THỰC NGHIỆM
3.2.2.1. Nuôi cấy mốc trung gian:
Chuẩn bị môi trường:
_ 300 g giá đậu và 1000 ml nước cất, đem đun sôi trong 30 phút, chắt lấy nước, lọc qua vải mùng, thu được dịch.
_ Dịch thêm vào 20 g sucrose và 25 g agar, đun sôi khuấy đều cho tan hết agar để tạo mơi trường ni cấy mốc. Sau đó chiết dịch vào ống nghiệm có nắp, phần cịn lại giữ để đổ đĩa.
_ Đem ống nghiệm chứa dịch, đĩa petri, phần dịch dư đem hấp tiệt trùng 1210C, 1 atm trong 15 phút. Sau đó ống nghiệm để nghiêng tạo mơi trường thạch nghiêng. Phần dịch dư tiến hành đổ đĩa trong phịng vơ trùng.
_ Gạo lức đem hấp cách thủy, trương nở ra. Cân chính xác 63 g gạo lức đã hấp cách thủy và 7 g bánh dầu, trộn đều, cho vào hai bình tam giác 250 ml, mỗi bình 35 g. Hấp tiệt trùng 1210C, 1 atm trong 15 phút.
Cấy chuyền mốc:
_ Tiến hành cấy chuyền mốc từ bình giống mốc có sẵn trong phịng vơ trùng. _ Dùng que cấy thẳng lấy sinh khối, chấm một điểm lên bề mặt môi trường
_ Cấy chuyền mốc từ đĩa sang ống thạch nghiêng. Dùng que cấy thẳng lấy sinh khối rồi cấy ria trên môi trường thạch. Ủ ở 320C trong 48 giờ.
_ Nước muối sinh lý 0.85% đã hấp tiệt trùng, để nguội. Hút 2 ml cho vào ống thạch nghiêng, dùng pipet sục nước muối để hòa khuẩn lạc trên bề mặt thạch nghiêng. Hút 0.5 ml dịch rưới đều lên bề mặt mơi trường gạo lức trong hai bình tam giác, lấy bơng gịn khơng thấm làm nút, bên ngoài bọc giấy dầu. Ủ ở 320C, theo dõi sự phát triển của mốc trong nhiều ngày.
Hình 3.1: Hai mơi trường ni mốc sau khi cấy 3 ngày