6. Bố cục luận văn
3.3.5.Tổng kết thành phần hóa học trong các dịch chiết của hạt điều
nhuộm
Bảng 3.16. Tổng hợp kết quả định danh thành phần hóa học trong các dịch chiết từ hạt điều nhuộm
STT Tên chất
Diện tích pic trong các dịch chiết (%) n- hexane Dichloro methane Ethyl acetate Methanol 1 1R-.alpha.-Pinene 0.07 0.47 - - 2 2-(3-Isopropyl-4- methyl-pent-3-en-1- ynyl)-2-methyl- cyclobutanone 0.08 - - - 3 Caryophyllene 0.08 0.08 - 4 α-Himachalene 1.01 1.24 - - 5 β-Cadinene 0.38 0.38 0.55 - 6 δ-Cadinene 0.08 0.08 0.11 7 Trimethyl hydroquinone 0.87 0.84 - 0.30 8 Selina-6-en-4-ol 0.57 0.64 0.56 0.64
9 Spathulenol 0.76 - 0.77 1.03 10 (2Z,6E,10E)- 3,7,11,15-tetramethyl -2,6,10,14-hexadeca tetraen-1-ol 0.87 - - 0.93 11 n-Hexadecanoic acid 0.11 - 0.25 0.66 12 Geranylgeraniol 56.04 48.50 45.67 63.51 13 (2E,6E,10E)-3,7,11,15 -tetramethyl-2,6,10, 14-hexadecatetraenyl acetate 0.47 - 7.61 - 14 β-Springene 0.76 1.54 1.80 - 15 (all-E)- Squalene 0.11 0.13 - - 16 Stigmasterol 0.26 0.17 - - 17 4,22-Stigmastadiene- 3-one 0.45 0.43 0.35 - 18 Testosterone 0.32 0.21 0.24 - 19 p-Xylene - 9.20 - - 20 beta.-Pinene - 0.21 - - 21 Methyl m-toluate - 0.29 0.21 0.80 22 α-Selinene - 0.20 - - 23 (3E,6E,10E)-3,7,11,15 -tetramethyl-1,3,6,10, 14-hexadecapentaene - 0.58 - - 24 (E,E)-Farnesol - 0.75 - - 25 Aristolene - - 0.20 -
26 Valencene - - 0.13 27 Calarene (β-Gurjunene) - - 0.15 - 28 (22E)-Chola-5,22- dien-3-ol - - 0.31 - 29 2-hydroxy cyclopent-2-en-1-one - - - 0.21 30 Methyl levulinate - - - 0.19 31 Methyl 4-oxo-2- pentenoate - - - 0.39 32 p-Acetyltoluene - - - 0.24 33 Linoleic acid - - - 0.39 34 2-methyl-3-(3-methyl- but-2-enyl)-2-(4- methyl-pent-3-enyl)- oxetane - - - 0.20 35 γ-Sitosterol - - - 0.22 Nhận xét chung:
Từ bảng 3.16 cho thấy phương pháp GC-MS đã định danh được 35 cấu tử trong cả 4 dịch chiết; trong đó, dịch chiết n-hexane được 18 cấu tử (63.29%), dịch chiết dichloromethane được 19 cấu tử (65.94%), dịch chiết ethyl acetate được 15 cấu tử (58.91%), dịch chiết methanol được 14 cấu tử (69.71%). Dựa vào phần trăm diện tích pic, chúng tôi nhận thấy hàm lượng phần trăm các cấu tử được định danh trong dịch chiết methanol là lớn nhất, đến dịch chiết dichloromethane, dịch chiết n-hexane, và nhỏ nhất là dịch chiết ethyl acetate. Điều này chứng tỏ methanol và dichloromethane có khả năng
hòa tan tốt và chiết được nhiều cấu tử phân cực hoặc không phân cực với hàm lượng lớn từ hạt điều nhuộm.
Cả 4 dịch chiết đều có mặt 2 cấu tử là Geranylgeraniol và Selina-6-en-4- ol do các cấu tử này đều có khả năng hòa tan trong 4 dung môi. Riêng Geranylgeraniol được phát hiện trong cả 4 dung môi với hàm lượng lớn nhất: n-hexane: 56.04%, dichloromethane: 48.50%, ethyl acetate: 45.67%, methanol: 63.51%. Có thể khẳng định rằng Geranylgeraniol là một trong những thành phần chính của hạt điều nhuộm, kết quả này phù hợp với các phát hiện của công trình đã công bố [17], [18], [24].
Trong các cấu tử được định danh, có nhiều hợp chất có hoạt tính sinh hoạt cao được ứng dụng nhiều trong y học như:
-Geranylgeraniol
Trong các dịch chiết từ hạt điều nhuộm, Geranylgeraniol có hàm lượng cao nhất trong dịch chiết methanol (63.51%). Như vậy, có thể sử dụng methanol làm dung môi thích hợp để chiết tách Geranylgeraniol từ hạt điều nhuộm. Ngoài ra, với hàm lượng phần trăm phát hiện lớn như thế, có thể xem hạt điều nhuộm là nguồn cung cấp Geranylgeraniol đáng kể.
Geranylgeraniol là một ancol diterpene (có 4 đơn vị isoprene) có vai trò quan trọng trong các quá trình sinh học . Nó là chất trung gian trong việc tổng hợp các terpene khác và các vitamin E, K [32]. Ngoài ra, một dẫn xuất rất quan trọng của Geranylgeraniol là Geranylgeranyl pyrophosphate, được tổng hợp bởi HMG-CoA reductase mã hóa bằng gen Columbus [21]. Trong thực vật, nó là tiền thân của carotenoids, giberelin, tocopherols và chlorophyll. Cả Geranylgeraniol và Geranylgeranyl pyrophosphate đều được sử dụng trong quá trình dịch mã để tổng hợp các geranylgeranylated protein, một dạng của prenylated protein trong tế bào của người, có vai trò quan trọng gắn kết màng tế bào đến chức năng trung tâm trong sinh học tế bào và bệnh lý (Hình 3.14
[33]). Quá trình tổng hợp này được gọi là Geranylgeranyl hóa. Sự tổng hợp các prenylated protein cạnh tranh với sự tổng hợp Cholesterol ở mô và tế bào, do đó có lợi trong việc giảm lượng Cholesterol trong máu, hạn chế các bệnh về tim mạch, xơ vữa động mạch, các bệnh về gan…
Hình 3.14. Con đường chuyển hóa của HMG-CoA reductase
Geranylgeraniol còn là một pheromone cho ong vò vẽ và nhiều loại côn trùng khác. Pheromone giữ vai trò trong nhiều hoạt động của đời sống côn trùng. Nó có thể là chất báo động, chất giúp cho côn trùng biết và nhận ra nhau, chất hấp dẫn sinh dục, chất quyết định cho việc tụ tập lại thành đàn của côn trùng, và cũng là chất quyết định cho các loài hình cá thể của các côn trùng sống thành tập thể [32]. Ngoài ra, Geranylgeraniol là một chất ức chế
mạnh của Mycobacterium tuberculosis (vi khuẩn lao) trong phòng thí nghiệm [16], [27].
-(E,E)-Farnesol
Từ kết quả GC-MS của các dịch chiết cho thấy, (E,E)-Farnesol được tìm thấy trong dịch chiết dichloromethane (0.75%).
(E,E)-Farnesol là một sesquiterpene (3 đơn vị isoprene). Tương tự như Geranylgeraniol, (E,E)-Farnesol cũng là sản phẩm trung gian trong quá trình sinh tổng hợp các terpenoid có hoạt tính sinh học cao (Hình 3.14). Dẫn xuất phosphate của Farnesol cũng đóng vai trò quan trọng trong quá trình này. Các hợp chất này sẽ được nhân đôi để tạo thành squalene 30-carbon, trong đó lần lượt là các tiền chất steroid trong thực vật, động vật và nấm. Như vậy, (E,E)- Farnesol và các dẫn xuất của nó là những hợp chất khởi đầu quan trọng cho cả tổng hợp hữu cơ tự nhiên và nhân tạo [28].
(E,E)-Farnesol là một hợp chất được chứng minh có đặc tính chống khối u và chống vi khuẩn, được sử dụng nhiều trong các sản phẩm mỹ phẩm để khử mùi và tạo mùi hương. Tuy nhiên, (E,E)-Farnesol có thể gây kích ứng da, những người bị dị ứng với nước hoa thì không nên dùng các sản phẩm có hóa chất này [28].
-Spathulenol
Trong các dịch chiết từ hạt điều nhuộm, Spathulenol có hàm lượng cao nhất trong dịch chiết methanol (1.03%).
Spathulenol là một ancol sesquiterpene 3 vòng, có bộ khung tương tự azulene. Spathulenol là chất có hoạt tính sinh học mạnh, có tác dụng ức chế miễn dịch, hỗ trợ trong việc điều trị ung thư bằng hóa trị [30].
Ngoài ra, trong các dịch chiết từ hạt điều nhuộm còn tìm thấy một số chất có hoạt tính sinh học cao với hàm lượng nhỏ như : Stigmasterol, (all-E)- Squalene, γ-Sitosterol…
Stigmasterol rất hữu ích trong việc ngăn ngừa một số bệnh ung thư, bao gồm ung thư buồng trứng, tuyến tiền liệt, ung thư vú và ung thư ruột kết. Sigmasterol đã được chứng minh rằng có thể ức chế sự suy thoái viêm xương khớp do thoái hóa sụn [29]. Một số nghiên cứu khác cũng chứng minh Stigmasterol có thể chống viêm, ức chế sự phát huy khối u, ngăn vi rút HIV sao chép ngược.
(all-E)-Squalene là một triterpene và là một phần quan trọng của sự tổng hợp tất cả các sterol thực vật và động vật, bao gồm cholesterol, hormon steroid và vitamin D trong cơ thể con người. (all-E)-Squalene có nhiều trong gan cá mập, hạt rau dền, cám gạo, mầm lúa mì, và ô liu. (all-E)-Squalene còn là chất béo tự nhiên do tế bào da người tạo ra, vì vậy nó được sử dụng trong mỹ phẩm, làm kem dưỡng da và mới đây hơn là một chất hỗ trợ miễn dịch trong vắc xin [31].
γ-Sitosterol có tác dụng giảm mỡ máu, điều hòa chuyển hóa cholesterol trong máu, chống bệnh tiểu đường, chống ung thư, kháng khuẩn, chống viêm, trị tiêu chảy và kháng virus.
Kết hợp kết quả xác định các hợp chất chiết trong nước và trong dầu ở bảng 1.1 với kết quả định danh GC-MS các hợp chất chiết trong 4 dung môi hữu cơ (n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate, methanol) từ hạt điều nhuộm của đề tài này, chúng tôi nhận thấy tổng cộng có 134 cấu tử đã được định danh, trong đó có 8 cấu tử bị trùng lặp là α-Pinene, Caryophyllene, δ-Cadinene, Spathulenol, p-Xylene, β-Pinene, Aristolene, Valencene.