3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài
3.3.3. Kết quả kiểm tra độc lực vi khuẩn Salmonella trên động vật thí nghiệm
Từ 20 chủng vi khuẩn Salmonella phân lập và đã xác định những đặc tính sinh hóa đặc trưng ở trên chúng tôi tiến hành chọn ngẫu nhiên 9 chủng vi khuẩn đại diện cho cả 3 vùng để nuôi cấy trong môi trường giàu dinh dưỡng BHI ở 37oC, sau 24h nuôi cấy kiểm tra nồng độ vi khuẩn sau đó tiến hành thử nghiệm tiêm cho chuột nhắt trắng với liều 0,2ml/con, vị trí tiêm là xoang phúc mạc, lô đối chứng dùng nước muối sinh lý 0,9%. Mỗi chủng thử nghiệm trên 2 chuột, sau khi tiêm tiếp tục theo dõi tình trạng sức khỏe chuột trong 3 ngày (72h), khi chuột chết mổ khám, kiểm tra bệnh tích, lấy bệnh phẩm để phân lập lại vi khuẩn. Kết quả được trình bày ở Bảng 3.6.
Bảng 3.6. Kết quả kiểm tra độc lực của vi khuẩn Salmonella trên chuột nhắt trắng
Vùng Ký hiệu chủng Số chuột tiêm (con) Số chuột chết theo
thời gian (con) Số chuột chết Kết quả phân lập lại 12 – 24 giờ 25 – 72 giờ Tổng số (con) Tỷ lệ (%) Ngập nước HM72 2 0 2 2 100 + HM85 2 0 2 2 100 + TQN20 2 1 1 2 100 + Ven sông HĐ39 2 2 0 2 100 + HĐ28 2 0 2 2 100 + HT06 2 1 1 2 100 + Vùng khô HS86 2 0 2 2 100 + HS36 2 2 0 2 100 + HP02 2 0 2 2 100 +
Kết quả ở Bảng 3.6 cho thấy, 9 chủng Salmonella đem thử độc lực đều có khả năng gây chết 100% chuột thử nghiệm sau 2 ngày tiêm thử nghiệm. Trong thời gian theo dõi chúng tôi nhận thấy những chủng có độc lực cao gây chết chuột sớm trước 24 giờ sau khi tiêm là chủng HĐ39 thời gian chết 13 – 14 giờ sau khi tiêm, tiếp theo là chủng HS36 thời gian chết 16 – 18 giờ sau khi tiêm và 2 chủng HT06 và TQN20 thời gian chết 23 – 25 giờ sau khi tiêm. Những chủng gây chết chậm MH72, HM85 thời gian gây chết sau 2 ngày tiêm thời gian gây chết từ 50 – 56 giờ sau khi tiêm; chủng HP02, HĐ28 thời gian gây chết 41- 52 giờ sau khi tiêm. Thời gian gây chết chuột phụ thuộc vào các yếu tố độc lực của vi khuẩn, trong đó có sự tham gia của nội độc tố (Endotoxin), vi khuẩn có độc lực càng mạnh thời gian giết chuột càng nhanh.
Từ kết quả trên chúng tôi nhận thấy ở mỗi vùng trong 3 vùng theo dõi đều tồn tại cả chủng có độc lực cao và chủng có độc lực thấp. Trong số 9 chủng thử nghiệm 2 chủng có độc lực cao gây chết 100% chuột trong 1 ngày sau khi tiêm, 2 chủng gây chết 50% chuột trong 1 ngày sau khi tiêm, những chủng còn lại gây chết chuột 3 ngày sau khi tiêm. Trước đó chúng tôi có thử nghiệm độc lực của 9 chủng
Salmonella trên vịt con 10 ngày tuổi, thực hiện như phương pháp trên nhưng những
chủng này không gây chết vịt, nguyên nhân theo chúng tôi có thể là do vịt con đã nhận được kháng thể từ vịt mẹ.
Kết quả trên cũng cho thấy số lượng chuột chết trong thời gian từ 12 – 24 giờ là 6/18 con chiếm tỷ lệ 33,3%; số chuột chết trong khoảng thời gian 25 – 72 giờ sau khi tiêm là 12/18 con, tỷ lệ 66,7%.
Từ kết quả trên cho thấy những chủng có độc lực cao là HĐ39, HS36, HT06 và TQN20. Đối chiếu với kết quả kiểm tra đặc tính sinh hóa ở trên thì đây là những chủng có những đặc tính điển hình của vi khuẩn Salmonella. Những chủng này có mặt ở cả 3 vùng theo dõi.
Chuột chết do tiêm truyền vi khuẩn Salmonella được mổ khám để kiểm tra bệnh tích của bệnh. Bệnh tích chung thường thấy là xoang bụng chướng hơi, tích dịch, tim tụ máu, gan, lách sưng to nhão, có nhiều điểm xuất huyết, ruột căng phồng nhiều hơi, thận sưng to, tím đen… Khi tiến hành phân lập vi khuẩn từ chuột chết, 100% các trường hợp đều thấy sự có mặt của vi khuẩn Salmonella.
Kết quả xác định độc lực của các chủng vi khuẩn Salmonella spp. trong nghiên cứu của chúng tôi phù hợp với kết quả của Phạm Hồng Ngân (2008): 63,89% số chủng giết chết 100% số chuột thí nghiệm, 36,11% số chủng giết chết 50% động vật thí nghiệm, và cũng phù hợp với kết quả của Nguyễn Văn Sửu và cs (2005): 72 giờ sau khi tiêm, tổng số chuột chết là 40/42 (95,24%).
Hình 3.13. Mổ khám chuột