3.1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU
Đàn bò sữa nuôi tại một số địa phương thuộc khu vực đồng bằng sông Hồng.
3.2. ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN NGHIÊN CỨU 3.2.1. Địa điểm nghiên cứu 3.2.1. Địa điểm nghiên cứu
Các hộ chăn nuôi bò sữa tại Hà Nội, Vĩnh Phúc và Bắc Ninh.
3.2.2. Thời gian nghiên cứu
Từ tháng 5/2016 đến tháng 5/2017.
3.3. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU
3.3.1. Đánh giá thực trạng bệnh viêm tử cung
- Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung trên đàn bò sữa
- Phân loại yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung + Yếu tố mùa vụ đến tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung.
+ Yếu tố lứa đẻ đến tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung.
+ Giai đoạn sau đẻ và chờ phối đến tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung. + Yếu tố sản lượng sữa đến tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung.
3.3.2. Xác định biến đổi của một số chỉ tiêu lâm sàng khi bò bị viêm tử cung
- Sự biến đổi về thân nhiệt. - Sự biến đổi về nhịp tim. - Sự biến đổi về hô hấp.
- Sự biến đổi về phản ứng của cơ thể: đau, co nhỏ của tử cung. - Sự biến đổi về ăn, uống.
- Dịch viêm ở cơ quan sinh dục.
3.3.3. Xác định sự biến đổi của một số vi khuẩn hiếu khí thường gặp trong dịch viêm tử cung dịch viêm tử cung
- Tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong dịch tử cung của bò bình thường và bò mắc bệnh viêm tử cung.
- Thành phần vi khuẩn hiếu khí có trong dịch tử cung của bò bình thường và bò mắc bệnh viêm tử cung.
- Xác định tính mẫn cảm với kháng sinh của một số loại vi khuẩn hiếu khí phân lập được từ dịch viêm tử cung.
3.3.4. Thử nghiệm biện pháp điều trị
Thử nghiệm biện pháp điều trị bằng các phác đồ khác nhau và theo dõi tỷ lệ khỏi, thời gian khỏi và khả năng sinh sản của bò sau khi khỏi bệnh.
3.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.4.1. Phương pháp đánh giá thực trạng bệnh viêm tử cung
- Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung trên đàn bò sữa tại địa phương nghiên cứu được xác địnhbằng phương pháp điều tra, phỏng vấn trực tiếp người chăn nuôi kết hợp với việc theo dõi trực tiếp và sử dụng phương pháp Whiteside test (Bhat
et al., 2014) để kiểm tra mẫu dịch lấy từ bò bị viêm tử cung hay bò không bị viêm tử cung: lấy 1ml dịch tử cung cần kiểm tra vào ống nghiệm sạch, sau đó cho thêm 1ml dung dịch NaOH 5% vào ống nghiệm và đun sôi. Để ống nghiệm trong giá đựng cho tới khi dung dịch nguội và đánh giá kết quả như sau:
+ Nếu dung dịch không có màu thì được cho là dịch tử cung bình thường. + Nếu dung dịch có màu vàng thì dịch được cho là dịch viêm tử cung. - Phân loại yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung bằng cách phân loại những bò bị viêm tử cung theo từng yếu tố: mùa vụ, lứa đẻ, sản lượng sữa và sau đẻ, chờ phối.
3.4.2. Phương pháp xác định sự biến đổi một số chỉ tiêu lâm sàng khi bò bị viêm tử cung viêm tử cung
- Sự biến đổi về thân nhiệt của bò được xác định bằng nhiệt kế đo ở trực tràng bò sữa, mỗi con 3 lần. So sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung.
- Sự biến đổi về nhịp tim của bò được xác định bằng cách đếm số lần động mạch đuôi đập trong vòng 1 phút, mỗi con 3 lần. So sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung.
- Sự biến đổi về hô hấp của bò được xác định bằng cách đếm số lần hít vào, thở ra trong vòng 1 phút, mỗi con 3 lần. So sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung.
- Sự biến đổi về phản ứng của cơ thể: đau, co nhỏ của tử cung được xác định bằng cách khám qua trực tràng và phản ứng co, đạp 2 chân sau. So sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung.
- Sự biến đổi về ăn, uống được xác định theo dõi lượng thức ăn, nước uống của bò ở mỗi lần cho ăn, uống. So sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung.
- Dịch viêm ở cơ quan sinh dục được xác định bằng cách kiểm tra dịch tiết ra từ cơ quan sinh dục. So sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung.
3.4.3. Phương pháp xác định sự biến đổi của một số vi khuẩn hiếu khí thường gặp trong dịch viêm tử cung thường gặp trong dịch viêm tử cung
- Xác định tổng số và thành phần vi khuẩn hiếu khí được thực hiện theo tiêu chuẩn phòng thí nghiệm ISO - 17025.
- Xác định tính mẫn cảm của vi khuẩn với một số loại kháng sinh được đánh giá theo “Các tiêu chuẩn lâm sàng trong phòng thí nghiệm của Hội đồng Quốc gia Mỹ” (The United State National Committee for Clinical Laboratory Standards guidelines - NCCLS).
3.4.4. Xác định phác đồ điều trị hữu hiệu bằng phương pháp theo dõi các chỉ tiêu tỷ lệ khỏi, thời gian điều trị và khả năng sinh sản của bò sữa sau khi tiêu tỷ lệ khỏi, thời gian điều trị và khả năng sinh sản của bò sữa sau khi được điều trị lành bệnh.
* Phác đồ 1: Thụt rửa tử cung bằng dung dịch Rivanol 0,1% ngày 1 lần, sau khi thụt rửa kích thích cho dung dịch thụt rửa chảy hết ra ngoài, dùng
Norfloxacin 5mg/kg thể trọng pha với 100ml nước cất bơm vào tử cung; kết hợp điều trị toàn thân bằng ADE, B.complex. Liệu trình điều trị không quá 5 ngày.
* Phác đồ 2: Dùng 6 ml Oxytocin tiêm dưới da, thụt rửa tử cung 500ml dung dịch Lugol 0,1%, Norfloxacin 5mg/kg thể trọng pha với 100ml nước cất bơm vào tử cung ngày một lần; kết hợp điều trị toàn thân bằng ADE, B.complex. Liệu trình điều trị không quá 5 ngày.
* Phác đồ 3: Dùng Lutalyze một dẫn xuất của PGF2α tiêm dưới da 2ml (25mg), tiêm 1 lần; thụt rửa tử cung 500ml dung dịch Lugol 0,1%, dùng
Norfloxacin 5mg/kg thể trọng pha với 100ml nước cất bơm vào tử cung ngày một lần; kết hợp điều trị toàn thân bằng ADE, B.complex. Liệu trình điều trị tối đa là 5 ngày.
3.5. PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU
Toàn bộ số liệu thu thập được trong quá trình nghiên cứu được tổng hợp và xử lý theo phương pháp thống kê trên phần mềm Microsoft Excel. Các tỉ lệ, số trung bình và độ lệnh chuẩn được tính toán trong phần mềm Excel. Tổng số vi khuẩn hiếu khí trong các loại dịch tử cung được lấy logarite tự nhiên để đưa số liệu về phân bố chuẩn. Sau đó việc so sánh tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong hai loại dịch được thực hiện bằng phép so sánh t-test với mức ý nghĩa α= 0,5.