Phần 4 Kết quả nghiên cứu và thảo luận
4.5. Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ, ph và môi trường nuôi cấy đến sự phát
NUÔI CẤY ĐẾN SỰ PHÁT TRIỂN CỦA NẤM Neoscytalidium dimidiatum
4.5.1. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự phát triển của nấm Neoscytalidium dimidiatum trên môi trường PGA dimidiatum trên môi trường PGA
Nhiệt độ, pH môi trường và môi trường nuôi cấy là một trong những yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến sự phát triển của nấm. Nấm N. dimidiatum phát
Neoscytalidium dimidiatum GU172385
Neoscytalidium dimidiatum GU172388
Neoscytalidium dimidiatum GU172382
Neoscytalidium dimidiatum FM211432
Neoscytalidium dimidiatum JQ927342
Neoscytalidium dimidiatum AY819727
Neoscytalidium dimidiatum GU172391
Neoscytalidium dimidiatum FM211433
Neoscytalidium dimidiatum AY213688
Neoscytalidium dimidiatum GQ330902
Neoscytalidium dimidiatum GQ330903
Neoscytalidium dimidiatum FM211430
Neoscytalidium dimidiatum FM211431
Neoscytalidium dimidiatum FJ648577
Neoscytalidium dimidiatum AY819728
Neoscytalidium dimidiatum FM211429
Neoscytalidium dimidiatum HQ439174
Neoscytalidium dimidiatum JX473739
Neoscytalidium dimidiatum JX128103
Neoscytalidium dimidiatum JX128104
Neoscytalidium dimidiatum TLQY2
Neoscytalidium dimidiatum TLQY3
Neoscytalidium dimidiatum EF585540
Neoscytalidium dimidiatum JX839958 Neoscytalidium dimidiatum JX839959 Neoscytalidium dimidiatum JX839960 Neoscytalidium dimidiatum JX839961 Neoscytalidium dimidiatum JX839962 Neoscytalidium dimidiatum JX839963 Neoscytalidium dimidiatum JX839925 100 100 100 93 94 100 0.1
Thanh long/Quảng Ninh
Thanh long/Malaysia Thanh long
Xoài
triển tốt ở nhiệt độ 25-35oC. Tuy nhiên nhiên, nấm cũng tồn tại ở trong đất. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã tiến hành thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ và pH đến sự sinh trưởng phát triển của mẫu nấm N. dimidiatum thu tại Quảng Yên trên môi trường PGA. Nguồn nấm thuần phân lập được chúng tôi tiến hành cấy trên môi trường PGA ở các ngưỡng nhiệt độ 15, 20, 25, 30, 35, 40, các ngưỡng pH 4, 5, 6, 7, 8 ,9 và các môi trường nuôi cấy khác nhau như: WA, PGA, CLA và PGA+dịch chiết thân thanh long. Theo dõi sự phát triển của nấm bằng cách đo đường kính tản nấm (mm) sau các ngày nuôi cấy (bảng 4.11-13).. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự phát triển của nấm N. dimidiatum được trình bày ở bảng 4.11 và hình 4.10.
Bảng 4.11 Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự phát triển của nấm
Neoscytalidium dimidiatum trên môi trường PGA
Nhiệt độ
(oC) 1 Đường kính tản nấm sau các ngày nuôi cấy (mm) 2 3 4 5
15 1,5 11,5 32,3 75,3 90,0 20 7,7 36,8 68,2 90,0 90,0 25 7,7 55,5 90,0 90,0 90,0 30 20,8 90,0 90,0 90,0 90,0 35 63,3 90,0 90,0 90,0 90,0 40 19,3 24,0 23,8 24,5 25,8
Ghi chú: Đường kính đĩa petri: 90mm
Kết quả nghiên cứu cho thấy, nấm N. dimidiatum có thể phát triển được trong phạm vi nhiệt độ rộng từ 15oC – 40oC. Tuy nhiên, nấm phát triển tốt ở nhiệt độ 25oC – 35oC (đường kính tản nấm là 90 mm sau 2-3 ngày nuôi cấy). Nấm N. dimidiatum vẫn có thể phát triển được ở 40oC. Nấm phát triển chậm ở 15oC.
Hình 4.10. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự phát triển của nấm
Nguyễn Văn Hòa và cs (2014) cũng cho thấy nấm N. dimidiatum có thể phát triển được ở phạm vi pH rộng từ 15oC – 40oC, nhưng phát triển tốt nhất ở nhiệt độ 25oC – 35oC. Như vậy, đối chiếu với điều kiện nhiệt độ này, ngoài tự nhiên, điều kiện thời tiết ở Bình Thuận và một số tỉnh phía Nam rất thuận lợi cho sự phát sinh và gây hại của nấm N. dimidiatum.
Tại Quảng Ninh, nhiệt độ tháng 1 tương đối thấp (15-17oC), tỷ lệ bệnh tại thời điểm này cũng tương đối thấp (khoảng 12.0%), nhưng bệnh hại nặng làm cho cành thanh long xuất hiện các vết loét to, liên kết với nhau và làm cho cành thanh long bị gãy. Ở thời điểm tháng 7, do nhiệt độ lúc này là 30-35oC và đặc biệt với lượng mưa lớn kéo dài đã làm cho ẩm độ không khí tăng cao, tạo điều kiện thuận lợi cho bệnh loét thanh long phát triển và gây hại mạnh (tỷ lệ bệnh lên tới khoảng 50.0%) ở các vùng trồng thanh long gây thiệt hại đến năng suất cũng như chất lượng của quả thanh long tại đây.
4.5.2. Ảnh hưởng của pH môi trường nuôi cấy đến sự phát triển của nấm
Neoscytalidium dimidiatum trên môi trường PGA
Nấm N. dimidiatum có thể tồn tại trên tàn dư cây bệnh và trong đất. Đặc biệt, các tàn dư thân cây bị bệnh có thể tồn tại trong đất. Vì vậy, độ pH đất cũng có thể ảnh hưởng đến sự tồn tại và phát triển của nấm N. dimidiatum. Trong nghiên cứu này, 6 ngưỡng pH 4, 5, 6, 7, 8 và 9 được thử nghiệm đối với sự phát triển của nấm N. dimidiatum trên môi trường PGA ở nhiệt độ phòng 28-30oC (ngưỡng nhiệt độ thích hợp cho sự phát triển của nấm N. dimidiatum) và theo dõi sự phát triển của tản nấm sau 1, 2 và 3 ngày nuôi cấy (bảng 4.12; hình 4.11).
Bảng 4.12. Ảnh hưởng của pH đến sự phát triển của nấm
Neoscytalidium dimidiatum trên môi trường PGA pH Đường kính tản nấm sau các ngày nuôi cấy (mm)
1 2 3 4 22,2 80,0 90,0 5 26,7 80,0 90,0 6 30,0 85,0 90,0 7 38,3 85,0 90,0 8 31,0 90,0 90,0 9 16,3 82,5 90,0
Hình 4.11. Sự phát triển của nấm Neoscytalidium dimidiatum ở các pH khác nhau sau 2 ngày nuôi cấy
Kết quả cho thấy, nấm N. dimidiatum có thể phát triển được ở pH4-9 (bảng 4.12; hình 4.11). Tuy nhiên, nấm N. dimidiatum phát triển tốt nhất ở pH8, đường kính tản nấm là 90mm sau 2 ngày nuôi cấy. Nấm phát triển chậm ở pH4-5, đường kính tản nấm là 80mm sau 2 ngày nuôi cấy. Khi nghiên cứu về ảnh hưởng của pH đến sự phát triển của nấm N. dimidiatum, Yi el al. (2013) cũng cho thấy nấm N. dimidiatum phát triển tốt ở pH8.
4.5.3. Ảnh hưởng của một số môi trường nuôi cấy đến sự phát triển của nấm
Neoscytalidium dimidiatum
Môi trường nuôi cấy cũng là một trong những yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến sự phát triển của nấm N. dimidiatum. Trong nghiên cứu này, 4 môi trường khác nhau gồm WA, PGA, CLA và PGA+dịch chiết thân thanh long được thử nghiệm. Sự phát triển của nấm N. dimidiatum được theo dõi sau 5 ngày nuôi cấy ở nhiệt độ phòng 28-30oC (bảng 4.13; hình 4.12).
Bảng 4.13. Ảnh hưởng của một số môi trường nuôi cấy đến sự phát triển của nấm Neoscytalidium dimidiatum.
Ngày sau cấy
Đường kính tản nấm sau các ngày nuôi cấy (mm)
WA PGA CLA PGA + dịch chiết cây
thanh long 1 16,0 28,0 14,0 29,0 2 35,0 82,0 33,0 85,0 3 56,0 90,0 59,0 90,0 4 75,0 90,0 75,0 90,0 5 90,0 90,0 90,0 90,0
Hình 4.12. Sự phát triển của nấm Neoscytalidium dimidiatum ở các môi trường khác nhau sau 3 ngày nuôi cấy
Kết quả cho thấy, nấm N. dimidiatum có thể phát triển được ở các môi trường như WA, PGA, CLA và PGA+dịch chiết cây thanh long. Tuy nhiên, nấm phát triển tốt nhất ở PGA và PGA+dịch chiết thân thanh long. Sau 3 ngày nuôi cấy, đường kính tản nấm là 90 mm. Kết quả nghiên cứu này cũng phù hợp với kết quả nghiên cứu của Võ Thị Ngọc Liễu và cs (2013) và Yi et al. (2013). Ngoài ra, khác với các nấm gây bệnh khác, nấm