Các loại dung môi ảnh hưởng mạnh đến khả năng kết tủa và chất lượng levan thu được. Theo Kang và cs (1979), việc thu nhận các hợp chất polysaccharides từ thực vật ảnh hưởng rất lớn bởi các loại dung môi. Chính vì thế, tiến hành nghiên cứu đối với ba loại dung môi: ethanol 960, iso propanol, aceton đến khả năng tạo kết tủa của levan và việc lựa chọn các loại dung môi này đều có hằng số điện môi nhỏ nên không làm phân tán tới các phân tử trong dung dịch (Beste và cs, 2014).
Thí nghiệm thực hiện sau khi nuôi cấy B. subtilis trong điều kiện đã được tối ưu và cho kết quả được thể hiện ở hình 3.14.
Hình 3.14. Kết quả ảnh hưởng của các loại dung môi đến hàm lượng levan thu được
Từ hình 3.14 cho thấy khả năng kết tủa levan của ethanol 960 hiệu quả hơn so với iso propanol và aceton. Mặt khác, khi kết tủa levan bằng ethanol 960 có nhiều thuận lợi do ethanol 96o là hợp chất an toàn cho sản phẩm thu được (Kang và cộng sự, 2009). Hơn nữa, ethanol 960 có sẵn ở dạng tinh khiết với ít tạp chất gây nhiễm độc hay ức chế. Nhiệt độ bay hơi của dung môi ethanol thấp nên dễ tách bỏ dung môi khỏi chế phẩm enzym bằng phương pháp sấy nhẹ bằng quạt gió.
Nghiên cứu của Jothi và cs (2019), đã thử nghiệm ảnh hưởng của các dung môi khác nhau: ethanol, isopropanol, acetone, methanol lên hàm lượng levan thu được, kết quả đã cho thấy dung môi kết tủa bằng ethanol cho hàm lượng levan lớn nhất. Năm 2018, Ni và cs cũng đã có nghiên cứu về các điều kiện sinh tổng hợp levan từ chủng Lactobacillus reuteri LTH5448 đã lựa chọn dung môi ethanol để kết tủa sinh tổng hợp levan. Cũng trong năm này, tác giả Bersaneti và cs (2018) đã lựa chọn dung môi ethanol là dung môi kết tủa thu nhận levan và fructooligosaccharides từ chủng B. subtilis natto để ứng dụng ngành công nghiệp thực phẩm. Kết quả này tương đồng với kết quả thí nghiệm khi lựa chọn dung môi ethanol 960 để kết tủa sinh tổng hợp levan. Vì vậy, đề tài sử dụng dung môi ethanol 960 cho các nghiên cứu tiếp theo.