pH là một yếu tố quan trọng ảnh hưởng tới quá trình tăng trưởng của tế bào vi khuẩn cũng như khả năng sinh tổng hợp levan của B. subtilis. Thí nghiệm nhằm khảo sát sự ảnh hưởng của điều kiện pH giúp vi sinh vật tổng hợp levan với hàm lượng cao được thực hiện trên môi trường cơ bản chứa sucrose nồng độ 80 g/l và pH 5 - 9. Sau thí nghiệm, hàm lượng levan thu được trình bày ở hình 3.3.
Hình 3.3. Kết quả ảnh hưởng của pH ban đầu đến khả năng sinh tổng hợp levan
Hình 3.4. Canh trường sau khi nuôi cấy chủng B. subtilis với các nồng độ pH khác nhau
Qua hình 3.3 và hình 3.4 cho thấy, khoảng pH thích hợp để B. subtilis sinh tổng hợp levan cao là 6-9. Tuy nhiên, kết quả cho thấy ở pH = 7 thì lượng levan thu được là cao nhất 18,02 g/l. Nhiều nghiên cứu cho thấy với pH 7 là pH trung hòa thích hợp cho nhiều vi sinh vật tổng hợp các hợp chất. Đối với chủng B. subtilis là vi khuẩn hiếu khí nhưng có khả năng phát triển trong môi trường thiếu oxy và sinh trưởng thích hợp với pH 7,0 - 7,4 (Nguyễn Đức Duy Anh, 2005).
Nghiên cứu của Patricia và cs (2014), khi thử nghiệm pH của chủng B. subtilis Natto CCT 7712 sinh tổng hợp đường FOS cho kết quả giá trị pH 7,3 thu được hàm lượng đường cao nhất.
Kết quả này tương đồng với kết quả pH=7 khi nuôi cấy B. subtilis của tác giả khác để thu được hàm lượng levan cao nhất. Szwengiel và cs (2004), nuôi cấy B. subtilis DSM 347 trên môi trường pH 6,7 còn Shih và cs (2005), đã sinh tổng hợp levan từ chủng B. subtilis Natto Takahashi ở pH 7, Jothi và cs (2019), cũng xác định ở pH 7 thu được hàm lượng levan cao nhất khi tổng hợp từ chủng B. subtilis MTCC 441. Do đó, lựa chọn pH 7 cho các thí nghiệm tiếp theo.