nguyên bào sợi
Tương tự, mức độ gây độc của cao chiết cây Lan Kim Tuyến cũng được xác định trên cả 2 dòng nguyên bào sợi. Các tế bào WS1 và NHDF lần lượt được xử lý với cao chiết ở các nồng độ khác nhau. Khả năng sống của tế bào cũng được xác định bằng phương pháp thử WST-1. Kết quả cho thấy, ở các
52
nồng độ và thời điểm xử lý khác nhau, mức độ gây độc 50% quần thể tế bào (IC50) của cao chiết đều cao hơn 200 μg/ml trên cả hai dòng nguyên bào sợi WS1 và NHDF (Hình 3.6). Như vậy, cao cao chiết cây Lan Kim Tuyến không gây độc trên dòng tế bào thường.
Hình 3.6. Ảnh hưởng của cao chiết lên sự tăng sinh của nguyên bào sợi. Sự tăng
sinh tế bào WS1 và NHDF được xác định bằng WST-1 sau khi xử lý với cao chiết ở các nồng độ khác nhau. Kết quả biểu thị bằng giá trị trung bình ± SD của ba lần lặp lại thí nghiệm. **p < 0,01 và *p < 0,05 khi so sánh với đối chứng.
Trong luận văn này, cao chiết tổng từ Lan Kim Tuyến cho thấy các tác dụng ức chế tăng sinh trên các dòng tế bào ung thư vú, như tế bào MCF7 và tế bào BT474 với IC50 là 82,56 μg/ml và 95,02 μg/ml (Hình 3.2). Theo nghiên cứu của Geran và cộng sự, cao chiết tổng Lan Kim Tuyến trong phạm vi nghiên cứu
53
này thể hiện hoạt động kháng ung thư ở mức trung bình [36]. Cao chiết ức chế sự tăng sinh của tế bào tế bào MCF7 và tế bào BT474 phù thuộc vào nồng độ sử dụng. Những kết quả này cũng được ghi nhận bởi sự thay đổi hình thái tế bào và hình thái nhân như sự co rút tế bào chất và không bào quan sát được trong các tế bào được xử lý cao chiết (Hình 3.4). Ngoài ra, kết quả đánh giá khả năng gây độc của cao chiết trên cả 2 dòng tế bào bằng phương pháp xác định hàm lượng enzyme LDH giải phóng ra môi trường cũng cho kết quả tượng tự (Hình 3.3). Kết quả nghiên cứu phù hợp với một số kết quả nghiên cứu trước đây. Nghiên cứu của Ho và cộng sự cho thấy cao chiết nước của Lan Kim Tuyến loài
Anoectochilus formosanus có tác dụng gây độc với tế bào ung thư vòm họng SCC-25. Ở nồng độ 1000 g/mL, cao chiết ức chế hơn 80% sự tăng sinh của tế bào SCC-25 khi so sánh với nhóm đối chứng [37]. Tương tự, một nghiên cứu khác cho thấy cao chiết nước của Lan Kim Tuyến loài Anoectochilus roxburghii
ức chế mạnh sự tăng sinh tế bào ung thư tuyến tiền liệt PC-3 với giá trị IC50
khoảng 509.24 g/mL [38]. Trong khi đó, nghiên cứu của Jue cho thấy cao chiết Lan Kim Tuyến loài A.roxburghii có thể gây độc tế bào ung thư phổiNCI-H446 với IC50 là 70.17 μg/mL. Nghiên cứu cũng cho thấy cơ chế gây độc tế bào của cao chiết thông qua việc kích hoạt con đường apoptosis [39]. Sự khác biệt về hiệu quả gây độc của các cao chiết Lan Kim Tuyến có thể do sự khác biệt và nguồn mẫu khai thác (vị trí địa lý, thỗ nhưỡng nơi khai thác…) cũng như phương pháp tách chiết khác nhau của mỗi nhóm nghên cứu.
Ngược lại, tác dụng gây độc tế bào không quan sát thấy trên hai dòng nguyên bào sợi ở nồng độ tương đương (IC50> 200μg/ml). Các kết quả này cho thấy rằng các dòng tế bào ung thư nhạy cảm với cao chiết Lan Kim Tuyến hơn các dòng tế bào bình thường. Một kết quả tương tự đã được báo cáo bởi nghiên cứu của Shyur cho thấy cao chiết ethyl acetate của Lan Kim Tuyến loài
Anoectochilus formosanus gây độc tế bào đối với tế bào ung thư vú MCF7, nhưng ít gây độc đối với tế bào biểu mô người H184B5F5/M10 [40]. Một số nghiên cứu chỉ ra rằng một số hợp chất sinh học trong cao chiết ảnh hưởng đến khả năng tăng sinh của tế bào ung thư. Ngoài ra, tốc độ phát triển nhanh và sự di cư của tế bào ung thư có thể dẫn đến độ nhạy cao của tế bào ung thư với các hợp chất kháng ung thư có trong cao chiết.
54