7. Bố cục của luận văn gồ m3 phần
2.2.3. Phƣơng pháp lôi cuốn hơi nƣớc chƣng cất tinh dầu
a. Nguyên liệu
Nguyên liệu dạng củ đƣợc thu hái ở mùa khô (của nƣớc Lào) vào tháng 4 – 5, củ nghệ đƣợc thu là nghệ tƣơi, có vỏ màu đen.
b. Chưng cất lôi cuốn hơi nước Dụng cụ
- Cân phân tích - Bếp điện - Bình cầu 2 lit
- Giá sắt
Nguyên liệu
- Củ nghệ trắng - Nƣớc cất
Cách tiến hành
Thân rễ nghệ trắng Lào đƣợc thu hái tại Lào, sau khi rửa sạch, để ráo nƣớc. Sau đó thái lát mỏng, thái nhỏ khoảng 1 – 2cm hoặc đƣợc xay nhỏ đến kích thƣớc 1cm bằng máy xay sinh tố. Chú ý trong quá trình giã hoặc xay phải đảm bảo kích thƣớc của hạt nguyên liệu sau khi xay phải tƣơng đối đồng đều, không quá nhỏ, mịn vì nhƣ vậy gây ra hiện tƣợng trào trong quá trình chƣng chất làm thất bại trong quá trình chƣng cất cũng nhƣ cháy ở đáy bình cầu, gây khó khăn trong việc làm sạch dụng cụ. Thái hoặc xay nhỏ nguyên liệu sẽ làm tăng diện tích tiếp xúc của nguyên liệu với nƣớc giúp cho quá trinh chƣng cất nhanh và triệt để hơn. Hình 2.4 thể hiện nguyên liệu đƣợc cắt mỏng và giã nhỏ.
Cho thân rễ nghệ trắng Lào đã đƣợc thái hoặc xay nhỏ vào bình cầu. Mỗi lần cho khoảng 600g cho thêm nƣớc cất đến khoảng 2/3 của bình cầu. Lắp dụng cụ nhƣ Hình 2.4. Kiểm tra độ kín của hệ thống. Tiến hành đun đến khi lƣợng tinh dầu thu đƣợc ở bên nhánh hứng không tăng lên nữa thì kết thúc quá trình chƣng cất.
Tinh dầu đƣợc làm khan nƣớc bằng Na2SO4 khan và bảo quản ở nhiệt độ thấp (dƣới 50C). Tinh dầu thân rễ nghệ trắng Lào sẽ đƣợc phân tích về tính chất và định danh về thành phần.
Hình 2.4. Thân rễ nghệ trắng Lào cắt mỏng và giã nhỏ
c. Xác định chỉ số khúc xạ của tinh dầu thân rễ nghệ trắng Lào Dụng cụ và hóa chất - Máy đo chỉ số khúc xạ - Axeton - Nƣớc cất - Pipet
- Tinh dầu khan
Cách tiến hành:
- Điều chỉnh máy: mở nắp lăng kính, lấy bông thấm axeton lau sạch kính.Mở nắp lăng kính, lấy bông lau khô nƣớc, rồi lại tẩm axeton lau lại một lần nữa (cả hai phần). Nhỏ từ từ 1-3 giọt nƣớc cất lên mặt lăng kính ở phía dƣới. Nhẹ nhàng đậy lăng kính ở trên xuống, khi nhìn vào nhiệt kế thấy đúng 250C thì ta nhìn vào thị kính nếu thấy rõ ranh giới giữa hai miền sáng tối chỉ đúng số 1,333 của cột chia nấc 1 là đƣợc, nếu chƣa phải chỉnh lại máy.
- Làm sạch và lau khô lăng kính bằng axeton. Nhỏ 1-3 giọt tinh dầu lên lăng kính phía dƣới, lấy đũa thủy tinh dàn mỏng, rồi đậy lăng kính trên xuống. Khi thấy nhiệt kế đúng 25C, nhìn vào thị kính để điều chỉnh hiện tƣợng tán sắc, vặn nút điều chỉnh màu sao cho ranh giới giữa hai miền sáng tối của thị trƣờng cắt đúng giao điểm của vạch chữ thập, Nhìn sang vạch chia độ và đọc chỉ số khúc xạ ở ngang với vạch chuẩn. Xác định lại ranh giới giữa sáng và tối, đọc lại chỉ số ít nhất ba lần, lấy trị số trung bình.
d. Xác định độ hòa tan của tinh dầu nghệ trắng trong etanol Dụng cụ và hóa chất
- Pipet - Buret
- Bình tam giác - Tinh dầu khan - Etanol 96%, 85%
Cách xác định
- Cho etanol tuyệt đối vào buret, sau đó ta nhỏ etanol vào bình tam giác có chứa sẵn 1 ml tinh dầu cho đến khi tinh dầu tan hoàn toàn. Thực hiện 3 lần với cùng một nồng độ etanol và tính thể tích trung bình etanol của 3 lần thí nghiệm.
- Thực hiện tƣơng tự thí nghiệm nhƣ với etanol tuyệt đối ở trên với các etanol 96%, 85%.
- Lập Bảng so sánh độ hòa tan của tinh dầu trong etanol có thể biết đƣợc tính xác thực và độ tinh khiết của tinh dầu . tinh dầu càng chứa nhiều hợp chất tecpen thì độ hòa tan của nó vào etanol càng kém. Nồng độ etanol càng thấp thì độ hòa tan của tinh dầu càng kém.
e. Xác định chỉ số axit của tinh dầu nghệ trắng Lào Dụng cụ và hóa chất - Bình tam giác 250ml - Buret - Cân điện - Dung dịch phenolphthalein - Rƣợu etanol 980 Cách tiến hành
- Cân 0,5 g tinh dầu cho vào bình tam giác, cho thêm 10ml rƣợu etanol , lắc bình cho vào đó 5 giọt phenolphthalein trung tính. Tiến hành chuẩn độ dung dịch trong buret là KOH 0,1 N∕ rƣợu, cho đến khi xuất hiện màu hồng bền vững trong 30 giây.
Tính kết quả
- Chỉ số axit được tính theo công thức
Trong đó:
m là khối lƣợng của tinh dầu
V là thể tích dung dịch KOH 0.1N/rƣợu
5,611: số mg KOH có trong 1 ml dung dịch KOH 0.1N/rƣợu
f. Xác định chỉ số este của tinh dầu nghê trắng Lào Dụng cụ và hóa chất
- Bình tam giác có dung tích 250ml gắn với ống sinh hàn nƣớc - Buret
- Bếp cách thủy
- Dung dịch HCl 0,5N
- Dung dịch KOH 0,5N/rƣợu
Cách tiến hành
- Sử dụng kết quả ở chỉ số axit (sau khi xác định chỉ số axit). Cho thêm 10ml dung dịch KOH 0,5N ∕ rƣợu và dung dịch đã trung hòa
- Lắp ống sinh hàm khí vào và tiến hành đun cách thủy cho sôi nhỏ trong 1 giờ. Đun xong đẻ nguội, và chuẩn độ bằng dung dịch HCl 0,5N . cùng lúc tiến hành thí nghiệm kiểm chứng nhƣng thay dầu bằng một lƣợng nƣớc cất tƣơng ứng.
Tính kết quả
- Chỉ số este đƣợc tính theo công thức:
Es = ( )
Trong đó:
m là khối lƣợng tinh dầu
V1 là thể tích dung dịch HCl dùng để chuẩn độ mẫu thí nghiệm V2 là thể tích dung dịch HCl dùng để chuẩn độ mẫu kiểm chứng 28,05 là số mg KOH có trong 1ml dung dịch KOH 0,5N/rƣợu.
g. Chỉ số xà phòng hóa của tinh dầu nghệ trắng Lào
Chỉ số xà phòng hóa bằng tổng của chỉ số axit và este Xp = Ax + Es
h. Xác định thành phần hóa học tinh dầu nghệ trắng Lào
Tinh dầu nghệ trắng sau khi đƣợc chƣng cất bằng phƣơng pháp chƣng cất lôi cuốn hơi nƣớc làm khan bằng Na2SO4 khan đƣợc mang đi phân tích GC-MS tại “Trung tâm đo lƣờng chất lƣợng, số 2 Ngô Quyền, Thành phố Đà Nẵng” số 2 Ngô Quyền, thành phố Đà Nẵng.