PHẦN 3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.5. Phương pháp nghiên cứu
3.5.4. Tìm hiểu đặc điểm sinh học của loài sâu cắn lá nõn ngô M.loreyi
Để nghiên cứu đặc điểm sinh học của M.loreyi chúng tôi tiến hành nuôi sinh học, theo phương pháp nuôi cá thể.
Xác định thời gian phát dục từng pha, vòng đời, khả năng đẻ trứng, tỷ lệ trứng nở của sâu cắn lá nõn ngô M.loreyi
Thí nghiệm nuôi cá thể sâu cắn lá nõn ngô trong hộp nhựa có kích thước (6,5 x 9)cm (Φxh), có nắp được khoét lỗ che lưới mỏng (Φ - 0,5 cm); đáy hộp được lót giấy hút ẩm, cung cấp thức ăn hàng ngày. Các trứng đẻ cùng ngày được đưa vào trong từng đĩa, đánh số thứ tự và theo dõi ngày nở, thời gian phát dục của từng pha. Khi trứng nở cho ăn hàng ngày bằng thức ăn là lá ngô non. Hàng ngày phun nước bổ sung. Thí nghiệm với n = 30 cá thể, đánh số thứ tự từ 1 đến 30. Nuôi trong điều kiện nhiệt độ phòng có ghi lại nhiệt độ, ẩm độ hàng ngày. Khi vũ hóa trưởng thành tiến hành ghép cặp cho đẻ trứng, theo dõi thời gian đẻ trứng, số trứng đẻ trong từng ngày và tỷ lệ trứng nở.
Theo dõi khả năng đẻ trứng của trưởng thành cái sâu cắn lá nõn trong từng ngày, đếm toàn bộ số lượng trứng được đẻ ra và trong toàn bộ thời gian đẻ. Theo dõi từ lúc đẻ đến chết sinh lý để xác định thời gian phát triển các pha, vòng đời, khả năng sinh sản.
Phương pháp xác định thời gian phát dục pha trứng
Kiểm tra hàng ngày, tách trưởng thành đến khi trứng nở thành sâu non. Thời gian phát dục pha trứng tính từ khi trứng được đẻ ra cho đến khi nở ra sâu non tuổi 1. Tổng số trứng theo dõi (n = 200 quả).
Phương pháp xác định thời gian phát dục pha sâu non
Khi trúng nở thành sâu non, tiếp tục theo dõi thời gian phát dục của từng tuổi. Trứng cùng ngày được đưa vào trong từng hộp có kích thước (6,5 x 9)cm (Φxh), có nắp được khoét lỗ che lưới mỏng (Φ - 0,5); đáy hộp được lót giấy hút
ẩm, cung cấp thức ăn hàng ngày. Theo dõi ngày hai lần vào buổi sáng và chiều kết hợp với thay thức ăn, cho tới khi chúng lột xác chuyển sang tuổi 2.
Theo dõi thời gian phát dục của tuổi tiếp theo cũng tương tự, song thức ăn cung cấp nhiều hơn.Thời gian phát dục của mỗi tuổi được tính từ thời điểm lột xác lần trước đến lần lột xác tiếp theo.
Phương pháp xác định thời gian phát dục nhộng
Khi theo dõi thấy sâu non tuổi cuối chuẩn bị vào nhộng thì ngừng cho ăn. Hàng ngày theo dõi sự lột xác hóa nhộng. Ghi chép thời điểm sâu non tuổi cuối bắt đầu hoá nhộng và khi nhộng lột xác hoá trưởng thành. Số cá thể theo dõi n= 30.
Phương pháp xác định thời gian phát dục trưởng thành
Những cá thể nhộng hóa trưởng thành cùng ngày cho ghép cặp trong lồng lưới kích thước 40 x 50 cm, trong lồng lưới có cây ngô 5 - 7 lá.
Hàng ngày quan sát cho đến khi chúng đẻ quả trứng đầu tiên và ghi chép ngày phát hiện. Tiếp tục quan sát cho tới khi trưởng thành chết sinh lý để xác định đời của chúng. Vòng đời của sâu cắn lá nõn ngô được tính từ khi trứng nở đến khi trưởng thành đẻ quả trứng đầu tiên.
Nghiêncứu sức đẻ trứng của sâu cắn lá nõn ngô M.loreyi
Những cá thể của sâu cắn lá nõn ngô vũ hóa trưởng thành cùng ngày, tiến hành cho ghép cặp trong lồng lưới kích thước 40 x 50 cm, trong lồng lưới có cây ngô 5 - 7 lá. Hàng ngày theo dõi số trứng từng cá thể cái đẻ để xác định sức sinh sản, số trứng/cái, tỷ lệ trứng nở.
Chỉ tiêu theo dõi: Thời gian phát triển pha trứng, từng tuổi sâu non, vòng đời, thời gian sống của trưởng thành, khả năng đẻ trứng, tỷ lệ trứng nở.
Để tính thời gian phát dục của từng giai đoạn, tôi chọn ra những cá thể cùng ngày để theo dõi, xác định thời gian phát dục trung bình.