Kết quả nuôi cấy chọn lọc quần thể tế bào

Một phần của tài liệu Đánh giá sự thuần nhất của quần thể tế bào gốc trung mô được phân lập từ lớp lót trong tĩnh mạch dây rốn trẻ sơ sinh trong nuôi cấy in vitro (Trang 41 - 43)

Do trong môi trường nuôi cấy không có VEGF (là nhân tố sinh trưởng kích thích tăng sinh của tế bào nội mô) nên các tế bào nội mô trong đĩa nuôi cấy chết dần dần trong khoảng từ 7 đến 14 ngày. Sau khoảng 1 tuần, có thể thấy được các tế bào gốc trung mô xuất hiện rõ ràng hơn, với số lượng lớn hơn so với lúc ban đầu, trong khi đó số lượng các tế bào nội mô thì giảm đi rõ rệt. Có thể dễ dàng nhận thấy các tế bào thuôn dài, có hình dạng giống nguyên bào sợi chiếm đã phát triển mạnh hơn và chiếm ưu thế. Trong khi quần thể tế bào nội mô có hình dạng đa giác lại nhỏ và giảm dần đi thành các đảo tế bào (Hình 14).

Hình 14. Tế bào sau 7 ngày nuôi cấy chọn lọc dòng tế bào gốc

Các tế bào gốc trung mô (có dạng thuôn dài, hình dạng giống nguyên bào sợi) xuất hiện rõ ràng hơn, với số lượng lớn hơn. Trong khi đó các tế bào nội mô (có hình dạng đa giác nhỏ) giảm đi rõ rệt và thành các đảo tế bào. Độ phóng đại 5x10.

Sau 2 tuần nuôi cấy, trong điều kiện không có nhân tố sinh trưởng VEGF, các tế bào nội mô gần như biến mất hoàn toàn, chỉ còn lại các tế bào có hình dạng giống nguyên bào sợi sống sót, tăng sinh và hình thành các quần lạc (colony). Lúc này, tế bào gốc trung mô có tiềm năng sinh sản rất lớn, tăng sinh rất nhanh so với giai đoạn 7 ngày sau khi phân lập. Chúng phát triển tạo thành những mảng song song với những lớp cuộn xoắn và gối lên nhau (Hình 15). Khi tế bào đạt đến độ bao phủ 80%, chúng tôi tiến hành cấy chuyển.

Hình 15. Tế bào sau 14 ngày nuôi cấy chọn lọc dòng tế bào gốc

Tế bào nội mô gần như biến mất hoàn toàn, chỉ còn lại tế bào gốc trung mô sống sót, tăng sinh và hình thành các quần lạc. Lúc này, tế bào gốc trung mô tăng sinh rất nhanh, tạo thành những mảng song song với những lớp cuộn xoắn và gối lên nhau. Độ phóng đại 5x10.

3.2. KẾT QUẢ NUÔI CẤY VÀ ĐÁNH GIÁ ĐỘ THUẦN NHẤT CỦA QUẦN THỂ TẾ BÀO NUÔI CẤY THỨ PHÁT QUẦN THỂ TẾ BÀO NUÔI CẤY THỨ PHÁT

Một phần của tài liệu Đánh giá sự thuần nhất của quần thể tế bào gốc trung mô được phân lập từ lớp lót trong tĩnh mạch dây rốn trẻ sơ sinh trong nuôi cấy in vitro (Trang 41 - 43)