.2. KIẾN NGHỊ
- Tiến hành thử nghiệm vắc xin ngoài thực địa nhằm đánh giá hiệu lực việc sử dụng vắc xin vô hoạt phòng hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn.
- Đánh giá độ dài miễn dịch của lợn sau khi tiêm vắc xin, xác định thời gian tái chủng phù hợp.
- Nghiên cứu hạn sử dụng của vắc xin vô hoạt phòng hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp trong điều kiện lão hóa cấp tốc, điều kiện khắc nghiệt.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
I. Tài liệu tiếng Việt:
1. Bộ Khoa học Công nghệ (2014). TCVN 8685-13:2014 Quy trình kiểm nghiệm - phần 13: Vắc xin vô hoạt phòng bệnh hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn (PRRS). Việt Nam: 7.
2. Bộ Y Tế (2018). Nguyên tắc, tiêu chuẩn thực hành tốt sản xuất thuốc của tổ chức y tế thế giới. 35/2018/TT-BYT. B. Y. Tế.
3. Chăn nuôi Việt Nam. (2018). Thống Kê Chăn Nuôi Việt Nam 01/10/2018. Truy cập 20/03/2019, 2019 tại http://channuoivietnam.com/thong-ke-chan-nuoi/.
4. Cục Thú Y (2007). Báo cáo tình hình dịch bệnh trên lợn ở các tỉnh đồng bằng Sông Hồng.
5. Cục Thú Y (2018). Báo cáo tổng kết Cục thú y 2018.
6. Feng Y., T. Zhao, N. Tùng, K. Inui, Y. Ma, N. T. Hoa, Nguyễn Văn Cảm, D. Liu, Bùi Quang Anh, Tô Long Thành, C. Wang, K. Tian and G. F. Gao (2009). "Các biến chủng virus gây hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp tại Việt Nam và Trung Quốc năm 2007". Khoa học thú y. XVI (1).
7. Kamakawa A., Hồ Thị Viết Thu và S. Yamada (2006). "Epidemiological survey of viral diseases of pigs in the Mekong delta of Vietnam between 1999 and 2003." Vet Microbiol. 118(1-2).tr. 47-56.
8. Nguyễn Bá Hiên và Trần Thị Lan Hương (2010). Miễn Dịch Học Ứng Dụng. Nhà xuất bản nông nghiệp, Hà Nội.
9. Nguyễn Ngọc Tiến (2011). "Tình hình dịch lợn tai xanh (PRRS) ở Việt Nam và công tác phòng chống dịch". Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y. 1.tr. 18.
10. Nguyễn Lương Hiền và Ngô Thành Long., (2001). Bước đầu khảo sát hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở một số trại heo giống thuộc vùng thành phố Hồ Chí Minh. Báo cáo khoa học, phần chăn nuôi thú y 1999-2000.tr. 224-227.
11. Nguyễn Bá Hiên, Trần Xuân Hạt, Phạm Quang Thái, Hoàng Văn Năm., (2010). Công nghệ chế tạo và sử dụng vắc xin thú y. Nhà xuất bản Nông Nghiệp, Hà Nội. 12. Nguyễn Bá Hiên và Huỳnh Thị Mỹ Lệ (2013), Bệnh truyền nhiễm của động vật
nuôi và biện pháp khống chế. Nhà xuất bản Nông nghiệp, Hà Nội.
13. Nguyễn Thị Lan (2012). "Đặc điểm bệnh lý Hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp (PRRS) ở lợn con sau cai sữa và lợn choai và xác định bằng kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang". Tạp chí Khoa học Kỹ thuật thú y. 19 (3).
14. Phạm Văn Sơn (2018). Nghiên cứu tạo giống gốc và thử nghiệm sản xuất vacxin vô hoạt phòng hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn từ chủng virus phân lập tại việt nam. Luận án tiến sĩ, Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam.
15. Phạm Văn Sơn, Nguyễn Thị Lan, Nguyễn Văn Cảm và Nguyễn Bá Hiên (2017). "Nghiên cứu sự ổn định về một số đặc tính sinh học và sinh học phân tử của chủng virus KTY-PRRS-01 phân lập tại Việt Nam". Tạp chí Khoa học Nông nghiệp Việt Nam. 15(2).tr. 13.
16. Tô Long Thành và Nguyễn Văn Long (2007). “Hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp của lợn”, Khoa học kỹ thuật thú y." Khoa học kỹ thuật thú y. XIV (3).tr. 8. 17. Wiliam T, Christianson và H. S. Joo (2001). "Hội chứng sinh sản và hô hấp ở lợn-
Porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS)." Khoa học thú y. VIII (2).tr.74-87.
II. Tài liệu tiếng Anh:
18. Allende R., G. F. Kutish, W. Laegreid, Z. Lu, T. L. Lewis, D. L. Rock, J. Friesen, J. A. Galeota, A. R. Doster and F. A. Osorio (2000). "Mutations in the genome of porcine reproductive and respiratory syndrome virus responsible for the attenuation phenotype." Arch Virol 145(6). pp. 1149-1161.
19. An T.-Q., Z.-J. Tian, C.-L. Leng, J.-M. Peng and G.-Z. Tong (2011). "Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus, Asia."
20. Bahnemann H. G. (1990). "Inactivation of viral antigens for vaccine preparation with particular reference to the application of binary ethylenimine". Vaccine 8(4): 299-303. 21. Bautista E. M., S. M. Goyal, I. J. Yoon, H. S. Joo and J. E. Collins (1993).
"Comparison of porcine alveolar macrophages and CL 2621 for the detection of porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus and anti-PRRS antibody". J Vet Diagn Invest 5(2). pp. 163-165.
22. Beura L. K., S. N. Sarkar, B. Kwon, S. Subramaniam, C. Jones, A. K. Pattnaik and F. A. Osorio (2010). "Porcine reproductive and respiratory syndrome virus nonstructural protein 1beta modulates host innate immune response by antagonizing IRF3 activation". J Virol 84(3). pp. 1574-1584.
23. Bloemraad M., E. P. de Kluijver, A. Petersen, G. E. Burkhardt and G. Wensvoort (1994). "Porcine reproductive and respiratory syndrome: temperature and pH stability of Lelystad virus and its survival in tissue specimens from viraemic pigs". Vet Microbiol 42(4). pp. 361-371.
24. Burch R. A., E. E. Maso, P. R. Pujadas and N. S. Roca (1999). Attenuated strain of the virus causing the porcine reproductive respiratory syndrome (PRRS), and vaccines, Google Patents.
25. Chand R. J., B. R. Trible and R. R. Rowland (2012). "Pathogenesis of porcine reproductive and respiratory syndrome virus." Curr Opin Virol 2(3): 256-263. 26. Charerntantanakul W. (2012). "Porcine reproductive and respiratory syndrome
virus vaccines: Immunogenicity, efficacy and safety aspects." World journal of virology 1(1): 23.
27. Charerntantanakul W., R. Platt, W. Johnson, M. Roof, E. Vaughn and J. A. Roth (2006). "Immune responses and protection by vaccine and various vaccine adjuvant candidates to virulent porcine reproductive and respiratory syndrome virus". Vet Immunol Immunopathol. 109(1-2). pp. 99-115.
28. Collins J. (1991). "Newly recognized respiratory syndromes in North American swine herds." American Association of Swine Practitioners Newsletter 3(7): 7. 29. Collins J. E., D. A. Benfield, W. T. Christianson, L. Harris, J. C. Hennings, D. P.
Shaw, S. M. Goyal, S. McCullough, R. B. Morrison, H. S. Joo and et al., (1992). "Isolation of swine infertility and respiratory syndrome virus (isolate ATCC VR- 2332) in North America and experimental reproduction of the disease in gnotobiotic pigs." J Vet Diagn Invest 4(2). pp. 117-126.
30. De Lima, M., A. K. Pattnaik, E. F. Flores and F. A. Osorio (2006). "Serologic marker candidates identified among B-cell linear epitopes of Nsp2 and structural proteins of a North American strain of porcine reproductive and respiratory syndrome virus". Virology 353(2). pp. 410-421.
31. Delrue I., P. L. Delputte and H. J. Nauwynck (2009). "Assessing the functionality of viral entry-associated domains of porcine reproductive and respiratory syndrome virus during inactivation procedures, a potential tool to optimize inactivated vaccines". Veterinary research 40(6). pp. 1-15.
32. Duan, X., H. J. Nauwynck and M. B. Pensaert (1997). "Virus quantification and identification of cellular targets in the lungs and lymphoid tissues of pigs at different time intervals after inoculation with porcine reproductive and respiratory syndrome virus (virus PRRS)." Vet Microbiol 56(1-2). pp. 9-19.
34. Feng Y., T. Zhao, T. Nguyen, K. Inui, Y. Ma, T. H. Nguyen, V. C. Nguyen, D. Liu, Q. A. Bui, L. T. To, C. Wang, K. Tian and G. F. Gao (2008). "Porcine respiratory and reproductive syndrome virus variants, Vietnam and China, 2007". Emerg Infect Dis 14(11). pp. 1774-1776.
35. Goyal S. M. (1993). "Porcine reproductive and respiratory syndrome." J Vet Diagn Invest 5(4). pp. 656-664.
36. Gulyaeva A., M. Dunowska, E. Hoogendoorn, J. Giles, D. Samborskiy and A. E. Gorbalenya (2017). "Domain Organization and Evolution of the Highly Divergent 5' Coding Region of Genomes of Arteriviruses, Including the Novel Possum Nidovirus." J Virol 91(6).
37. Halbur P. G., P. S. Paul, M. L. Frey, J. Landgraf, K. Eernisse, X. J. Meng, J. J. Andrews, M. A. Lum and J. A. Rathje (1996). "Comparison of the antigen distribution of two US porcine reproductive and respiratory syndrome virus isolates with that of the Lelystad virus". Vet Pathol 33(2). pp. 159-170.
38. Halbur P. G., P. S. Paul, M. L. Frey, J. Landgraf, K. Eernisse, X. J. Meng, M. A. Lum, J. J. Andrews and J. A. Rathje (1995). "Comparison of the pathogenicity of two US porcine reproductive and respiratory syndrome virus isolates with that of the Lelystad virus." Vet Pathol 32(6). pp. 648-660.
39. Keffaber K (1989). "Reproductive failure of unknown etiology." American Association of Swine Pracitioners Newletter 1: 10.
40. Kim H. S., J. Kwang, I. J. Yoon, H. S. Joo and M. L. Frey (1993). "Enhanced replication of porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus in a homogeneous subpopulation of MA-104 cell line." Arch Virol 133(3-4). pp. 477-483. 41. Kim H., H. K. Kim, J. H. Jung, Y. J. Choi, J. Kim, C. G. Um, S. B. Hyun, S. Shin, B. Lee, G. Jang, B. K. Kang, H. J. Moon and D. S. Song (2011). "The assessment of efficacy of porcine reproductive respiratory syndrome virus inactivated vaccine based on the viral quantity and inactivation methods." Virol J 8: 323.
42. Kimman T. G., L. A. Cornelissen, R. J. Moormann, J. M. Rebel and N. Stockhofe- Zurwieden (2009). "Challenges for porcine reproductive and respiratory syndrome virus (VIRUS PRRS) vaccinology." Vaccine 27(28). pp. 3704-3718.
43. Labarque G., S. Van Gucht, K. Van Reeth, H. Nauwynck and M. Pensaert (2003). "Respiratory tract protection upon challenge of pigs vaccinated with attenuated porcine reproductive and respiratory syndrome virus vaccines." Vet Microbiol 95(3). pp. 187-197.
44. Lee J. A., B. Kwon, F. A. Osorio, A. K. Pattnaik, N. H. Lee, S. W. Lee, S. Y. Park, C. S. Song, I. S. Choi and J. B. Lee (2014). "Protective humoral immune response induced by an inactivated porcine reproductive and respiratory syndrome virus expressing the hypo-glycosylated glycoprotein 5." Vaccine 32(29). pp. 3617-3622. 45. Lopez O. J. and F. A. Osorio (2004). "Role of neutralizing antibodies in VIRUS
PRRS protective immunity." Vet Immunol Immunopathol 102(3). pp. 155-163. 46. Loula T. (1991). "Mystery pig disease." Agri-Practice (USA).
47. Martelli P., P. Cordioli, L. G. Alborali, S. Gozio, E. De Angelis, L. Ferrari, G. Lombardi and P. Borghetti (2007). "Protection and immune response in pigs intradermally vaccinated against porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) and subsequently exposed to a heterologous European (Italian cluster) field strain." Vaccine 25(17). pp. 3400-3408.
48. Morrison R. B., J. E. Collins, L. Harris, W. T. Christianson, D. A. Benfield, D. W. Chladek, D. E. Gorcyca and H. S. Joo (1992). "Serologic evidence incriminating a recently isolated virus (ATCC VR-2332) as the cause of swine infertility and respiratory syndrome (SIRS)." J Vet Diagn Invest 4(2). pp. 186-188.
49. Murtaugh M. P., M. R. Elam and L. T. Kakach (1995). "Comparison of the structural protein coding sequences of the VR-2332 and Lelystad virus strains of the PRRS virus." Arch Virol 140(8). pp. 1451-1460.
50. Murtaugh M. P., Z. Xiao and F. Zuckermann (2002). "Immunological responses of swine to porcine reproductive and respiratory syndrome virus infection." Viral immunology 15(4). pp. 533-547.
51. OIE (2015). "Porcine reproductive and respiratory syndrome." (cited 2019 20/03/2019); Available from: http://www.oie.int/standard-setting/terrestrial-manual/access-online/ 52. Ostrowski M., J. A. Galeota, A. M. Jar, K. B. Platt, F. A. Osorio and O. J.
Lopez (2002). "Identification of neutralizing and nonneutralizing epitopes in the porcine reproductive and respiratory syndrome virus GP5 ectodomain ". J Virol 76(9). pp. 4241-4250.
53. Paton D. J., I. H. Brown, S. Edwards and G. Wensvoort (1991). "'Blue ear' disease of pigs." Vet Rec 128(26).pp. 617.
54. Paton D., I. Brown, S. Edwards and G. Wensvoort (1991). "'Blue ear' disease of pigs." Vet Rec 128(24). pp. 574.
55. Pileri E. and E. Mateu (2016). "Review on the transmission porcine reproductive and respiratory syndrome virus between pigs and farms and impact on vaccination." Vet Res 47(1).pp. 108.
56. Plagemann P. G. and V. Moennig (1992). "Lactate dehydrogenase-elevating virus, equine arteritis virus, and simian hemorrhagic fever virus: a new group of positive-strand RNA viruses." Adv Virus Res 41. pp. 99-192.
57. Rossow K. D. (1998). "Porcine reproductive and respiratory syndrome." Vet Pathol 35(1). pp. 1-20.
58. Shimizu M., S. Yamada, Y. Murakami, T. Morozumi, H. Kobayashi, K. Mitani, N. Ito, M. Kubo, K. Kimura, M. Kobayashi and et al., (1994). "Isolation of porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus from Heko-Heko disease of pigs." J Vet Med Sci 56(2). pp. 389-391.
59. Silva J., D. Rocha, I. Cunha, L. R. Sales, F. Neto, M. Fontes and J. Simões (2015). "Serological profile of offspring on an intensive pig farm affected by porcine reproductive and respiratory syndrome". Asian Pacific Journal of Reproduction 4(4). pp. 317-321.
60. Terpstra C., G. Wensvoort and J. M. Pol (1991). "Experimental reproduction of porcine epidemic abortion and respiratory syndrome (mystery swine disease) by infection with Lelystad virus: Koch's postulates fulfilled". Vet Q 13(3). pp. 131-136. 61. Terpstra C., G. Wensvoort and J. Pol (1991). "Experimental reproduction of porcine
epidemic abortion and respiratory syndrome (mystery swine disease) by infection with Lelystad vims: Koch's postulates fulfilled". Veterinary Quarterly. 13(3). pp. 131-136. 62. Tian K., X. Yu, T. Zhao, Y. Feng, Z. Cao, C. Wang, Y. Hu, X. Chen, D. Hu and
X. Tian (2007). "Emergence of fatal VIRUS PRRS variants: unparalleled outbreaks of atypical PRRS in China and molecular dissection of the unique hallmark". PloS one 2(6): e526.
63. Tong G. Z., Y. J. Zhou, X. F. Hao, Z. J. Tian, T. Q. An and H. J. Qiu (2007). "Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome, China". Emerg Infect Dis 13(9). pp. 1434-1436.
64. Vet Rec (1992). "Porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS or blue- eared pig disease)". Vet Rec 130(5). pp. 87-89.
65. Wensvoort G., C. Terpstra, J. M. Pol, E. A. ter Laak, M. Bloemraad, E. P. de Kluyver, C. Kragten, L. van Buiten, A. den Besten, F. Wagenaar and et al., (1991). "Mystery swine disease in The Netherlands: the isolation of Lelystad virus". Vet Q 13(3). pp. 121-130.
66. White,M. (1991). "'Blue ear'disease of pigs." Veterinary Record (United Kingdom). 67. WHO (1992). Good Maunfacturing practices for biological products, WHO. (cited
2019 20/03/2019); Available from:
https://www.who.int/biologicals/areas/vaccines/Annex_2_WHO_Good_manufacturing_ practices_for_biological_products.pdf
68. WHO (2011). WHO good manufacturing practices for sterile pharmaceutical products. (cited 2019 20/03/2019); Available from: http://www.who.int
/medicines/services/expertcommittees/pharmprep/GMP-Sterile_QAS09295.pdf 69. WHO (2014). WHO good maunfacturing practices for pharmaceutical products:
Main principles. (cited 2019 20/03/2019); Available from:
https://www.who.int/medicines/areas/quality_safety/quality_assurance/GMPPhar maceuticalProductsMainPrinciplesTRS961Annex3.pdf
70. Yoo D., C. Song, Y. Sun, Y. Du, O. Kim and H. C. Liu (2010). "Modulation of host cell responses and evasion strategies for porcine reproductive and respiratory syndrome virus". Virus Res 154(1-2).pp. 48-60.