CC 6 Silicagel
3.6 Khảo sát cấu trúc của các chất phân lập Chất AF3 (3 mg)
Chất AF3 (3 mg)
AF3 kết tinh hình kim màu đỏ cam từ hỗn hợp n-hexan/DCM với Rf= 0,2 ( TLC, silicagel, hệ dung môi n-hexan/DCM = 7/3), là vệt có màu vàng da cam sậm khi phun với thuốc thử anisaldehyt/H2SO4 và H2SO4/MeOH sau khi hơ nóng. Điểm nóng chảy 129-1300C.
Phổ phối va chạm electron (EI-MS 70eV) của chất AF3 cho pic ion phân tử có số khối m/z 336 [M]+, tương ứng với công thức phân tử của chất AF3 là
C21H20O4.
Cấu trúc của chất AF3 được khảo sát qua các kết quả đo phổ NMR. Phổ 13C-NMR cho các tín hiệu cộng hưởng của 21 nguyên tử C, trong đó có 12
nguyên tử C thuộc vịng thơm có độ dịch chuyển δ 108,2; 109,5; 114,1; 114,5; 114,5; 117,9; 127,6; 130,3; 130,3; 130,6; 159,7; 160,9 và 161,8. Có 4
nguyên tử C chứa liên kết đôi δ 115,9; 117,9; 128,1 và 144,1. Một nguyên tử C thuộc nhóm oxo δ 192,0. Hai nguyên tử C thuộc nhóm Me có δ 28,38; một nguyên tử C bậc 4 trên phổ DEPT có δ 77,8 và 1 nhóm OCH3 có δ 55,45.
Phổ 1H-NMR cho thấy có 6 proton thơm tương ứng với các tín hiệu δ 6,37 (1H, d, J=9Hz, H-5’); 6,95 (2H, d, J=9Hz, H-3 và H-5); 7,71 (1H, d, J=9Hz, H- 6’); 7,61 (2H, d, J=9Hz, H-2 và H-6). Xuất hiện 4 tín hiệu của 4 proton nhóm alkenic với độ dịch chuyển hóa học δ 5,59 (1H, d, J=10Hz, H-3”); 6,75 (1H, d, J=10Hz, H-6”); 7,43 (1H, d, J= 15Hz, H-α); 7,84 (1H, d, J= 15Hz, H-β) đặc trưng cho 2 liên kết đơi. Proton nhóm OH tương ứng với tín hiệu δ 13,77(s); tín
hiệu của các proton nhóm OCH3 xuất hiện 1 singulet ở δ 3,86 (s); tín hiệu của các proton nhóm Me xuất hiện ở dạng singlet với δ 1,47 (s).
Phổ DEPT cho thấy có 10 tín hiệu nhóm CH, 2 tín hiệu nhóm CH3, khơng có tín hiệu của nhóm CH2.
Các tương tác trên phổ 1H-1H COSY thể hiện các proton vị trí 2,6 tương tác
tương ứng với 3 và 5, hằng số tương tác J=9Hz và tạo thành hệ phổ AA’BB’ tương tác spin ứng với vịng thơm thế vị trí 1 và 4. Tương tác của các proton
nhóm alkenic H-α,H-β xuất hiện tín hiệu mạnh, J=15Hz thể hiện cấu hình trans. Tương tác H-5’ và H-6’ ứng với J=9Hz thể hiện cho cấu hình cis.
Kết hợp các kết quả phổ HMBC thể hiện tương tác của H với C lân cận, các tương tác của những proton 2 nhóm Me với C-2”, C-3”. Tương tác H-β với
CO, C-2; tương tác H-2 với C-β, C-1, C-4. Tương tác của các proton nhóm
OCH3 với C-4. Bên cạnh đó tham khảo các dữ liệu phổ đã cơng bố, khẳng định được AF3 có cấu trúc tương ứng với 4-Metoxylonchocarpin một prenylate chalcone được tách ra từ chi Millettia sp. bởi các tác giả Singhai Nabin, Barua
Ram P., Sharma Jogendra N.(1983), “A chalcone and an isoflavone from Millettia pachycarpa seeds” Phytochemistry, 22( 4), 1005-1006.
O O H