Hàm lượng tanin của lá Sâm Xuyên Đá được phân tích theo phương pháp chuẩn độ Leventhal [10]
28 Nguyên tắc:
Tanin là hợp chất khử, bị oxy hóa bởi KmnO4 trong môi trường axit với chất chỉ thị Indigocarmin sẽ tạo thành khí cacbonic và nước. Đồng thời làm mất màu xanh của Indigocarmin theo phản ứng sau:
Tanin + KMnO₄ CO₂ + H₂O - Chuẩn bị dung dịch nước chiết:
Dùng nước sôi để chiết rút ra chất hoà tan của trà nhằm thu được dung dịch có nồng độ 8 - 10g chè/lít.
Bước 1: Cân chính xác trên cân phân tích 10g trà vào giấy sạch sấy nhẹ 500C trong một giờ.
Bước 2: Cho chè sấy vào cối sứ, nghiền nhỏ mịn và chuyển hết vào bình nón 250ml, thêm vào 100ml nước cất sôi, ngâm trong 15 phút, cứ sau 5 phút lại lắc nhẹ rồi lọc qua phễu lọc vào bình định mức 1 lít. Lại thêm vào bình nón 100ml nước sôi, ngâm 15 phút, lại lọc... cứ như vậy sau 5-7 lần để rút hết chất tan ra khỏi chè, toàn bộ nước lọc chuyển hết vào định mức ban đầu, làm nguội, thêm nước cất đến ngấn bình, lắc kỹ. Dùng dung dịch này (dung dịch A) để xác định các thành phần hoá học của chè.
Chuẩn bị:
- Nguyên liệu: Dịch trà - Hóa chất:
+ Indigocacmin 0,1%: Hòa tan 0,1g Indigocarmin trong 5ml H₂SO₄ đậm đặc, chuyển vào bình định mức có dung tích 100ml sau đó thêm nước cất đến vạch 100ml, lắc kỹ, lọc lấy dịch trong.
+ H2SO4 ¼ (25%) (dung dịch axit đậm đặc): 25ml H₂SO₄ +75ml nước + KMnO4 0,1N:
Pha dung dịch KMnO₄ 0,1N:
Nồng độ mol/l của KMnO₄: CM=CN/5=0,1/5=0,02M =) n KMnO₄ = 0,02*0,25 = 0,005 (mol)
=) n KMnO₄ = 0,005*15= 0,79 (g)
Cân 0,79(g) KMnO₄ hòa tan bằng nước cất, cho vào bình định mức 250ml, tráng cốc nhiều lần, thêm nước đến vạch 250ml, đậy nắp và lắc đều.
29 - Dụng cụ và thiết bị:
+ Pipet
+ Bát sứ trắng 1lit + Đũa thủy tinh + Buret
Tiến hành thí nghiệm:
Bước 1: Dùng pipet hút chính xác 10ml dung dịch A cho vào bát sứ trắng dung tích 1 lít, thêm 750ml nước cất và 10ml dung dịch chỉ thị Indigocacmin 0,1% và 10ml H₂SO₄ ¼ (25%).
Bước 2: Cho KMnO₄ 0,1N vào buret tới vạch.
Bước 3: Chuẩn độ dung dịch bằng KMnO₄ 0,1N. Trong quá trình chuẩn độ khuấy mạnh bằng đũa thuỷ tinh. Chuẩn độ với tốc độ 1 giọt/s.
Bước 4: Đọc kết quả: Khi dung dịch xuất hiện màu vàng xanh (màu hỗn hợp trong bát sứ dần dần biến đổi từ xanh qua xanh xám, xanh ánh, vàng xanh) dừng chuẩn độ và đọc kết quả lượng KMnO₄ 0,1N tiêu tốn.
Lưu ý: - Cần chuẩn độ 2 - 3 mẫu trong cùng điều kiện.
- Chuẩn độ một mẫu trắng song song (thay 10ml dung dịch A bằng 10ml nước cất).
Tính kết quả:
Hàm lượng % Tanin theo chất khô của chè được tính theo công thức:
𝑋 =(𝑎 − 𝑏). 𝑉2. 0,00487.100 𝑉1. 𝑤
Trong đó:
+ a: Thể tích KmnO4 0,1N dùng để chuẩn độ mẫu dung dịch nước chè, ml + b: Thể tích KmnO4 0,1N dùng để chuẩn độ mẫu trắng, ml
+ V1: Thể tích dung dịch A: V2: 1000ml
+ W: Lượng chất khô của chè trong mẫu ban đầu