Vùng siêu tới hạn
2.2.6.1 Các phương pháp sắc ký
Phân tích thành phần concrete và tinh dầu bằng sắc ký khí- khối phổ (GC-MS)
Các mẫu tinh dầu và concrete được phân tích thành phần hóa học trên cùng một thiết bị và điều kiện phân tích, sử dụng máy sắc ký khí kết nối khối phổ Hewlett-Packard HP 5890 B với chương trình nhiệt độ được đặt bắt đầu ở
600C giữ ổn định 2 phút sau đó tăng dần lên với gradient nhiệt độ 40C /phút
đạt tới nhiệt độ cuối 2800C và giữ ổn định trong 10 phút.
Khối phổ theo phương pháp ion hóa EI, sử dụng dòng electron với năng
lượng 70 eV, thời gian quét 1s và khoảng đơn vị khối lượng từ 41-425 m/z.
Kết quả khối phổ của các thành phần được đối chiếu so sánh trên cơ sở các ngân hàng dữ liệu Wiley và e-NIST.
- GC: HP 5890 Series II - Cột: HP 5 - T0injector: 2500C - T0detector: 2800C - Detector: MS HP 5989B - T0đầu: 600C - T0cuối: 2800C
- Thời gian chạy: 56 phút
- Khí mang He
Phương pháp sắc ký lớp mỏng-Thin layer chromatography (TLC)
Phân tích các thành phần của SCO2 concrete bằng sắc ký lớp mỏng (TLC) trên các bản mỏng tráng sẵn DC-Alufolien 60F254 dày 0,25 mm, kích thước hạt 15μm của Merck. Các vệt chất được phát hiện nhờ dung dịch thuốc
thử MeOH/H2SO4 và anisaldehyt/H2SO4.
Thuốc thử MeOH/H2SO4: Dung dịch MeOH chứa 10-25% H2SO4.
Thuốc thử anisaldehyt/H2SO4: Trộn đều theo thứ tự 0,5ml anisaldehyt; 10ml axit axetic băng; 85ml MeOH và 5ml H2SO4 đậm đặc. Bảo quả trong lọ tối, u cầu dung dịch khơng có màu vàng nâu sẫm.
Trong hình 2.7 là kết quả TLC của mẫu concrete chiết bằng SCO2 với dung môi triển khai n-hexan/EtOAc = 9/1. Kích thước bản mỏng 6,5 cm × 2 cm. Thuốc hiện là MeOH/H2SO4, sau khi nhúng bản mỏng được hơ ở 1250C.
Hình 2.8 thể hiện kết quả TLC của các mẫu SCO2 concrete với dung môi triển khai n-hexan/DCM/Me2CO = 5/5/0,02 , phân đoạn A3 và 2 phân đoạn khác. Thuốc hiện là anisaldehyt/H2SO4 sau khi nhúng, bản mỏng được hơ ở
1250C.
Hình 2.7 TLC mẫu SCO2 concrete;
Hiện bằng MeOH/H2SO4
Hình 2.8 TLC mẫu SCO2 concrete;
Sắcký cột-column chromatography (CC)
Hình 2.9 Sắc ký cột mẫu SCO2 concrete
Các thành phần của SCO2 concrete được phân tách bằng phương pháp sắc ký cột với chất hấp phụ là silicagel (Merck, kích thước hạt 63-100 μm). Đường kính trong của cột được sử dụng là các loại D= 6 mm; 8 mm và 16 mm. Cột được nhồi theo phương pháp nhồi ướt. Các phân đoạn tách được kiểm tra bằng TLC để gom các phân đoạn có thành phần tương tự.
Sắc ký cột nhanh- Flash chromatography (FC)
Chất hấp phụ sử dụng là silicagel Merck loại kích thước 40-63 μm, cột nhồi theo phương pháp ướt. Sử dụng một áp lực khí nén từ 0,2-0,3 bar để đẩy dung môi chạy qua cột. Cột tách cao 120-200 mm, đường kính trong ID = 6 mm. Tốc độ rửa giải 1-5 ml/phút. Các phân đoạn tách được kiểm tra bằng