3.1. ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU
- Học viện Nông nghiệp Việt Nam :
+ Phòng thí nghiệm trọng điểm CNSH Thú y, Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam;
+ Phòng thí nghiệm bộ môn Ngoại sản;
+ Phòng thí nghiệm Công nghệ Sinh học Thực vật Khoa CNSH. - Các hộ chăn nuôi bò sữa:
+ Huyện Ba Vì, thành phố Hà Nội; + Huyện Vĩnh Tường, tỉnh Vĩnh Phúc; + Huyện Tiên Du, tỉnh Bắc Ninh.
3.2. THỜI GIAN NGHIÊN CỨU
Từ tháng 5/2017 đến tháng 8/2018.
3.3. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU
Đối tượng nghiên cứu của đề tài là đàn bò sữa nuôi tại một số địa phương thuộc khu vực đồng bằng sông Hồng.
3.4. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU
3.4.1. Đánh giá thực trạng bệnh viêm tử cung
+ Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung trên đàn bò sữa;
+ Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung trước và sau khi đẻ 24 ngày; + Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung theo mùa vụ trong năm; + Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung theo lứa đẻ;
+ Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung theo sản lượng sữa.
3.4.2. Xác định biến đổi của một số chỉ tiêu lâm sàng khi bò bị viêm tử cung
- Sự biến đổi về thân nhiệt; - Sự biến đổi về tần số mạch đập; - Sự biến đổi về tần hô hấp;
- Sự biến đổi về mức độ thu nhận thức ăn và nước uống; - Sự biến đổi của dịch viêm tiết ở cơ quan sinh dục.
3.4.3. Xác định sự biến đổi của một số vi khuẩn hiếu khí thường gặp trong dịch viêm tử cung dịch viêm tử cung
- Tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong dịch tử cung của bò bình thường và bò mắc bệnh viêm tử cung;
- Thành phần vi khuẩn hiếu khí có trong dịch tử cung của bò bình thường và bò mắc bệnh viêm tử cung;
- Xác định tính mẫn cảm với kháng sinh của một số loại vi khuẩn hiếu khí phân lập được từ dịch viêm tử cung với một số kháng sinh thông dụng và chế phẩm có nguồn gốc thảo dược.
3.4.4. Thử nghiệm sử dụng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược điều trị bệnh viêm tử cung bò viêm tử cung bò
Thử nghiệm biện pháp điều trị bệnh viêm tử cung bò bằng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược dạng huyền phù và theo dõi chỉ tiêu tỷ lệ khỏi, thời gian khỏi và khả năng sinh sản của bò sau khi khỏi bệnh.
3.5. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.5.1. Phương pháp đánh giá thực trạng bệnh viêm tử cung
- Bò được coi là bị viêm tử cung khi từ tử cung thải ra dịch có màu nâu - đỏ, mùi thối, có thể có mủ, bò có các triệu chứng sốt, mệt mỏi, ăn kém và sụt giảm sản lượng sữa, những trường hợp nghi ngờ được kiểm tra lại bằng phản ứng Whiteside test (Fayaz et al., 2014) cụ thể như sau: lấy 1ml dịch tử cung cần kiểm tra vào ống nghiệm sạch, sau đó cho thêm 1ml dung dịch NaOH 5% và đun sôi. Để ống nghiệm trong giá đựng cho tới khi dung dịch nguội và đánh giá kết quả như sau:
+ Nếu dung dịch không có màu thì được cho là dịch tử cung bình thường. + Nếu dung dịch có màu vàng thì dịch được cho là dịch viêm tử cung. - Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung trên đàn bò sữa tại địa phương nghiên cứu được xác địnhbằng phương pháp điều tra, phỏng vấn trực tiếp người chăn nuôi kết hợp với việc theo dõi, thăm khám trực tiếp và sử dụng phương pháp Whiteside test (Bhat et al., 2014).
phân loại những bò bị viên tử cung theo từng yếu tố: mùa vụ, lứa đẻ, sản lượng sữa và thời gian sau khi đẻ.
3.5.2. Phương pháp xác định sự biến đổi một số chỉ tiêu lâm sàng khi bò bị viêm tử cung viêm tử cung
- Sự biến đổi về thân nhiệt của bò được xác định bằng nhiệt kế đo ở trực tràng bò sữa, mỗi con 3 lần và lấy số bình quân, so sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung;
- Sự biến đổi về mạch đập của bò được xác định bằng cách đếm số lần động mạch đuôi đập trong vòng 1 phút, mỗi con 3 lần và lấy số bình quân, so sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung;
- Sự biến đổi về tần số hô hấp của bò được xác định bằng cách đếm số lần hít vào, thở ra trong vòng 1 phút, mỗi con 3 lần và lấy số bình quân, so sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung;
- Sự biến đổi về phản ứng của cơ thể: đau, co nhỏ của tử cung được xác định bằng cách khám qua trực tràng và phản ứng co, đạp 2 chân sau, so sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung;
- Sự biến đổi về mức độ thu nhận thức ăn và nước uống được xác định theo dõi lượng thức ăn, nước uống trong ngày của bò, so sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung;
- Dịch viêm ở cơ quan sinh dục được xác định bằng cách kiểm tra dịch tiết ra từ cơ quan sinh dục và so sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung.
3.5.3. Phương pháp xác định sự biến đổi của một số vi khuẩn hiếu khí thường gặp trong dịch viêm tử cung thường gặp trong dịch viêm tử cung
- Xác định tổng số và thành phần vi khuẩn hiếu khí được thực hiện theo tiêu chuẩn phòng thí nghiệm ISO - 17025.
- Xác định tính mẫn cảm của vi khuẩn với một số loại kháng sinh được đánh giá theo “Các tiêu chuẩn lâm sàng trong phòng thí nghiệm của Hội đồng Quốc gia Mỹ” (The United State National Committee for Clinical Laboratory Standards guidelines - NCCLS).
3.5.4. Xác định hiệu quả của sử dụng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược điều trị bệnh viêm tử cung bò bằng phương pháp sử dụng 02 phác đồ trị bệnh viêm tử cung bò bằng phương pháp sử dụng 02 phác đồ
khi thụt rửa kích thích cho dung dịch thụt rửa chảy hết ra ngoài, dùng Norfloxacin
5mg/kg thể trọng pha với 100ml nước cất bơm vào tử cung; kết hợp trợ sức, trợ lực bằng ADE, B.complex, liệu trình điều trị không quá 7 ngày.
Phác đồ 2: Thụt rửa tử cung bằng dung dịch Rivanol 0,1% ngày 1 lần, sau khi thụt rửa kích thích cho dung dịch thụt rửa chảy hết ra ngoài, dùng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược dạng huyền phù 1ml/5kg thể trọng bơm vào tử cung, kết hợp trợ sức, trợ lực bằng ADE, B.complex, liệu trình điều trị không quá 7 ngày.
Bò được coi là khỏi bệnh viêm tử cung khi không còn các triệu chứng sốt, mệt mỏi, kém ăn, từ cơ quan sinh dục không còn thải dịch ra ngoài những trường hợp nghi ngờ được kiểm tra lại bằng phản ứng Whiteside test cho kết quả (-) tính. Các chỉ tiêu theo dõi bao gồm tỷ lệ khỏi, thời gian điều trị và khả năng sinh sản của bò sữa sau khi được điều trị lành bệnh.
3.6. PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU
Toàn bộ số liệu thu thập được trong quá trình nghiên cứu được tập hợp và xử lý theo phương pháp thống kê trên phần mềm Microsoft Excel. Các tỉ lệ, số trung bình và độ lệnh chuẩn được tính toán trong phần mềm Excel. Tổng số vi khuẩn hiếu khí trong các loại dịch tử cung được lấy logarite tự nhiên để đưa số liệu về phân bố chuẩn. Sau đó việc so sánh tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong hai loại dịch được thực hiện bằng phép so sánh t-test với mức ý nghĩa α= 0,5. Phương pháp t-test được thực hiện trên phần mềm SPSS 22.