3. Nội dung nghiên cứu
1.3.1. Tình hình nghiên cứu trên thế giới
Năm 1994 Mondal và các cộng sự đã nghiên cứu cải tiến kỹ thuật nhân giống in vitro cây đu đủ bằng phương pháp nuôi cấy tái sinh mô sẹo từ cuống lá, thân và rễ của cây đu đủ con. Môi trường nuôi cấy được bổ sung IBA 2,0 mg/l và BAP 0,5 mg/l. Cây con được sử dụng là những cây sạch bệnh được nuôi cấy trong phòng thí nghiệm. Số lượng chồi nhiều nhất thu được từ mô sẹo có nguồn gốc phát sinh từ rễ trong môi trường MS bổ sung IBA 0,5 mg/l và Kinetin từ 1 mg/l đến 2 mg/l. Sự hình thành rễ được tạo ra trong môi trường MS 1/2 bổ sung IBA 2 mg/l. Cây con invitro đã được thuần dưỡng và đưa ra trồng ở môi trường tự nhiên [34].
Năm 2003, McCubbin và cộng sự đã nghiên cứu cải tiến kỹ thuật nhân giống cây đu đủ trong ống nghiệm. Khi bổ sung than hoạt tính với hàm lượng
3g/l ở bước trung gian trước khi ra rễ làm giảm hiệu ứng độc của cytokinin do việc sử dụng lâu dài [31].
Năm 2012, Roy Và cộng sự đã nghiên cứu về sự di truyền của cây đu đủ thông qua nuôi cấy in vitro. Kết quả nghiên cứu đã cho thấy một số lượng lớn chồi được tái sinh từ nụ bên và lá non của đu đủ trên môi trường MS được bổ sung zeatin 1,0 mg/l và NAA 0,2 mg/l. Bổ sung casein hydrolylate (CH) 200 mg/l và than hoạt tính 2,0 g/l vào môi trường nuôi cấy sẽ tạo được môi trường phù hợp cho lá phát triển. Trong khi đó, khi bổ sung ure 100 mg/l và than hoạt tính 2,0 g/l vào môi trường nuôi cấy sẽ tạo được môi trường phù hợp cho sự kéo dài chồi. Môi trường tốt nhất cho sự ra rễ là môi trường có bổ sung IBA 4,0 mg/l. Sau bốn tuần theo dõi 90% số chồi ra rễ, đạt được 12 – 14 rễ/ chồi. Khi đưa ra môi trường ngoài có 84% cây con phát triển tốt [52] .
Năm 2013, Mumo và cộng sự đã nghiên cứu quy trình tái sinh cây đu đủ Kenya trong ống nghiệm bằng cách sự dụng vật liệu là chồi cây đu đủ. Kết quả nghiên cứu đã cho thấy: Môi trường nhân chồi tốt nhất là MS có bổ sung BAP 0,5 mg/l và NAA 0,1 mg/l.; Môi trường có hàm lượng IBA 2,5 mg/l có tỷ lệ cảm ứng ra rễ tốt nhất với số lượng rễ và chiều dài rễ cao nhất [36].
Năm 2015, Setargie và các cộng sự đã nghiên cứu quy trình nhân giống
in vitro cây đu đủ. Nghiên cứu này đươc tiến hành để cải tiến cho quy trình nhân giống in vitro cây đu đủ lưỡng tính (Carica papaya L.) từ chồi non trước đó. Trong nghiên cứu này, môi trường MS có bổ sung các nồng độ auxin và cytokinin khác nhau, từ đó đánh giá ảnh hưởng của các nồng độ auxin và cytokinin đến việc tạo môi trường phù hợp cho việc tái sinh chồi trong điều kiện in vitro. Môi trường phù hợp nhất cho mô sẹo tái sinh chồi là môi trường MS có bổ sung BAP 1mg/l và NAA 0,5 mg/l. Tại môi trường MS có bổ sung BAP 1,0 mg/l và NAA 0,5 mg/l có số lượng chồi đạt mức trung bình là 16 chồi, chồi cao nhất là 1,7 cm, số chồi có lá là 21 chồi. Lượng BAP và NAA tối thiểu bổ sung vào môi trường để nẩy chồi là BAP 0,5 mg/l và NAA 0,5
g/l. Lượng BAP và NAA tối đa bổ sung vào môi trường để nẩy chồi là BAP 2,0 mg/l và NAA 0,5 g/l. Số lượng chồi, số lá và chiều dài lá được ghi nhận trong khoảng từ BAP 0,5 mg/l đến BAP 2,0 mg/l . Môi trường ra rễ cho chồi tốt nhất là môi trường MS có bổ sung IBA 1,5 mg/l. Số lượng rễ thu được là 16,25 rễ; chiều dài gốc đo được là 3,92 cm. Tại môi trường MS có bổ sung IBA 3mg/l cho độ dài gốc tối thiểu. Khả năng cây con sống sót khi làm quen với khí hậu đạt 40% trên hỗn hợp đất vườn, cát và phân bò theo tỷ lệ 2: 1: 1 [55].
Năm 2016, Gatambia đã sử dụng phương pháp in vitro để tái sinh đu đủ trên môi trường lỏng và môi trường bán lỏng có bổ sung các chất điều hòa sinh trưởng với các nồng độ khác nhau. Số lượng chồi cao nhất thu được trên môi trường có bổ sung IBA 0,5 mg/l và NAA 1,0 mg/l. Môi trường cảm ứng ra rễ tốt nhất là môi trường có bổ sung IBA 2,5 mg/l [26].