CHƢƠNG 2 : THỰC NGHIỆM
2.2. Định lƣợng tinh dầu, xác định các chỉ số lý và hóa học của tinh dầu
2.2.1. Định lượng tinh dầu
Hàm lượng tinh dầu (H%) được xác định dựa theo công thức: V
H%= x 100% m
Trong đó: m là trọng lượng mẫu (g)
V là thể tích tinh dầu thu được (ml)
2.2.2. Xác định các chỉ số vật lý của tinh dầu (TD)
2.2.2.1. Chỉ số khúc xạ ( 25D D n )
Cách tiến hành: Rửa sạch mặt và nắp lăng kính bằng etanol hoặc axeton. Nhỏ 1-3 giọt nước cất lên mặt kính, đậy nắp, nhìn vào nhiệt kế thấy đúng ở 25oC và nhìn vào thị kính nếu thấy rõ ranh giới giữa hai miền sáng tối chỉ đúng số khúc xạ là 1,333. Sau đó làm sạch trở lại và nhỏ 1-3 giọt tinh dầu, điều chỉnh máy để thấy rõ ranh giới giữa 2 miền sáng tối đi qua giao điểm 2 đường chéo, đọc chỉ số khúc xạ ở vạch đo. Lặp lại 3 lần và lấy kết quả trung bình [6], [10].
2.2.2.2. Tỉ trọng tinh dầu
Cách tiến hành: Rửa bình đo tỉ trọng bằng etanol và làm khô bình. Dùng cân phân tích Sartorius CPA 225D để cân bình, sau đó cho nước cất đến cổ bình (không để các bọt khí bám vào thành hay cổ bình), tiếp tục cân và trừ đi khối lượng ban đầu ta được khối lượng của nước cất chứa trong bình tỉ trọng, ký hiệu là m2 (g).
Tương tự với tinh dầu ta được khối lượng tinh dầu, ký hiệu là m1 (g). Tỉ trọng tinh dầu được tính theo công thức:
1
1 m d =
m
Trong đó: m1, m2 (g) lần lượt là trọng lượng tinh dầu và nước cất cùng thể tích [6], [10].
2.2.3. Xác định các chỉ số hoá học của tinh dầu
2.2.3.1. Chỉ số axit (IA)
Cách tiến hành: Cho m(g) tinh dầu tỏi và 10ml rượu C2H5OH 960 vào bình cầu, lắc đều và cho tiếp 5 giọt phenolphatalein vào bình cầu. Tiến hành chuẩn độ bằng dung dịch KOH 0,1N trong rượu đến khi xuất hiện màu hồng bền vững trong 30 giây [6], [10]. Đọc kết quả thể tích dung dịch KOH (ml)
Chỉ số axit được tính theo công thức : A
5,61 x V I =
m
Trong đó: V: thể tích dung dịch KOH 0,1N/Rượu (ml) dùng để chuẩn độ. m: khối lượng tinh dầu dùng để xác định (g)
5,61 là số mg KOH có trong 1ml dung dịch rượu (nồng độ KOH đúng bằng 0,1N)
2.2.3.2. Chỉ số xà phòng (IX)
Chỉ số xà phòng là số mg KOH cần thiết để trung hòa tất cả lượng axit tự do và lượng este có trong 1 gam chất béo.
Cách tiến hành:
Cho vào bình cầu 1: 1 ml nước cất và 15 ml dung dịch KOH 0,5N Cho vào bình cầu 2: m gam tinh dầu và 15 ml dung dịch KOH 0,5N
Lắp ống sinh hàn không khí và đun cách thuỷ cho sôi hỗn hợp trong 1 giờ. Sau đó để nguội, thêm vào mỗi bình 15 ml nước cất và 3 giọt phenolphtalein và chuẩn độ bằng dung dịch HCl 0,5N và ghi thể tích HCl [6], [10].
Chỉ số xà phòng được tính theo công thức :
1 2 X
(V -V ) x 28,05 I =
m
Trong đó: V1: là số ml dung dịch HCl 0,5N dùng để chuẩn độ bình cầu 1
V2: là số ml dung dịch HCl 0,5N dùng để chuẩn độ bình cầu 2 m: khối lượng tinh dầu dùng để xác định (g)
28,05 là số mg KOH có trong 1ml dung dịch rượu (nồng độ KOH đúng bằng 0,5N)
2.2.3.3. Chỉ số este (IE)
Chỉ số este là số mg KOH cần để trung hòa lượng este có trong 1 gam chất béo. Như vậy, chỉ số este có thể tính gián tiếp theo công thức:
IE = IX - IA
2.2.3.4. Chỉ số Iot (II)
Chỉ số iot được định nghĩa là số gam iot đã phản ứng với 100 gam chất béo.
Cách tiến hành:
Cho vào bình cầu 1: 1 ml nước cất Cho vào bình cầu 2: m gam tinh dầu
Thêm 10 ml etanol 98o và 10 ml dung dịch Iot 0,1N trong cồn, lắc đều.
Đậy nút, để yên trong bóng tối 3 giờ, sau đó chuẩn độ bằng dung dịch Na2S2O3 0,1N đến khi dung dịch có màu vàng [6], [10].
Thêm vào mỗi bình 10 giọt hồ tinh bột 1% tiếp tục chuẩn độ đến màu xanh. Ghi thể tích Na2S2O3 đã dùng.
Chỉ số Iot được tính theo công thức:
1 2
I
(V -V )
I = x 12,7 x 100 m
Trong đó: V1: là số ml dung dịch Na2S2O3 0,1N dùng để chuẩn độ bình cầu 1 V2: là số ml dung dịch Na2S2O3 0,1N dùng để chuẩn độ bình cầu 2 m: khối lượng tinh dầu dùng để xác định (g)
12,7 là số mg iot có trong 1ml dung dịch iot 0,1N.