6. BỐ CỤC CỦA LUẬN VĂN
2.5 SƠ ĐỒ ĐIỀU CHẾ CÁC CAO CHIẾT
Sơ đồ chiết mẫu l diếp c đƣợc cho ởi hình 2.3
Hình 2.3 Sơ đồ chiết mẫu lá diếp cá
- Xử lý nguyên liệu: Nguyên liệu lá cây diếp cá ở Quảng Nam - Đà Nẵng, thu hái vào tháng 10/2017. Chọn hái những l tƣơi không ị hƣ sâu cắt phần trên mặt đất. Lá diếp c đƣợc rửa sạch, loại bỏ tạp bẩn để r o nƣớc rồi thái nhỏ.
L đã th i nhỏ đƣợc sấy khô trong tủ sấy ở nhiệt độ 300
C. Trong quá trình sấy, thỉnh thoảng dùng tay trộn xới nguyên liệu để nguyên liệu đƣợc khô đều.
Nguyên liệu khô đem xay nhỏ thu đƣợc bột dƣợc liệu.
-Chiết t ch và x c định thành phần hóa học của các dịch chiết lá diếp cá Khoảng 1 kg nguyên liệu ột khô đƣợc ngâm chiết trong MeOH ốn lần với mỗi lần 1 lít dung môi ở nhiệt độ ph ng trong thời gian 2 ngày thu lấy dịch chiết. Phần dịch chiết này đƣợc cất quay dƣới p suất giảm để đuổi dung môi, thu đƣơc cao tổng MeOH. Cao tổng này đƣợc chế thêm 200ml nƣớc cất. Chiết phân lớp lần lƣợt với c c dung môi n-hexan, clorofom, ethyl acetate, metanol ằng phễu chiết. Mỗi dung môi c ng tiến hành chiết 3 lần thu đƣợc c c phân đoạn dịch chiết tƣơng ứng. Làm khan nƣớc c c dịch chiết này ằng Na2SO4.
L diếp c
Cao MeOH
1. Sấy khô xay ột 2. Ngâm chiết với MeOH (3 lần x 1 lít)
3. Cất loại dung môi
Cao n-hexane (5.914g) Cao clorofom (5.351g) Cao EtOAc (8.875g) 1. Thêm 200ml nƣớc cất 2. Chiết phân lớp lần lƣợt với c c dung môi : n-hexan ,clorofom, , EtOAc, MeOH 3. Cất loại dung môi
Cao nƣớc (5,025 g)
Lấy ở mỗi dịch chiết khoảng 5 ml để đem phân tích GC – MS x c định thành phần và hàm lƣợng c c cấu tử có trong mỗi dịch chiết. Hệ thống GC-MS với cột t ch mao quản DB-5MS, khí mang He 10psi, thể tích tiêm mẫu 1μl (split 10:1), ghép máy MS EI+ k m ngân hàng dữ liệu và theo chƣơng trình gradient nhiệt độ: từ 500C đến 3000
C (5 phút); injector 2500C và detector 500 chế độ qu t Fullscan. Toàn ộ c c phần dịch chiết c n lại đƣợc cất quay dƣới p suất giảm để đuổi hết dung môi thu đƣợc: 5.914g cao n–hexan, 5.351g cao clorofom và 8.875g cao EtOAc và 5,025 g cao nƣớc.
Tất cả c c mẫu đƣợc đo GC-MS ở Trung tâm kiểm nghiệm thuốc mỹ phẩm thực phẩm Thành phố Huế