Phương pháp phân loại dựa vào quan sát hình thái

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu nấm nội sinh trong cây nghệ vàng (curcuma longa l ) và các hợp chất thiên nhiên từ nấm nội sinh​ (Trang 26 - 27)

Tên khoa học của các chủng nấm nội sinh cho chất biến dƣỡng ra môi trƣờng có tác động kháng khuẩn, kháng nấm, chống oxi hóa… sẽ đƣợc xác định đến mức chi dựa trên các đặc điểm của nấm.

Các qui tắc chính trong định danh

Chủng nấm tuyệt đối thuần khiết (không lẫn vi sinh vật khác). Sử dụng môi trƣờng nuôi cấy có thành phần phù hợp.

Quan sát và ghi lại các đặc điểm phân loại của chủng nấm cần định danh (đặc điểm khuẩn lạc, mặt phải, mặt trái, tốc độ phát triển, đặc điểm vi học…).

Dùng chuyên luận các nhóm phân loại để định loại nấm đến mức chi. Kiểm tra chủng nấm đã định danh với chủng nấm có trong bộ sƣu tầm mẫu.

Viết tên các nhóm phân loại đúng với danh pháp quốc tế.

Quan sát các đặc điểm khuẩn lạc

Dùng que cấy, cấy điểm chủng nấm cần nghiên cứu vào môi trƣờng thạch đĩa LCA, PDA. Đặt đĩa nuôi cấy trong tủ ấm 25OC, trong 7-14 (30)

ngày, quan sát các đặc điểm khuẩn lạc (kích thƣớc, màu sắc khuẩn lạc; màu sắc mặt trái khuẩn lạc; sự hình thành giọt tiết, sắc tố ra ngoài môi trƣờng,...) và các đặc điểm vi học của chúng.

Quan sát các đặc điểm vi học

Chuẩn bị dụng cụ:

La men, lam kính, thuốc nhuộm xanh cotton, đèn đốt bằng ga, kim nhọn 0,02mm, kính quang học Zeiis Axioplan II.

Cách thực hiện:

Nấm đƣợc cấy trên môi trƣờng thạch đĩa LCA, ở nhiệt độ 25OC từ 1-2 tuần. Quan sát trục tiếp khuẩn lạc dƣới kính quang học ở độ phóng đại 200 lần. Nhỏ một giọt xanh cotton blue 0,1% (hoặc nƣớc vô trùng, hoặc lactophenol) lên lam kính. Dùng kim nhọn đã khử trùng bằng đèn gas, lấy trên bề mặt thạch một miếng chứa khuẩn lạc có kích thƣớc khoảng 0,2mm × 0,2mm rồi chuyển sang lam kính. Đặt lamen lên, quan sát dƣới kính quang học ở các vật kính có độ phóng đại 400 lần và 1000 lần. Đo kích thƣớc, và chụp ảnh hình thái cấu trúc các cơ quan sinh sản của nấm. Sau đó so sánh với khóa phân loại của các tác giả uy tín trên thế giới nhƣ Seifert 2011,…. tìm ra sự tƣơng đồng giữa hình ảnh của chủng nấm cần phân loại và hình ảnh trong sách, từ đó đƣa ra kết luận.

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu nấm nội sinh trong cây nghệ vàng (curcuma longa l ) và các hợp chất thiên nhiên từ nấm nội sinh​ (Trang 26 - 27)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(63 trang)