6. BỐ CỤC CỦA LUẬN VĂN
2.2.2.Phƣơng ph p chiết mẫu thực vật
Mẫu thực vật thƣờng đƣợc chiết theo hai cách:
Cách th nh t: Chiết mẫu với dung môi là MeOH ở nhiệt độ thƣờng. Rút
dịch chiết và thêm dung môi mới thực hiện chiết mẫu 4 lần. Dịch chiết thu đƣợc đƣợc cất loại dung môi dƣới p suất giảm ở nhiệt độ 45o
C ằng m y quay cất chân không. Thu đƣợc cao chiết MeOH tổng. Cao chiết tổng này đƣợc chế thêm nƣớc và chiết phân lớp lần lƣợt với n–hexane, EtOAc và MeOH, clorofom ằng phễu chiết. Với mỗi loại dung môi ta c ng thực hiện chiết 3 lần. C c dịch chiết đƣợc cất loại dung môi s thu đƣợc c c cao chiết tƣơng ứng (cao n–hexane, cao clorofom, cao EtOAc, cao MeOH ) để tiếp tục nghiên cứu.
Cách th hai: Mẫu thực vật khô đƣợc chiết lần lƣợt với từng loại dung môi có độ phân cực kh c nhau nhƣ n–hexane, clorofom, EtOAc và MeOH. Với mỗi loại
dung môi đƣợc chiết a lần. Cất loại dung môi dƣới p suất giảm ằng m y quay cất chân không s thu đƣợc c c cao chiết tƣơng ứng để tiếp tục nghiên cứu.
- Đối với kĩ thuật soxhlet
Nguyên tắc:
Chiết soxhlet là một kiểu chiết liên tục đặc iệt thực hiện nhờ một trang thiết ị của nó. Song ở đây pha mẫu là ở trạng th i ột hoặc dạng mảnh hoặc dạng l . C n dung môi chiết (chất hữu cơ) là dạng lỏng.
Ví dụ: chiết lấy tinh dầu melton từ l cây ạc hà ằng dung môi hữu cơ n- hexan hay enzen. Chiết c c thuốc trừ sâu hoặc ảo vệ thực vật trong mẫu rau quả mẫu đất ằng n-hexan. Vì thế đây là kiểu chiết của hệ chiết có thể là cả đồng thể và dị thể mà chất phân tích nằm trong mẫu rắn ột l sợi…
C c trang thiết ị và ví dụ:
Trang thiết ị của kỹ thuật chiết soxhlet là 2 loại: 1. Hệ soxhlet thƣờng và đơn giản
2. Hệ soxhlet tự động (Auto-soxhlet)
C ch chiết theo hệ (1) là đơn giản vận hành ằng tay. C n c ch (2) là vận hành một c ch tự động. Kĩ thuật này chủ yếu sử dụng để chiết t ch chất hữu cơ nằm trong pha rắn hay ột hay mảnh nhỏ hay c c vật liệu khô (l cây). Vì thế nên nó là hệ chiết dị thể.
Ví dụ:
Chiết soxhlet thƣờng lấy một số hóa chất ảo vệ thực vật từ mẫu rau quả: Lấy 10g mẫu đã đƣợc nghiền nhỏ và trộn đều vào cốc chiết của hệ chiết. Thêm 25-30g Na2SO4 khan 30ml dung môi chiết n-hexan có 20% Cl2H2. Sau đó tiến hành chiết trong 180 phút.
Kĩ thuật này có ƣu điểm là chiết triệt để nhƣng những điều kiện chiết phải nghiêm ngặt thì mới có kết quả tốt. Vì thế hệ thống vận hành chiết tự động cho kết quả tốt hơn nhƣng phải có hệ thống trang ị hoàn chỉnh. Nó thích hợp chiết c c chất hữu cơ từ c c đối tƣợng mẫu kh c nhau. Chất phân tích có trong mẫu rắn ột mẫu xốp khô (l cây)…kĩ thuật này đƣợc ứng dụng chủ yếu để t ch c c hợp chất hữu cơ từ mẫu l cây rau quả hoặc mẫu đất nhƣ ví dụ trên..